記事ID ： 17688

糞便に含まれる微生物と宿主のDNAを同時に抽出糞便DNA分離・精製キット（Stool DNA Isolation kit）

メーカー名：Norgen Biotek Corp.

本商品は、新鮮／凍結糞便サンプルからDNAを分離・精製するキットです。
通常のプロトコールで、糞便中の様々な種類の微生物や宿主細胞由来ゲノムDNAも同時に検出することが可能です。本キットでは、構成品のビーズチューブおよび化学的かつ物理的なホモジェナイズと溶解により、精製後のPCR等を行う上で問題となるフミン酸（腐食酸）などの阻害物質を完全に除去し、スピンカラムで純度の高いDNAを精製することが可能です。

Norgen社の糞便核酸回収・保存・輸送チューブ（品番：45660）で保存したサンプルも使用可能です。

【関連商品】糞便RNA分離・精製キット

特長

糞便サンプル中の微生物および宿主由来DNAを同時に検出
速くて簡単なスピンカラム方式
PCRを阻害するフミン酸などを完全に除去
ダウンストリームアッセイに使用可能な高品質なDNAを精製
（PCR、qPCR、サザンブロット、シーケンシング、マイクロアレイ解析など）

■ 仕様
最大サンプル量	200 mg（新鮮または凍結糞便）
最大カラム結合量	50 µg
最大カラム負荷量	650 µL
処理に掛かる時間（10サンプル分）	約30分

使用方法

図1. フローチャート
本キットを用いたトータルDNA分離・精製手順

製品データ

図2. 糞便サンプルから微生物（原核生物）のDNAを検出
Norgen社の糞便DNA分離・精製キットを用いて、200 mgの糞便サンプルからトータルDNAを分離した。次に溶出液50 µLから各サンプル2 µL（DNA量は約15 ng）を微生物DNA増幅用のテンプレートとして使用。アガロースゲルで10 µLのPCR産物を泳動（1～6レーン）した結果、全サンプルで1.5 kbのバンドが増幅されていることが確認できた。よって、本キットで分離・精製したDNAサンプルは、エンドポイントPCRで検出可能な品質であることが示された。

図3. 5Sプライマーを用いたリアルタイムPCRによる宿主由来DNAの検出
Norgen社の糞便DNA分離・精製キットを用いて、200 mgの糞便サンプルからDNAを分離した。次に溶出液50 µLからDNA 15 ng（2 µL）をリアルタイムPCRのテンプレートとして使用し、ヒト5S遺伝子の検出を行った。その結果、宿主由来のDNAから5S遺伝子の検出が確認されたため、本キットで高品質なDNAを分離できていることが示された。