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ファージディスプレイ｜抗体ライブラリ構築に最適 Phagemid Vector pSEX81（ファージミドベクター）

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メーカー名：Progen Biotechnik GmbH

pSEX81はM13ファージ（繊維状ファージ）の表面に機能的な一本鎖抗体（single-chain Fraction of variable region antibody、scFv）-pIII融合タンパク質を発現するためのファージミドベクターで、ファージ抗体ライブラリの作製にご利用いただけます。

背景

組み換え抗体技術は異なる特異性を持つ様々なscFv抗体の作製に広く使用されています。PCRで増幅した免疫グロブリンの重鎖の可変領域（variable heavy chain、VH）と軽鎖の可変領域（variable light chain、VL）の遺伝子をランダムに組み合わせる事で、ヒトやマウスのscFv抗体ライブラリが構築されており、M13ファージの表面タンパク質pIIIに組み換え抗体の断片（scFv）を発現させることで、抗体ライブラリから高親和性の抗体を迅速にスクリーニングする方法が確立されています。 M13ファージのpIIIタンパク質は、筒状のビリオン構造の片側に位置し、2つのドメインを持つ比較的柔軟で利用しやすい分子です。N末端側に感染の際、細菌のF繊毛に結合するためのドメインを持ち、C末端側にビリオン内部に埋め込むためのドメインを持ちます。scFv抗体はこのN末端側に、その機能を壊す事無く挿入されます。

ファージミドベクターpSEX81は、免疫グロブリンの重鎖の可変領域（variable heavy chain、VH）と軽鎖の可変領域（variable light chain、VL）の遺伝子のクローニングとscFv-pIII融合タンパク質の産生用にデザインされており、ファージ抗体ライブラリの作製にご利用いただけます。

特長

IPTG誘導性のプロモーター、T7ターミネーター、複製起点ColE1 ori、F1ファージの遺伝子間領域、アンピシリン耐性遺伝子を有する
重鎖(VH)クローニング用としてNcoIサイトとHindIIIサイト、軽鎖(VL)クローニング用としてMluIサイトとNotIサイトを有する
重鎖（VH）をNcoIとHindIII、軽鎖(VL)をMluIとNotIでクローニングした場合、重鎖（VH）と軽鎖(VL)はブタαチューブリンの配列（EEGEFSEAR）を含む18アミノ酸で連結
PROGEN社のM13ファージ用ヘルパーファージHyperphageと組み合わせて使用可能

図1. Phagemid Vector pSEX81

図2. ファージ抗体ライブラリ
本製品は、ファージ抗体ライブラリの作製にご利用いただけます。

参考文献

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