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CPD、6-4PP、DewarPP を解析 DNA損傷検出モノクローナル抗体

DNA損傷検出モノクローナル抗体は、主要なDNA損傷マーカー（シクロブタン型ピリミジンダイマー/CPD、6-4型光産物/6-4PP、Dewar型光産物/DewarPP）検出・測定のためのモノクローナル抗体です。

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背景

紫外線を浴びすぎると日焼け、光老化、皮膚がん、目の障害、免疫能の低下など、さまざまな悪影響が生じます。この健康影響に深く関係しているのが DNA損傷です。紫外線照射によりDNAのピリミジン塩基が連続した箇所で変化が生じ3種類の主要ピリミジン二量体（シクロブタン型ピリミジンダイマー、6-4型光産物、Dewar型光産物）が形成されます。これらの紫外線損傷はDNAの複製や転写に影響を与え、突然変異やアポトーシスなどを引き起こします。当社抗体ブランドCACでは、これら3種類の紫外線DNA損傷をそれぞれ高特異的に認識するモノクローナル抗体を取りそろえました。ELISA による損傷定量や細胞および組織蛍光染色による損傷可視化に高性能を発揮し、DNA修復、損傷応答、がん化、光老化、免疫、美容など幅広い研究分野において強力な研究ツールとなります。実際に、本抗体を用いた研究成果は、Nature やCellなど多くの主要国際雑誌に発表されています。

提供者：奈良県立医科大学先端医学研究機構ラジオアイソトープ実験施設准教授森俊雄先生

【参考文献】

Toshio Mori, Misa Nakane, Tsuyoshi Hattori, Tsukasa Matsunaga, Makoto Ihara, Osamu Nikaido, Simultaneous establishment of monoclonal antibodies specific for either cyclobutane pyrimidine dimer or (6-4) photoproduct from the same mouse immunized with ultraviolet-irradiated DNA. Photochem. Photobiol., 54: 225-232 (1991).
Tsukasa Matsunaga, Yuri Hatakeyama, Michi Ohta, Toshio Mori and Osamu Nikaido, Establishment and characterization of a monoclonal antibody recognizing the Dewar isomers of (6-4) photoproducts. Photochem. Photobiol., 57: 934-940 (1993).

特長

各々の紫外線DNA損傷に特異的に反応
ELISA、免疫蛍光法、免疫組織化学等のアプリケーションでご使用いただけます。
DNA損傷と修復の研究に最適です。
DNA損傷と修復のプロセスを可視化します。
癌研究、光生物学、皮膚科学、眼科学、免疫学、化粧品分野など幅広い研究分野でご使用いただけます。

適用

DNA 損傷抗体は蛍光免疫染色に応用できるため、次のような実験が可能となる。ポリカーボネート製フィルターの小孔を利用して、細胞核の1-3ヶ所をスポット状に紫外線照射する。照射直後、あるいは修復後、細胞内のDNA損傷や修復蛋白を特異抗体を用いて二重に蛍光染色する。これらの蛍光画像を比較することにより、修復蛋白の損傷部位への集積の有無や、複数の修復蛋白の集積順序などの解析が可能となる。

ヒト正常細胞(MSU-1)では、紫外線照射30分後には、修復蛋白XPBは局所DNA損傷部位に集積し修復に関与していることがわかる。一方、修復欠損遺伝病TTD（硫黄欠乏性毛髪発育異常症）細胞では、損傷部位に集積するXPBは正常細胞に比べて少ないことがわかる。

DNA 損傷抗体をELISA （酵素標識免疫法）に応用し、 DNA中の紫外線損傷を高感度に検出することができる。紫外線照射直後、あるいは修復後の細胞や組織からゲノムDNAを精製し、一定量を96プレートにコートする。DNA損傷抗体を損傷に結合させた後、ビオチン標識2次抗体および酵素標識ストレプトアビジンでシグナルを増幅させる。最後に、基質を加え着色させ 492 nmで測定する。結果の一例を図に示す。

ELISA を用いたDNA修復実験の結果を示す。ヒト正常細胞（黒シンボル）は紫外線で誘発されたシクロブタン型ダイマー (CPD)の50%を24時間で、また、(6-4) 光産物 (6-4PP)の90%を3時間で修復する。これらのDNA損傷はともにヌクレオチド除去修復で修復されるが、6-4PPはCPDに比べ二本鎖DNAを大きく歪ませるために優先的に修復される。一方、修復欠損遺伝病である色素性乾皮症XP-C細胞では両損傷のゲノムDNAからの修復は起こらない。

