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1Well内に極小のオルガノイドを多数形成 Gri3D® ハイドロゲルマイクロキャビティプレート

メーカー名：InSphero AG

InSphero社の「Gri3D®ハイドロゲルマイクロキャビティプレート」は、1ウェル内に多数のマイクロキャビティ（微小空間）を備えた、三次元培養用96ウェルプレートです。ウェル底面に配置された非接着性のPEG（ポリエチレングリコール）ハイドロゲルにより、細胞を播種するだけで、均一なサイズのオルガノイドを1ウェルあたり多数形成させることが可能です。自動分注機やハイコンテンツイメージングシステムにも対応しており、多数のオルガノイドを用いたアッセイに適しています。

本プレートにて作製された腸管オルガノイドを用いた消化管毒性受託評価サービスも弊社で取り扱っております。

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図1:
Gri3D® Plate（96ウェルフォーマット）の1ウェル内に多数のマイクロウェルが配置され、極小サイズのオルガノイドが均一に形成されます。

特長

1ウェル内に、31～121個のU底マイクロウェルが配置
オルガノイドの流出・損傷を防ぐ専用ピペッティングポート
自動リキッドハンドリングシステム対応
底面が同一Z軸に揃うため、多数のオルガノイドを一度にピントズレなく撮影可能

プレート構造

図2: Gri3D® Plateの構造
専用のピペッティングポート（Lateral pipetting port）により、ハイドロゲル内のオルガノイドを乱すことなく、安全に培地交換が可能です。また、フラットなウェル底面は、そのまま顕微鏡での高解像度イメージングに適しています。

データ例

図3：Gri3D®（イメージングボトム、600 µm）を用いて作製したBBBオルガノイドの免疫蛍光染色画像
内皮細胞（P-gp：赤）、ペリサイト（NG2：緑）、アストロサイト（GFAP：青）。本製品を用いて、複数細胞からなる複雑なオルガノイドも安定して形成させることが可能である。

図4: Gri3D®を用いたハイスループットイメージングと疾患モデルにおける機能的応答
ヒト直腸オルガノイドをGri3D®上で7日間培養後、炎症性サイトカインおよび抗炎症薬を曝露し、96時間後にLive/Deadアッセイを用いて評価した。（図上）生細胞を緑（Calcein AM）、死細胞を赤（EthD-1）で蛍光染色した。Gri3D®はすべてのマイクロキャビティが同一平面上に配置される構造のため、多数のオルガノイドをピントズレなく一括で撮影でき、ハイスループットイメージングが可能である。（図下）取得した画像から、個々のオルガノイドにおける生細胞のシグナル強度（左）と死細胞の面積（右）を定量化した。炎症性サイトカイン（Inflammatory cocktail）曝露による生存率の低下と、抗炎症薬（infliximab）添加による回復が確認された。 Gri3D®で構築したオルガノイドが刺激に対して機能的な応答を示すこと、ならびにその応答をハイスループットに評価できることが示された。

文献情報（オルガノイド実績）

網膜（RETINA）
・Decembrini, S. et al. Hydrogel-based milliwell arrays for standardized and scalable retinal organoid cultures. Scientific Reports 10, 10275 (2020).

肝臓（LIVER）
・Meseguer-Ripolles, J. et al. Protocol for automated production of human stem cell derived liver spheres. STAR Protocols 2, 100502 (2021).

腸管（INTESTINE）
・Brandenberg, N. et al. High-throughput automated organoid culture via stem-cell aggregation in microcavity arrays. Nat Biomed Eng 4, 863?874 (2020).

がん免疫（(IMMUNO)-ONCOLOGY）
・Dutta, D. et al. Probing the killing potency of tumor-infiltrating lymphocytes on microarrayed autologous tumoroids. bioRxiv 2021.03.30.437679 (2021).

血液脳関門（BLOOD-BRAIN BARRIER）
・Simonneau, C. et al. Investigating receptor-mediated antibody transcytosis using blood-brain barrier organoid arrays. Fluids and Barriers of the CNS 18, 43 (2021).

ガストルロイド（GASTRULOID）
・Kagawa, H. et al. Generating human blastoids modeling blastocyst-stage embryos and implantation. Nature Protocols 18, 1584?1620 (2023).

骨髄（BONE MARROW）
・Giger, S. et al. Microarrayed human bone marrow organoids for modeling blood stem cell dynamics. APL Bioengineering 6, 036101 (2022).

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Plastic, 400 um	INP	GRI3D-96P-S-96-400	1 PLATE	￥190,000
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Plastic, 500 um	INP	GRI3D-96P-S-96-500	1 PLATE	￥190,000
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Plastic, 600 um	INP	GRI3D-96P-S-96-600	1 PLATE	￥190,000
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Plastic, 800 um	INP	GRI3D-96P-S-96-800	1 PLATE	￥190,000
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Imaging, 400 um	INP	GRI3D-96IBI-S-96-400	1 PLATE	￥200,000
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Imaging, 500 um	INP	GRI3D-96IBI-S-96-500	1 PLATE	￥200,000
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Imaging, 600 um	INP	GRI3D-96IBI-S-96-600	1 PLATE	￥200,000
Gri3D^(R) Hydrogel Microcavity Plate - Imaging, 800 um	INP	GRI3D-96IBI-S-96-800	1 PLATE	￥200,000