記事ID ： 33529

精製したエクソソームのimmunophenotypingに ExoStep™ エクソソームフローサイトメトリー解析キット

メーカー名：IMMUNOSTEP, S.L.

本商品は、ビーズ標識抗CD63捕捉抗体（またはビーズ標識抗CD9捕捉抗体）と蛍光色素標識抗CD9検出抗体（または蛍光色素標識抗CD81検出抗体）を使用して、フローサイトメトリーでエクソソームを検出/定量できる簡単な免疫ビーズアッセイです。再現性のある結果を提供し、エクソソームのimmunophenotypingと並行して実施することができます。

背景

エクソソームは、エンドサイトーシスにより多胞性エンドソーム¹が形成され、細胞から放出されることで形成される細胞外小胞です。エクソソームは、タンパク質・脂質・mRNA・miRNA・DNAを細胞間で運搬することで細胞間の伝達を担い^2,3、これにより、いくつかの疾患やがん転移に関連していると考えられています。また、がん微小環境⁴と免疫応答^5,6を制御する可能性も示唆されています。

特長

特異性が高い正確なエクソソーム検出
定量分析、蛍光とエクソソーム量の優れた相関性
少量のサンプルから検出可能
高感度、広いダイナミックレンジ
補足したエクソソーム集団を同時にimmunophenotyping

プロトコールは以下をご参照ください。

構成内容

超常磁性捕捉ビーズ
ExoStep インキュベーションバッファー
一次検出抗体
10× アッセイバッファー
スタンダード（品番EXOS-50-CST9、EXOS-50-PST81 のみ含まれる。)

エクソソームの検出手順

エクソソームワークフローの単離/検出のためのImmunobeadアッセイ
図1. イムノビーズアッセイによるエキソソームの分離/検出ワークフロー

製品データ

図2. ExoStepに結合したエクソソームのフローサイトメトリー解析
PC3 細胞培養培地 (A) およびヒト血漿/血清 (B) から Total Exosome Isolation を使用して事前に濃縮したエクソソームをPBS に再懸濁し、 CD63 および CD9 捕捉ビーズと混合して一晩インキュベートした。翌日、ビーズ結合エクソソームを一次検出抗体 (CD9/CD81-PE) で直接染色し、フローサイトメトリーで分析した。

図3. フローサイトメトリーで分析したアッセイのダイナミックレンジ
さまざまなエクソソーム濃度でのバックグラウンドノイズと特定のシグナルの関係を示した。

図4. 競合他社間の感度比較

参考文献

Yáñez-Mó M, Siljander P, Andreu Z, Bedina Zavec A, Borràs F, Buzas E et al. Biological properties of extracellular vesicles and their physiological functions. Journal of Extracellular Vesicles. 2015;4(1):27066.
Pitt JM, André F, Amigorena S, Soria JC, Eggermont A, Kroemer G, Zitvogel L. Dendritic cell-derived exosomes for cancer therapy. J Clin Invest. 2016.
Tkach M, Théry C. Communication by Extracellular Vesicles: Where We Are and Where We Need to Go. 2016 Cell 10;164(6):1226-32.
Becker A, Thakur BK, Weiss JM1, Kim HS, Peinado H, Lyden D Extracellular Vesicles in Cancer: Cell-to-Cell Mediators of Metastasis. Cancer Cell 2016 Dec 12;30(6):836-848.
López-Cobo S, Campos-Silva C, Valés-Gómez M. Glycosyl-Phosphatidyl-Inositol (GPI)-Anchors and Metalloproteases: Their Roles in the Regulation of Exosome Composition and NKG2D-Mediated Immune Recognition. Front Cell Dev Biol. 2016 Sep 12;4:97.
Jonathan M. Pitt, Guido Kroemer, Laurence Zitvogel Extracellular vesicles: masters of intercellular communication and potential clinical interventions. 2016 J Clin Invest. 2016;126(4):1139-1143
Théry C, Amigorena S, Raposo G, Clayton A. Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Supernatants and Biological Fluids. Current Protocols in Cell Biology. 2006

ExoStep™ Cell culture

ヒト培養細胞から精製・濃縮したエクソソームをフローサイトメトリーでimmunophenotypingするキットです。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ExoStep Cell Culture, Human, Phycoerythrin	ISP	EXOS-25-C9	25 TEST	￥151,000
ExoStep^TM Cell Culture + Lyophilized Exosome from PC-3 cell line, Human, Phycoerythrin	ISP	EXOS-50-CST9	50 TEST	￥339,000

ExoStep™ Serum/Plasma

ヒト血清・血漿から精製・濃縮したエクソソームをフローサイトメトリーでimmunophenotypingするキットです。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ExoStep Plasma, Human, Phycoerythrin	ISP	EXOS-25-P81	25 TEST	￥151,000
ExoStep Plasma + Standard	ISP	EXOS-50-PST81	50 TEST	￥339,000

ExoStep™ Urine

ヒト尿から精製・濃縮したエクソソームをフローサイトメトリーでimmunophenotypingするキットです。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
ExoStep Urine, Human, Phycoerythrin	ISP	EXOS-25-U9	25 TEST	￥151,000

【関連商品】

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Exostep General Kit, Human	ISP	EXOS-25-G9	1 KIT [25test]	￥151,000
Exostep General Kit, Human	ISP	EXOS-25-G81	1 KIT [25test]	￥151,000
ExoStep Mouse, Phycoerythrin	ISP	MO2EXOS-25-C9	25 TEST	￥153,000