血清、血漿などのサンプル中のSARS-CoV-2 スパイクタンパク質を測定可能！ 抗原検出用 SARS-CoV-2 スパイクタンパク質 ELISA キット

2019年に中国で発生した新型コロナウイルス 感染症（Covid-19）によるパンデミックは世界中に広まり、2021年7月末の時点では世界で1億9719万人が感染し、421万人が死亡しています。Covid-19の原因ウイルスとして同定されたSARS-CoV-2は全長約30,000塩基対のRNAを遺伝子として持つコロナウイルスの一種ですが、ウイルスゲノム中のS遺伝子にコードされたスパイクタンパク質はウイルス表面に発現する膜タンパク質です。スパイクタンパク質はS1、S2の二つのドメインから構成されます。
SARS-CoV-2が細胞に感染する際、まず細胞表面のアンジオテンシン変換酵素２（ACE2）にスパイクタンパク質のS1ドメインが結合し、その後ウイルスが細胞内に取り込まれることが明らかとなっており、ACE2はSARS-CoV-2の受容体と考えられています。さらに、スパイクタンパク質についてはS1ドメインの構造解析から、ACE2に結合する狭い領域（受容体結合ドメイン、RBD）が同定されています(1)。
本製品は、スパイクタンパク質S1ドメインのRBDに特異的かつ親和性が高い２種類の中和抗体を用いたサンドイッチELISA法により、サンプル中のSARS-CoV-2 スパイクタンパク質を測定することができます。

• 血清、血漿などのサンプル中のSARS-CoV-2 スパイクタンパク質を測定することが可能です。
• 特殊な装置は不要で、通常のプレートリーダーがあれば測定できます。
• SARS-CoV-2 S1ドメインのRBDに対する２種類の抗体を用いたサンドイッチELISA法により、感度よく特異的にSARS-CoV-2 スパイクタンパク質を測定します。
• このELISAに用いた抗体は、武漢型のほか、アルファ、ベータ、ガンマ、デルタ型すべての変異株ウイルスと強く反応します（論文準備中）。

プレートには抗 SARS-CoV-2 スパイクタンパク質抗体が固相されていて、検体を加えると検体中の SARS-CoV-2 スパイクタンパク質がトラップされます。洗浄後、トラップされたタンパク質に対して HRP 標識した抗 SARS-CoV-2 スパイクタンパク質抗体を反応させ、基質添加後 HRP による発色をプレ ートリーダーで読み取り定量化します。

SARS-Cov-2 スパイクタンパク質（S1,S2ドメイン）を強制発現させたExpi293 の培養上清から超遠心法により精製したエクソソーム（15.625, 31.25, 62.5, 125, 250, 500, 1000ng/mL）をウェルに100mµLずつ加え測定しました。エクソソーム濃度(ng/mL)と吸光度(OD450)を グラフに表すと図１のようになります。

図１　SARS-Cov-2 スパイクタンパク質（S1,S2ドメイン）を強制発現させたエクソソームの測定

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