尿中のmiRNAをスピンカラムで簡単に精製 尿中microRNA 精製キット

本製品は、尿サンプルからmicroRNA (miRNA) を含む、全てのsmall RNA（200 塩基未満） の分離および精製が可能なキットです。スピンカラムベースの方法で、フェノールを使用せずに、迅速（30分以内）かつ簡便に精製することができます。
※研究対象がmiRNAに焦点を当てている場合、同社の尿用 循環セルフリー RNA 精製キットよりも本キットが最適です。

　small RNA には、miRNAなどの調節 RNA 分子、tRNA、5S rRNA が含まれます。miRNA は 20 〜 25 ヌクレオチド長で、mRNA 分子に結合してその安定性または翻訳に影響を与えることで遺伝子発現を調節します。
　近年の研究では、miRNA が細胞の成長とアポトーシスを調節することが示されています。さらに、臨床および実験的な解析により、miRNA が新たなクラスの癌遺伝子または腫瘍抑制遺伝子として機能する可能性が示唆されており、さまざまな腫瘍タイプにおけるマイクロRNAの発現プロファイルを正常組織と比較することで、特定の癌タイプに特徴的な表現型シグネチャーを見出せることが示されています。
　よって、異常な miRNA 発現のユニークなパターンは、腫瘍診断、疾患特有の結果の予後、および治療反応の予測のための分子バイオマーカーとして役立つ可能性があります。

• 迅速・簡便：スピンカラムを使用して30 分以下で精製が可能です。
• 様々な尿サンプル量に対応：0.5-1ml の尿サンプル量から尿中miRNA を精製します。
• フェノール、クロロホルムは不要
• インヒビターを含まないRNA を精製：精製したRNA は、遺伝子調節、機能解析、RT-PCR、ノーザンブロッティング、マイクロアレイ解析などの様々な解析に使用できます。

1. Lysis Solution 
2. Wash Solution 
3. Elution Solution 
4. Mini Spin Columns
5. Collection Tubes
6. Elution Tubes
7. Product Insert

• 最少サンプル量：0.5ml
• 最大サンプル量：1ml
• RNA 精製のサイズ：200nt 以下
• 所要時間：30 分以下

サンプル溶解・カラム結合・洗浄・溶出の４ステップのみで迅速・簡便に抽出が可能です。

図1：異なる尿サンプルから分離したmiRNA 量の測定
本キットを用いて、8 つの異なる 1.5 mL の尿サンプルからmiRNA を分離しました。その後、精製されたmiRNA を RT-qPCR 反応のテンプレートとして使用し、ヒト miR-21 遺伝子を検出しました。分離した RNA の 5 µL を RT ステップのテンプレートとして使用し、RT ステップからの 5 µL を qPCR 反応に使用しました。図１より、qPCR はすべてのケースで miR-21 遺伝子を正常に検出および増幅することができ、分離された尿miRNA の品質が高いことを示しています。（黒線は、テンプレートなしのコントロールに対応）

図2：尿サンプルからのGC含有量の異なるmiRNAの回収効率の比較
尿サンプルにGC含有量の異なるmiRNAをスパイクし、その回収率を評価しました。さらに、Norgen社のSilicon Carbide (SiC) カラムを用いて、フェノール／クロロホルム抽出を省略した場合［１］と実施した場合［２］で分離を行い、回収率を比較しました。 図2より、フェノール抽出ありの場合［１］に比べて、フェノール抽出なしの場合［２］の方が、GC含有量にかかわらず、miRNAの回収効率が高いことが示されました。この結果は、フェノールを使用しない本キットが、高効率でmiRNAを分離できることを示しています。

• 商品詳細（品番：56900）：尿用 循環セルフリー RNA 精製キット

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