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GFPまたは薬剤選択マーカーを簡単ノックイン！ CRISPR-Cas9 HR（HDR）用ドナーベクター

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メーカー名：GeneCopoeia, Inc.

相同組換え（HR）は、DNA二本鎖切断（DSBs）により誘発される天然のDNA修復機構です。部位特異的CRISPR Cas9-sgRNA複合体は染色体上にDNA二本鎖切断（DSBs）を産生させDNA修復へと誘導します。ドナーDNA存在下では、HRが生じた際に染色体上の遺伝的情報をドナー由来の新規情報へと置換します。

ドナー媒介型HRでは、正確に規定した遺伝子ノックアウト、インフレームの融合タグ付け(in-frame fusion tagging)、導入遺伝子挿入、および突然変異や疾患矯正を目的とした塩基対変換といった数々のアプリケーションが可能になります

ゲノム編集概論は以下のWEB記事をご参照ください

技術情報：ドナーを利用した効果的なゲノム編集アプリケーション
技術情報：セーフ・ハーバー部位への目的遺伝子組込み用ゲノム編集ツール実験検証

使用目的

図1．CRISPR-Cas9を利用した相同組換え(HR,HDR)の作用機序。
ドナープラスミドよりレポーター遺伝子や選択マーカーがDNA二本鎖切断(DSB誘)導型HRにより標的ゲノム部位に組込まれる。

もっと知りたい方はこちら

CRISPR-Cas9 HR(HDR)用ドナーベクター

GeneCopoeia社では、HR媒介型アプリケーション用にGFPあるいは薬剤選択マーカーノックイン用のHR(HDR)用ドナークローニングベクターをご提供しています。広範なドナーベクター骨格、プロモーター、マーカー、その他有用な要素をご用意していますのでお客様の実験系に併せてお選びください。

相同組換えアーム（左と右）用に2種のマルチクローニング部位（MCS）
細胞選別に使用できる陽性クローン選択用のGFPなどのレポーター遺伝子
陽性クローン選択用のピューロマイシンやネオマイシンといった薬剤選択マーカー
無作為組込みを排除するためのTK選択マーカー
簡便なCre介在型カセット除去用のLoxP部位

商品リスト

品番	プロモーター	レポーター遺伝子	選択マーカー	LoxPサイト	ベクターマップ
pDonor-D01	EF1a	copGFP	Puromycin	N/A	pDonor-D01
pDonor-D02	CMV	copGFP	Neomycin	N/A	pDonor-D02
pDonor-D03	CMV	N/A	Neomycin	N/A	pDonor-D03
pDonor-D04	CMV	N/A	Puromycin	N/A	pDonor-D04
pDonor-D05	EF1a	N/A	Neomycin	N/A	pDonor-D05
pDonor-D07	EF1a	copGFP	Puromycin/TK	LoxP	pDonor-D07
pDonor-D08	CMV	copGFP	Neomycin/TK	LoxP	pDonor-D08
pDonor-D09	EF1a	N/A	Puromycin/TK	LoxP	pDonor-D09
pDonor-D10	CMV	N/A	Neomycin/TK	LoxP	pDonor-D10
pDonor-D11	PGK	copGFP	Puromycin/TK	LoxP	pDonor-D11
pDonor-D12	EF1a	copGFP	Hygromycin/TK	LoxP	pDonor-D12
pDonor-D13	PGK	copGFP	Neomycin/TK	LoxP	pDonor-D13
pDonor-D14	PGK	N/A	Puromycin/TK	LoxP	pDonor-D14