記事ID ： 45537

生体サンプル中のS1Pを高感度に定量 Sphingosine 1-Phosphate ELISA

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メーカー名：Echelon Biosciences Inc.

Sphingosine 1-Phosphate ELISA キット (S1P ELISA) は、生体サンプル中の S1P を高感度に測定します。

背景

スフィンゴシン 1-リン酸 (S1P) は、スフィンゴ脂質シグナル伝達カスケードの重要な構成要素です。 S1P は、がんの進行に寄与する増殖性、血管新生促進性、および抗アポトーシス性の一連のイベントを開始します。最近の科学文献において、S1P は腫瘍細胞から放出される可能性が高い強力な腫瘍形成性増殖因子であり、S1P が早期癌検出のための新規バイオマーカーである可能性があることが示唆されています。スフィンゴシンキナーゼは、さまざまな種類の癌で上方制御されることも示されています（S1P は、スフィンゴシンをリン酸化するスフィンゴシンキナーゼの活性によって生成されます）。

特長

仕様
アッセイ範囲	0.0625 µM ～ 2 µM
感度	アッセイの検出下限は 0.06 µM ^{1, 2}
サンプル量	n=2の場合、 25 µL/サンプルが必要です。
適用サンプル	血清、血漿、組織ホモジネートおよび細胞溶解物中のヒトまたは動物の S1P (本アッセイは、種特異的ではなく、ヒト、ウシ、ウマ、ヤギ、マウスの S1P でテストされています。）

構成内容

抗S1P 抗体 (Clone #LT1002)
ブロッキング溶液
DelipidizedSerum (DHS)
Sphingosine 1-Phosphate (S1P) スタンダード
S1Pコート済みマイクロタイタープレート (12 X 8 strip-well plate)
PBS タブレット
希釈溶液
Streptavidin HRP
TMB 基質
反応停止液(1N Sulfuric Acid)
U字底混合用プレート(黄色)
透明プレートシール

プロトコール概要

1)S1P コーティングプレートのブロッキング
2)黄色のインキュベーションプレートにサンプルまたはスタンダードとS1P 抗体を添加 (S1P 抗体とSP1の混合）
3)2の混合物をブロッキング済みマイクロタイタープレートに添加
4)室温で 1 時間インキュベート
5)プレートを3回洗浄
6)調製したストレプトアビジン-HRPをプレートに加え、室温で1時間インキュベート
7)プレートを3回洗浄
8)TMB 基質を加え、室温で 30 分間インキュベート
9)停止溶液を添加し、 450nmで読み取り

詳細なプロトコールはデータシートをご確認ください。

本アッセイにて、S1P Lyase活性の検出も可能です。プロトコールはこちら外部リンクをご参照ください。

使用例

図. S1P スタンダードカーブ

参考文献

Ardawi M-SM, Rouzi AA, Al-Senani NS, Qari MH, Elsamanoudy AZ, Mousa SA. High Plasma Sphingosine 1-phosphate Levels Predict Osteoporotic Fractures in Postmenopausal Women: The Center of Excellence for Osteoporosis Research Study. J Bone Metab. 2018;25(2):87-98.
Bae SJ, Lee SH, Ahn SH, Kim HM, Kim BJ, Koh JM. The circulating sphingosine-1-phosphate level predicts incident fracture in postmenopausal women: a 3.5-year follow-up observation study. Osteoporosis Int. 2016:1-9. doi: 10.1007/s00198-016-3565-z.

Sphingosine 1-Phosphate ELISA　(S1P ELISA)

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