蛍光色素シリコンローダミンプローブ(SiRプローブ)は、F-アクチン、チューブリン、リソソーム、ならびにDNAの生細胞イメージングを簡素化しました。これらの明るく、光安定性の蛍光プローブは、バックグラウンドや細胞毒性が低く、長く使われてきた生細胞イメージングを改善したと言えます。
この度Spirochrome社は、次世代の生細胞イメージングプローブ、SPYプローブを発売しました。近赤外光のSiRやSiR700プローブを改良し、生細胞内のFアクチン、チューブリン、およびDNA研究のために様々な蛍光波長のSPYプローブを提供しています。
特長
- 蛍光発生性 SiRプローブやSiR700よりもさらに低バックグラウンド
- 複数の蛍光波長でプローブを用意(近赤外光、赤、オレンジ、緑)
- 高感度、選択的
- 細胞透過性
- SiRプローブと同様のプロトコルで使用でき、処理時間が短く、かつ低濃度で使用可能
- 細胞毒性なし
SPYアクチンプローブ
SPY555-actin
SiR-actinと同様の性能を持つF-actinプローブで、テトラメチルローダミン(TMR)またはCy®3チャネルで検出します(励起:555 nm、蛍光: 580 nm)。
図1
HeLa細胞をSPY555-actinプローブで染色した。
SPY620-actin
SiR-actinと同様の性能を持つF-actinプローブで、励起フィルター:610/620 nm、蛍光フィルター:650/640 nm を使用してイメージングできます。
SPYチューブリンプローブ
SPY555-tubulin
SiR-tubulinより優れた性能を備え、テトラメチルローダミン(TMR)またはCy®3チャネルで検出します(励起:555 nm、蛍光: 580 nm)。SPY555-tubulinはSiR-tubulinよりも細胞透過性が高いです。
SPY650-tubulin
SiR-tubulinの改良版で、励起波長650 nm、蛍光波長675 nmのSiR蛍光色素と共役しています。SPY650-tubulinは、同等の濃度でSiR-Tubulinより良好に微小管を染色し(約10倍)、バックグラウンドの蛍光シグナルが低く、Cy®5チャネルで検出できます。
図2
HeLa細胞をSPY555-Tubulinプローブで染色した。
SPY DNAプローブ
SPY505-DNA
励起波長510 nm、蛍光波長530 nmの緑色のDNAプローブです。フルオレセインイソチオシアネート(FITC)または黄色蛍光タンパク質(YFP)チャネルで検出できます。
SPY555-DNA
励起波長555 nm、発蛍光波長580 nmのDNAプローブです。TMRまたはCy®3チャネルで検出できます。
SPY595-DNA
励起波長605 nm、蛍光波長645 nmのDNAプローブです。Alexa Fluor® 594またはTexas Red®チャネルで検出できます。
SPY620-DNA
DNAプローブで、励起フィルター:610/620 nm、蛍光フィルター:650/640 nm を使用してイメージングできます。
SPY650-DNA
SiR-DNAの改良版です。 SPY650-DNAには、励起波長650 nm、蛍光波長675 nmのSiR-蛍光色素アナログが含まれています。 同等の濃度で、SPY650-DNAはSiR-DNAよりも良好に細胞核を染色します(毒性の増加なしで3〜6倍明るく)。 Cy®5チャンネルで使用できます。
SPY700-DNA
SiR700-DNAの改良版です。 SPY700-DNAには、励起波長690 nm、蛍光波長720 nmのSiR700-蛍光色素が含まれています。 同等の濃度で、SPY700-DNAはSiR700-DNAよりも良好に細胞核を染色します(毒性の増加なしで3〜6倍明るく)。 Cy®5チャネルで使用可能です。
SPY ペルオキシソームプローブ
Peroxi_SPY555
極大吸収波長555 nm、極大蛍光波長580 nmのペルオキシソームプローブです。TMRまたはCy3フィルターセットでイメージングできます。
図5
HHEK細胞をPeroxi_SPY555で染色した。
Peroxi_SPY650
極大吸収波長652 nm、極大蛍光波長674 nmのペルオキシソームプローブです。Cy5フィルターセットでイメージングできます。
生細胞におけるF-アクチンプローブ
SiR/SPY-アクチン | GFPタグ付きLifeact | 蛍光標識アクチン | GFPタグ付きアクチン | |
---|---|---|---|---|
由来 | Jaspis johnstoni 脱臭化 脱メチル ジャスプラキノリド付加したSiRまたはSPYプローブ |
Saccharomyces cerevisiae ABP140のアミノ酸1-17 |
骨格筋(ウサギ)または非筋肉(ヒト血小板βアクチン) | βアクチンのGFPとの融合タンパク質 |
アプリケーション | 広視野共焦点などによる内在性F-アクチンの生細胞イメージング 超解像顕微鏡(STED, SIMなど) |
生細胞イメージング | FRAP 生細胞イメージング |
FRAP 外来生および内在性アクチンの生細胞イメージング |