DNA損傷検出モノクローナル抗体

・シクロブタン型ピリミジンダイマー／CPDs 抗体

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti CPDs, (Mouse) , TDM-2	CAC	NM-DND-001	1 VIAL	￥44,000

・ 6-4型光産物／6-4PPs 抗体

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti 6-4PPs, (Mouse) , 64M-2	CAC	NM-DND-002	1 VIAL	￥44,000

・ Dewar型光産物／DewarPPs 抗体

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti DewarPPs, Human (Mouse) , DEM-1	CAC	NM-DND-003	1 VIAL	￥44,000

製品使用文献：

品番：NM-DND-001　Anti CPDs　▼


著者	Dias Gomes M, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Nat Commun. (2019) 10: 3362. (PMID: 31358743)
タイトル	Polarity signaling ensures epidermal homeostasis by coupling cellular mechanics and genomic integrity.
適用	Slot blot
動物種	Mouse


著者	Villafañez F, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Oncogene. (2019) 38: 4310-4324. (PMID: 30705406)
タイトル	AKT inhibition impairs PCNA ubiquitylation and triggers synthetic lethality in homologous recombination-deficient cells submitted to replication stress.
適用	ICC
動物種	Human


著者	Oztas O, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Nat Commun. (2018) 9: 1503. (PMID: 29666379)
タイトル	Genome-wide Excision Repair in Arabidopsis Is Coupled to Transcription and Reflects Circadian Gene Expression Patterns.
適用	XR-seq
動物種	Arabidopsis


著者	Lawrence KP, et a.
雑誌名（PubMed ID）	Sci Rep. (2018) 8: 12722. (PMID: 30143684)
タイトル	The UV/Visible Radiation Boundary Region (385-405?nm) Damages Skin Cells and Induces "dark" Cyclobutane Pyrimidine Dimers in Human Skin in vivo.
適用	ICC
動物種	Human


著者	Iwabuchi K, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Plant Physiol. (2016) 170: 678-85. (PMID: 26681797)
タイトル	Plant Nuclei Move to Escape Ultraviolet-Induced DNA Damage and Cell Death.
適用	IF
動物種	Arabidopsis


著者	Kim H, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Mol Cell. (2014) 54: 107-118. (PMID: 24657165 )
タイトル	Transcriptional repressor ZBTB1 promotes chromatin remodeling and translesion DNA synthesis.
適用	IF
動物種	Human


著者	Biswas AK, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Cancer Res. (2014) 74: 3369-77. (PMID: 24741006)
タイトル	E2F1 responds to ultraviolet radiation by directly stimulating DNA repair and suppressing carcinogenesis.
適用	ELISA
動物種	Mouse

品番：NM-DND-002　Anti 6-4PPs ▼

著者	Niida H, st al.
雑誌名（PubMed ID）	Nat Commun. (2017) 8: 16102. (PMID: 28719581)
タイトル	Phosphorylated HBO1 at UV irradiated sites is essential for nucleotide excision repair.
適用	IF
動物種	Human

著者	van Cuijk L, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Nat Commun. (2015) 6: 7499. (PMID: 26151477)
タイトル	SUMO and ubiquitin-dependent XPC exchange drives nucleotide excision repair.
適用	IF
動物種	Mouse

著者	Muñoz MJ, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Cell Rep. 2017 Mar 21;18(12):2868-2879. (PMID: 28329680)
タイトル	Major Roles for Pyrimidine Dimers, Nucleotide Excision Repair, and ATR in the Alternative Splicing Response to UV Irradiation.
適用	WB
動物種	Human

著者	Jarrett SG, et al.
雑誌名（PubMed ID）	Cancer Res. (2012) 72: 133-43.(PMID: 22080566)
タイトル	Metastasis suppressor NM23-H1 promotes repair of UV-induced DNA damage and suppresses UV-induced melanomagenesis.
適用	IF
動物種	Human

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- 6-4型光産物（6-4PPs）を、特異的モノクローナル抗体を使用して高感度に検出・測定する ELISA キット

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品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
PROTAMINE SULFATE COATED ELISA PLATE 96	CSR	NM-MA-P001	1 PLATE	販売終了
PROTAMINE SULFATE COATED ELISA PLATE 96 x 5	CSR	NM-MA-P002	1*5 PLATE	￥11,400
PROTAMINE SULFATE COATED ELISA PLATE 96 x 10	CSR	NM-MA-P003	1*10 PLATE	￥21,600