HClO を蛍光／比色検出 次亜塩素酸塩アッセイ

Amplite™ 次亜塩素酸塩（次亜塩素酸）アッセイキットは、Oxirite™ 次亜塩素酸塩センサーを使用して、次亜塩素酸塩を蛍光／比色検出するキットです。

次亜塩素酸（hypochlorous acid, HClO）

次亜塩素酸アニオン（ClO^-）およびプロトン化された次亜塩素酸（HClO）は生物系において、重要な活性酸素種（ROS）です。次亜塩素酸塩（次亜塩素酸）が制御されずに産生されると、組織損傷および関節炎や腎不全、がんを含む疾患を引き起こす可能性があります。さらに次亜塩素酸ナトリウム（NaClO）は漂白剤として表面洗浄や消臭、水の消毒など私たちの生活の中で広く使用されています。しかし多量の次亜塩素酸ナトリウムに曝露されると、深刻な呼吸障害や胃痛、肌や眼が赤くなり痛みを感じるなどの症状を伴う中毒に繋がる可能性があります。したがって毒物学的・環境的に、次亜塩素酸塩（次亜塩素酸）を選択的かつ高感度に検出することは非常に重要です。

比色アッセイキット（品番：13845）

Amplite™ 次亜塩素酸塩比色アッセイキットは、Oxirite™ 次亜塩素酸塩センサーを使用しています。センサーが選択的に次亜塩素酸塩（次亜塩素酸）に反応すると、赤色産物を生成し、吸光プレートリーダー（550 nm 付近）で測定することができます。

蛍光アッセイキット（品番：13846）

Amplite™ 次亜塩素酸塩蛍光アッセイキットは、特異性の高い高感度蛍光ベースのアッセイです。次亜塩素酸塩（次亜塩素酸）に選択的に反応すると、弱蛍光性の Oxirite™ 次亜塩素酸塩センサーは、100倍以上の蛍光増強をもたらす強い蛍光産物を生成します。蛍光シグナルは、蛍光マイクロプレートリーダー（Ex/Em = 540/590 nm）で測定することができます。本キットでは、100μL 反応量で 3μM の次塩素酸塩を検出します。

• コンポーネントA：Oxirite™ 次亜塩素酸塩センサー
• コンポーネントB：アッセイバッファー
• コンポーネントC：次亜塩素酸スタンダード
• コンポーネントD：DMSO

比色アッセイキット（品番：13845）

1. 次亜塩素酸アッセイ混合液を調製（50 µL/ウェル）
2. 各ウェルにスタンダード / サンプルを添加（50 µL/ウェル）
3. 室温で3〜5分間インキュベート
4. 555±5 nm の吸光度を測定

蛍光アッセイキット（品番：13846）

1. 次亜塩素酸アッセイ混合液を調製（50 µL/ウェル）
2. 各ウェルにスタンダード / サンプルを添加（50 µL/ウェル）
3. 室温で10〜30分間インキュベート
4. Ex/Em = 540/590 nmで蛍光強度を測定

蛍光アッセイキット（品番：13846）

図1　Amplite™ 次亜塩素酸塩蛍光アッセイキットで次亜塩素酸を測定
96ウェル黒色プレートを使用。わずか0.003 mMの次亜塩素酸ナトリウムを10〜30分間のインキュベートで検出できた。

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