利点 | 細胞や組織への直接使用可能 細胞透過性(トランスフェクションは不要) 光安定性 バックグラウンドが非常に低い 超解像に対応(STED, SIM) 細胞毒性がない 多色(近赤外、赤、燈など) F-アクチンにのみ結合 小さな有機分子(より安定) |
多色(近赤外、赤、燈、黄、緑など) | 内在性アクチンと非常に類似した立体構造 フルオフロフォアの大きさが小さい |
内在性線維に組み込まれた標識アクチン 多色(近赤外、赤、燈、黄、緑など) |
欠点 | 高濃度においてアクチン動態へ影響を及ぼす可能性 | 高分子の蛍光レポータGFP G-アクチンに結合し高いバックグラウンドシグナルを産生 アクチン動態へ影響を及ぼす可能性 トランスフェクションが必要 |
注入が必要 | 高分子の蛍光レポータGFP 外来性アクチン発現 G-アクチンに結合し高いバックグラウンドシグナルを産生 トランスフェクションが必要 |
総合評価 | +++++ | +++ | +++ | ++ |
GFPタグ付きユートロフィン | GFPタグ付きF-Tractin | GFPタグ付きナノボディ | GFPタグ付きアフィマー | |
---|---|---|---|---|
由来 | Homo sapiens ITPKAのアミノ酸10-52 |
Rattus norvegicus ITPKAのアミノ酸10-52 |
Vicugna pacos 抗-アクチン-ナノボディ |
ファージライブラリスクリーニングで単離された合成アクチン結合プローブ |
アプリケーション | 内在性F-アクチンの生細胞イメージング | 内在性F-アクチンの生細胞イメージング | 内在性アクチンの生細胞イメージング | FRAP 47-49) 内在性アクチンの生細胞イメージング |
利点 | アクチン単量体(G-アクチン)に結合しない 多色(近赤外、赤、燈、黄、緑など) |
アクチン単量体(G-アクチン)に結合しない 多色(近赤外、赤、燈、黄、緑など) |
プローブの大きさが小さい アクチン動態への影響の可能性が低い 多色(近赤外、赤、燈、黄、緑など) |
F-アクチンに対するナノモル濃度での親和性が高い 多色(近赤外、赤、燈、黄、緑など) 正しいスクリーニングプロトコールを使えばF-アクチン特異的 |
欠点 | サイズが大きい 高分子の蛍光レポータGFP アクチン動態へ影響を及ぼす可能性 トランスフェクションが必要 |
高分子の蛍光レポータGFP アクチン動態へ影響を及ぼす可能性 トランスフェクションが必要 |
高分子の蛍光レポータGFP G-アクチンに結合し高いバックグラウンドシグナルを産生 トランスフェクションが必要 |
高分子の蛍光レポータGFP トランスフェクションが必要 |
総合評価 | +++ | +++ | +++ | +++ |
SPYプローブ
品名 | メーカー | 品番 | 包装 | 希望販売価格 |
---|---|---|---|---|
SPY555-Actin Probe![]() |
CYT | CY-SC202 | 1 VIAL [100 slides] |
¥158,000 |
SPY620-Actin Probe | CYT | CY-SC402 | 1 VIAL [100 slides] |
¥158,000 |
SPY555-Tubulin Probe![]() |
CYT | CY-SC203 | 1 VIAL [100 slides] |
¥158,000 |
SPY650-Tubulin Probe![]() |
CYT | CY-SC503 | 1 VIAL [100 slides] |
¥158,000 |
SPY505-DNA Probe![]() |
CYT | CY-SC101 | 1 VIAL [100 slides] |
¥119,000 |
SPY555-DNA Probe![]() |
CYT | CY-SC201 | 1 VIAL [100 slides] |
¥119,000 |
SPY595-DNA Probe![]() |
CYT | CY-SC301 | 1 VIAL [100 slides] |
¥119,000 |
SPY620-DNA Probe | CYT | CY-SC401 | 1 VIAL [100 slides] |
¥119,000 |
SPY650-DNA Probe![]() |
CYT | CY-SC501 | 1 VIAL [100 slides] |
¥119,000 |
SPY700-DNA Probe![]() |
CYT | CY-SC601 | 1 VIAL [100 slides] |
¥119,000 |
Peroxi_SPY555![]() |
CYT | CY-SC207 | 1 VIAL [100 slides] |
¥158,000 |
Peroxi_SPY650![]() |
CYT | CY-SC507 | 1 VIAL [100 slides] |
¥158,000 |
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
- 「生細胞用蛍光プローブ Cytoskeleton社SPYプローブ」は、下記のカテゴリーに属しています。