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記事ID : 13312
研究用

CPDs 特異的モノクローナル抗体を使用した ELISA kit高感度紫外線誘発 DNA 損傷 CPD 測定キット

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高感度紫外線誘発DNA損傷測定キット

紫外線誘発 DNA 損傷 CPD 測定 ELISA キットは、紫外線(UV)によって誘発される DNA 損傷であるシクロブタン型ピリミジンダイマー(CPDs)を、ELISA 法により高感度に検出・測定します。

本キットは、CPDs の検出・定量用抗体のスタンダートとして長年にわたり世界中で使用されてきた CPDs 特異的モノクローナル抗体(クローン:TDM-2) を初めて使用した ELISA キットです。

 

提供者: 奈良県立医科大学先端医学研究機構ラジオアイソトープ実験施設 研究教授 森 俊雄 先生

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背景

紫外線(UV)による DNA 損傷

紫外線を浴びすぎると日焼け、光老化、皮膚がん、目の障害、免疫能の低下など、さまざまな悪影響が生じます。この健康影響に深く関係しているのが DNA 損傷です。紫外線照射により DNA のピリミジン塩基が連続した箇所で変化が生じ3種類の主要ピリミジン二量体(シクロブタン型ピリミジンダイマー/CPD、6-4型光産物/6-4PP、Dewar 型光産物/DewarPP)が形成されます。これらの紫外線損傷は DNA の複製や転写に影響を与え、突然変異やアポトーシスなどを引き起こします。

シクロブタン型 ピリミジンダイマー(CPD)
シクロブタン型ピリミジンダイマー(CPD)

使用目的

本キットは、紫外線に関連する細胞応答、癌研究、光生物学、皮膚疾患、眼科、免疫学、美容など幅広い研究分野において強力な研究ツールとなります。

特長

構成内容

  • 硫酸プロタミンコート済み ELISA プレート (12 x 8 ウェルストリップ)
  • ポジティブスタンダード - ウシ胸腺 DNA、UVC 照射(10 J/m2
  • ネガティブスタンダード - ウシ胸腺 DNA、UV照射なし
  • アッセイ希釈液(10×)
  • 洗浄バッファー(20×)
  • ブロッキング試薬(50×)
  • 抗 CPDs モノクローナル抗体(クローン TDM-2)(100×)
  • ビオチン標識二次抗体(100×)
  • ストレプトアビジン‐ペルオキシダーゼ(100×)
  • OPD タブレット
  • OPD 希釈液(10×)
  • 停止液
  • プレートカバーフィルム

使用例

吸光度で測定
図1
紫外線照射直後、あるいは修復後の細胞からゲノム DNA を精製し、一定量を 96 プレートにコートする。TDM-2 抗体を DNA サンプル中の CPDs に結合させた後、さらにビオチン標識2次抗体および酵素標識ストレプトアビシンを結合させ、シグナルを増幅させる。最後に、基質を加え CPDs に対する抗体結合量を 492 nm の吸光度で測定する。

紫外線照射後の修復
図2
ヒト細胞における紫外線によるシクロブタン型ピリミジンダイマー(CPD) の誘発とその修復。10 J/m2 の紫外線照射後の修復を調べた。

高感度紫外線誘発 DNA 損傷 CPD 測定キット

製品リニューアルのご案内

この度、弊社では「High Sensitivity CPD/Cyclobutane Pyrimidine Dimer ELISA kit」をリニューアル発売することとなりました。

従来品からの変更内容は下記の通りです。機能性を改良し、バックグラウンドの吸光度を抑えたまま、従来品より高いシグナル吸光度の獲得を実現致しました。
後継品もご愛顧のほど、よろしくお願い申し上げます。

■ 変更内容
  従来品 後継品 NEW
製品番号 NM-MA-K001 NM-MA-K003
Biotinylated 2nd antibody の性状 凍結乾燥品 液体品
Streptavidin-peroxidase の性状 凍結乾燥品 液体品
Positive standard / Negative standard の性状 凍結乾燥品 液体品
OPD Tablet 2 錠 3 錠
プロトコールの変更(試薬濃度条件等) - あり
■ 販売時期

後継品(NM-MA-K003) 販売期間の開始時期:平成 27 年 9 月 1 日
従来品(NM-MA-K001) 販売期間の終了時期:平成 28 年 2 月 29 日

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
High Sensitivity CPD ELISA kit Ver.2詳細データ CSR NM-MA-K003 1 KIT
[96 TEST]
¥100,000
High Sensitivity CPD ELISA kit詳細データ CSR NM-MA-K001 1 KIT
[96 TEST]
販売終了

【関連商品】 標準DNA

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
UVC-irradiated DNA samples詳細データ CSR NM-MA-R010 5*10 UG
[[ 0, 2.5, 5, 7.5, 10 J/m2 ]]
¥30,000

参考文献

CPDs 特異的モノクローナル抗体(クローン:TDM-2)を使用した論文は、これまでに 200 報以上報告されています。

  1. Mori, T., et al., Photochem. Photobiol. 54, 225-232 (1991)
  2. Matsunaga, T., et al., Photochem. Photobiol. 54, 403-410 (1991)
  3. Potten, C.S., et al., Int. J. Radiat. Biol. 63, 313-324 (1993)
  4. Kobayashi, N., et al., J. Invest. Dermatol. 101, 685-689 (1993)
  5. Todo, T., et al., Nature 361, 371-374 (1993)
  6. Nakane, H., et al., Nature 377, 165-168 (1995)
  7. Komatsu, Y., et al., Nucleic Acids Res. 25, 3889-3894 (1997)
  8. Kobayashi, N., et al., J. Invest. Dermatol. 110, 806-810 (1998)
  9. Nakagawa, A., et al., J. Invest. Dermatol. 110, 143-148 (1998)
  10. Otoshi, E., et al., Cancer Res. 60, 1729-1735 (2000)
  11. Katsumi, S., et al., J. Invest. Dermatol. 117, 1156-1161 (2001)
  12. Kobayashi, N., et al., Pigment Cell Res. 14, 94-102 (2001)
  13. Wakasugi, M., et al., J. Biol. Chem., 277, 1637-1640 (2002)
  14. Imoto, K., et al., J. Invest. Dermatol. 119, 1177-7782 (2002)
  15. Nishiwaki, Y., et al., J. Invest. Dermatol. 122, 526-532 (2004)
  16. Sugasawa, K., et al., Cell 121, 387-400 (2005)
  17. Yasuda, G., et al., Mol. Cell. Biol., 27, 6606-6614 (2007)
  18. Matsumoto, M., et al., J. Cell Sci., 120, 1104-1112 (2007)
  19. Yamamoto, A., et al., DNA Repair, 6, 649-657 (2007)

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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