Cell Meter™ 蛍光細胞内ペルオキシナイトライトアッセイキットは、蛍光プローブを用いて、生細胞中のペルオキシナイトライト(ONOO-/パーオキシナイトライト/過酸化亜硝酸)を測定するキットです。
背景
ペルオキシナイトライト(ONOO-、Peroxynitrite)
ペルオキシナイトライト(ONOO-)は、強力な酸化剤で高活性なニトロ化剤です。ペルオキシナイトライトは、細胞中でスーパーオキシドラジカルと窒素酸化物が反応して生じます。これはタンパク質、酵素、脂質、核酸といった生体分子を損傷させ、最後には細胞死をもたらします。非常に短い半減期のため、定常状態の濃度は低く、これまで溶液中のペルオキシナイトライトを検出・定量することは、かなり難しいものでした。
使用目的
本キットは、生細胞内の ONOO- を測定する高感度ツールです。DAX-J2™ PON Green は、選択的に ONOO- に反応し、鮮やかな緑色蛍光産物を生成します。蛍光マイクロプレートリーダーや蛍光顕微鏡用(品番:16315)、フローサイトメトリー用(品番:16317)をご用意しています。
特長
DHR123 (他社製品) との比較データ 〜ONOO-への特異性〜
図1. ABD社DAX-J2™ PON GreenはNOO-に高い特異性を有する
AAT Bioquest (ABD) 社のDAX-J2™ PON Green (A) もしくは DHR123 (B) で標識した RAW 264.7 細胞をマイクロプレートリーダーで測定した。RAW264.7 細胞はそれぞれの濃度の SIN-1 で処理し、20 µM ebselen はONOO- のスカベンジャーとして使用した。SIN-1処理で増加したDAX-J2 PON™ Green の蛍光はebselenで完全に抑制されたが、DHR123の蛍光は部分的にしか抑制されなかった。DHR123 はONOO- だけではなく他の RNA/RNS にも反応しているのに対し、DAX-J2 PON™ GreenはONOO- に高い特異性を有することが示された。
構成内容
品番:16315 蛍光マイクロプレートリーダー・蛍光顕微鏡用
- Component A: DAX-J2™ PON Green
- Component B: アッセイバッファー
- Component C: DMSO
品番:16317 フローサイトメトリー用
- Component A: DAX-J2™ PON Green
- Component B: DMSO
プロトコール概要
- 成長培地に細胞を用意
- テスト化合物と DAX-J2™ PON Green ワーキング溶液を添加してインキュベート
- 蛍光強度を測定(Ex/Em = 490/530 nm)
製品データ
Cell Meter™ 蛍光細胞内ペルオキシナイトライトアッセイキット(緑色蛍光)
蛍光マイクロプレートリーダー・蛍光顕微鏡用
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
Cell MeterTM Fluorimetric Intracellular Peroxynitrite Assay Kit *Green Fluorescence* | ABD | 16315 | 100 TEST |
¥84,000 |
フローサイトメトリー用
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
Cell MeterTM Fluorimetric Intracellular Peroxynitrite Assay Kit *Optimized for Flow Cytometry* | ABD | 16317 | 100 TEST |
¥84,000 |
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
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