6-4PPs 特異的モノクローナル抗体を使用した ELISA kit 高感度紫外線誘発 DNA 損傷 6-4PP / (6-4) photoproduct 測定キット

紫外線誘発 DNA 損傷 6-4PPs 測定 ELISA キットは、紫外線（UV）によって誘発される DNA 損傷である6-4型光産物（6-4PPs）を、ELISA 法により高感度に検出・測定します。

本キットは、6-4PPs の検出・定量用抗体のスタンダートとして長年にわたり世界中で使用されてきた 6-4PPs 特異的モノクローナル抗体（クローン： 64M-2） を使用した、初めての ELISA キットです。

提供者： 奈良県立医科大学先端医学研究機構ラジオアイソトープ実験施設 研究教授 森 俊雄 先生

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• 高感度紫外線誘発 DNA 損傷 CPD 測定キット
  - シクロブタン型ピリミジンダイマー（CPDs）を、特異的モノクローナル抗体を使用して高感度に検出・測定する ELISA キット

紫外線（UV）による DNA 損傷

紫外線を浴びすぎると日焼け、光老化、皮膚がん、目の障害、免疫能の低下など、さまざまな悪影響が生じます。この健康影響に深く関係しているのが DNA 損傷です。紫外線照射により DNA のピリミジン塩基が連続した箇所で変化が生じ3種類の主要ピリミジン二量体（シクロブタン型ピリミジンダイマー／CPD、6-4型光産物／6-4PPs、Dewar 型光産物／DewarPP）が形成されます。これらの紫外線損傷は DNA の複製や転写に影響を与え、突然変異やアポトーシスなどを引き起こします。

本キットは、紫外線に関連する細胞応答、癌研究、光生物学、皮膚疾患、眼科、免疫学、美容など幅広い研究分野において強力な研究ツールとなります。

• 世界標準の 6-4PPs 特異的モノクローナル抗体　クローン： 64M-2 を使用
• 4種類のピリミジン二量体（TT, TC, CT, CC）に形成された 6-4PP を検出
• 高感度
• 紫外線照射 DNA および未照射 DNA を同梱
• サンプル DNA を安定結合させる硫酸プロタミン付着プレートを同梱

	OPD 版	TMB 版
外観
品名	High Sensitivity 6-4PP ELISA Kit	High Sensitivity 6-4PP ELISA Kit (TMB)
品番	NM-MA-K002	NM-MA-K004
基質	OPD（タブレット型・3 錠）	TMB（液体・12 mL）
測定波長	492 nm	450 nm
特長	低バックグラウンド	高シグナル、1 液式基質の採用により試薬調製の手間を省略
吸光度	DNA固相化量： 1ウェルあたり、200 ng グラフは 0 J/m2 の吸光度を 0 とするブランク補正済み ⇒ 新製品の TMB 版キット（品番：NM-MA-K004）は、OPD 版キット（品番：NM-MA-K002）と同等の性能を示す

※ 同じスタンダード抗原（UVC-Irradiated DNA Samples, 品番：NM-MA-R010）を測定し、吸光度を比較した。

• 硫酸プロタミンコート済み ELISA プレート （12 x 8 ウェルストリップ）
• ポジティブスタンダード - ウシ胸腺 DNA、UVC 照射（10 J/m²）
• ネガティブスタンダード - ウシ胸腺 DNA、UV照射なし
• アッセイ希釈液（10×）
• 洗浄バッファー（20×）
• ブロッキング試薬（50×）
• 抗 6-4PPs モノクローナル抗体（クローン 64M-2）（100×）
• ビオチン標識二次抗体（100×）
• ストレプトアビジン‐ペルオキシダーゼ（100×）
• 基質（品番により異なります）
  • 品番 NM-MA-K002： OPD タブレット（5 mg）、OPD 希釈液（10×）
  • 品番 NM-MA-K004： TMB（12 mL）
• 停止液
• プレートカバーフィルム

OPD版（品番：NM-MA-K002）の使用例

図1 紫外線（UV）照射により生じた DNA 損傷である 6-4型光産物（6-4PPs）を ELISA 法により測定

図2 紫外線照射（UV）による 6-4 型光産物（6-4PPs）の形成と修復を ELISA 法 により測定した。
HeLa 細胞のDNAにおいて、UV照射量依存的に 6-4PPs が形成された（グラフ左）。
10J/m² のUV照射により形成された 6-4PPs 量は経時的に減少し（グラフ右）、ヌ クレオチド除去修復が行われたことが示された。

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