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GFPとNLSを有するCas9ヌル変異体タンパク質 Cas9 Null Mutant タンパク質

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メーカー名：Applied Biological Materials Inc.

dCas9タンパク質は切断ドメインが非活化されているCas9ヌル変異体で、CRISPR/Cas9系のコントロールとして利用できます。本製品は、dCas9タンパク質に核移行配列（NLS:Nuclear Localization Sequence）およびGFPが結合しているため、トランスフェクションの視認や細胞からのCas9除去の確認が可能です。

ゲノム編集概論は以下のWEB記事をご参照ください

FAQ　「iCRISPR-Cas9 ゲノム編集用製品　 FAQ」

背景

CRISPR/Cas9システムは、RNA依存性DNAエンドヌクレアーゼを利用した、特異的なゲノムの破壊や置換などを可能にする最新のゲノム編集技術です。

dCas9タンパク質（D10AおよびH840A）は、野生型Cas9がもつ2つの切断ドメインの両方に変異を導入して作成されています。ガイドRNAを介したゲノムDNAへの結合能は残っていますが、Cas9のヌクレアーゼ活性およびニッカーゼ活性は欠失しているためゲノム編集を行うことはなく、CRISPR実験におけるネガティブコントロールとして有用です。また、dCas9タンパク質の結合は転写の障害となるため、遺伝子発現の可逆的なノックダウンのためのツールとしても活用できます。

本製品のCas9には、Streptococcus pyogenes（化膿レンサ球菌）に由来するspCas9を使用しています。

特長

フローサイトメトリーによる検出やスクリーニングにもご利用いただけます
SV40 T抗原のNLSをC末端側に有しています

仕様・構成内容

品名	Cas9 Null Mutant GFP NLS Protein (品番：K086)	Cas9 Null Mutant GFP NLS Protein High Concentraion (品番：K186)
濃度	1000 nM	10 µM
容量	50 pmol (50 µL)	250 pmol (25 µL)
構成内容	Cas9 Null Mutant GFP NLS Protein 50 µL 10X Cas9 Reaction Buffer 1.25 mL	Cas9 Null Mutant GFP NLS Protein 25 µL 10X Cas9 Reaction Buffer 1.25 mL
その他仕様	保存バッファー 10 mM Tris-HCl (pH 7.4), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 300 mM NaCl, and 50% (v/v) Glycerol. 10X Cas9 Reaction Buffer 200 mM HEPES, 50 mM MgCl₂, 1 M NaCl, 1 mM EDTA, pH 6.5 タンパク質由来 Recombinant E. coli.

dCas9タンパク質

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Cas9 Null Mutant GFP NLS Protein	APB	K086	50 PMOL [50 μl]	￥11,000
Cas9 Null Mutant GFP NLS Protein	APB	K186	250 PMOL [25 μl]	￥32,000

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