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FLICA™（=Fluorescent-Labeled Inhibitor of Caspases）キットは生細胞内の蛍光量により活性型カスパーゼを簡単に測定します。
 FAM-XXX-FMK Kit |
 Red Fluorescence Kit (SR)（SR-XXX-FMK Kit） |
記事ID ： 1130
生細胞中のカスパーゼ活性を測定し、アポトーシスとネクローシスを区別 蛍光 in vitro アポトーシス検出キット FLICA™
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使用目的
FLICA™（=Fluorescent-Labeled Inhibitor of Caspases）キットは生細胞内の蛍光量により活性型カスパーゼを簡単に測定します。
FLICA™ KitはELISAのような抗体を使う代わりに、各活性カスパーゼに共有するインヒビター（赤色もしくは緑色の蛍光プローブをC末端に標識したもの）を利用して測定します。 アポトーシスを起こした細胞は赤色または緑色で蛍光を発します。
蛍光プレートリーダー、顕微鏡またはフローサイトメータ−で測定します。
［Ex/Em= 550/590-560nm（SR）, 490/520nm（FAM）］
試薬は細胞透過性があり、細胞を溶解または透過処理の必要がないため、細胞を壊すことなく実験が進められます。また細胞毒性がないため生細胞中の検出が可能です。
カスパーゼはリン脂質の代謝回転やDNA断片化の前に放出されるため、Annexin V検出やTUNEL法より早くアポトーシスを検出できます。ネクローシス細胞とアポトーシスを区別するには、緑色のFAM-FLICA™を使用してください。-アポトーシスを起こした細胞を緑色で蛍光ラベルして、次にネクローシス細胞をPI（キット構成品）または7-AADを加え、赤色に着色させます。DNAラベル用に、Hoechst33342が全てのFLICA™キットに含まれています。
FLICA™ はヒト、サル、ニワトリ、マウス、ラット、ショウジョウバエ、イースト、およびゾウリムシからの懸濁細胞、接着細胞、薄層組織切片、および凍結切片でご利用いただけます。
成功した細胞例･･･ THP-1, HL60, MCF7, HeLa, Jurkat, epithelial cells, retinal cells, primary neurons, macrophages, lymphocytes, and fibroblasts 他 [PDF]
生きたままの動物を用いたアポトーシス検出にはFLIVO™ in vivo Apootosis Detection キットがございます。
特長
- 簡単操作
- 直接細胞培養液に試薬を加え、培養・洗浄で測定が可能です。 - 迅速
- 試薬を加えてから15分で反応が開始されます。(メーカーの推奨培養時間は1-4時間です） - 正確
- カスパーゼ前駆体や不活性型酵素からの干渉は全くありません。 - 信頼性
- 活性型カスパーゼのみ、蛍光を発します。
構成内容
| 25 Test | 100 Test | |
|---|---|---|
| インヒビター FAM-XXX※-FMK FLICA™ Reagent | 1vial | 4vial |
| 10X洗浄Buffer | 15mL | 60mL |
| 固定液 | 6mL | |
| PI（Propidium Iodide) | 1mL | |
| Hoechst 33342 | 1mL | |
| 25 Test | 100 Test | |
|---|---|---|
| インヒビター SR-XXX※-FMK FLICA™ Reagent | 1vial | 4vial |
| 10X洗浄Buffer | 15mL | 60mL |
| 固定液 | 6mL | |
| Hoechst 33342 | 1mL | |
※XXXは認識配列を表します。
| Caspase | FLICA™ Peptide | 25Test Kit | 100Test Kit |
|---|---|---|---|
| Poly-Caspases | FAM-VAD-FMK | #91 | #92 |
| Caspase 1 | FAM-YVAD-FMK | #97 | #98 |
| Caspase 2 | FAM-VDVAD-FMK | #918 | #919 |
| Caspase 3&7 | FAM-DEVD-FMK | #93 | #94 |
| Caspase 6 | FAM-VEID-FMK | #95 | #96 |
| Caspase 8 | FAM-LETD-FMK | #99 | #910 |
| Caspase 9 | FAM-LEHD-FMK | #912 | #913 |
| Caspase 9 | SR-LEHD-FMK | #960 | #961 |
| Caspase 10 | FAM-AEVD-FMK | #922 | #923 |
| Caspase 13 | FAM-LEED-FMK | #929 | #930 |
| Poly-Caspases | SR-VAD-FMK | #916 | #917 |
使用例
FAM-poly caspase FLICA™ (品番92）で染色されたJurkat細胞-5つの細胞のうちの4つが活性型カスパーゼがあるアポトーシス細胞
左；4つの細胞が緑色で蛍光を発している。
右；灰色のイメージはその場所での5つの細胞を表している.。
蛍光プレートリーダーかフローサイトメーターで蛍光のレベルを定量化。
- Data courtesy of Dr. Brian W. Lee, ICT -
蛍光 in vitro アポトーシス検出 キット FLICA™
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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
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