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記事ID : 11967
研究用

アッセイキャリブレーション/定量用のコントロールにExosome(エクソソーム)スタンダード - 健常人ドナー由来 -

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エクソソームスタンダードは、各種アプリケーション(FACS、WB、ELISA)のリファレンス、生体サンプルの定量比較のためのキャリブレーションスタンダードとしてご利用いただけます。

エクソソームを長期保存するための理想的な方法は凍結乾燥で、凍結乾燥品は4℃における長期保存でも安定であることがわかっています。HansaBioMed(HNB)社では、各種生体原料(細胞培養上清、ヒト血漿、尿サンプルなど)から取得した凍結乾燥エクソソームをご提供しています。タンジェンシャルフローフィルトレーションとサイズ排除クロマトグラフィーを組み合わせて単離し、全体的なタンパク質量と粒子数を NTA および Nanosight® によって定量化/検証しています。

NanoSight は、Malvern Instruments 社の商標または登録商標です。

エクソソームスタンダード - 健常人ドナー由来 -

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背景

エクソソーム(エキソソーム)

エクソソームは、ほとんどの生細胞からエキソサイトーシスによって活発に分泌される、小さいエンドソーム由来の脂質ナノ粒子(50-120nm)です。エクソソームの放出は、健常および病的状態の両方で恒常的に、あるいは誘導によって起こり、その量はダイナミックに変化し、生理機能に関与また調節します。放出されるエクソソームの量及び分子構成は、親細胞の状態に依存しています。エクソソームは、多様な細胞種(造血系細胞、腫瘍系統、初代培養、ウイルス感染細胞)だけでなく、特定の血液由来体液(がん患者の血清、血漿)や、その他の体液(気管支肺胞洗浄液、胸水、滑液、尿、羊水、精液、唾液など)からも単離されています。エクソソームは、生理的及び病理的に多様な機能を持ち、癌、感染症、神経変性疾患などの様々な病理状態における役割が明らかになってきています。

特長

  • 標準化用の高精製エクソソーム
  • エクソソーム定量用のコントロール (spike-in) 
  • アッセイキャリブレーションに便利なReady to useフォーマット
  • 様々な生体サンプルからのエクソソーム

安定性

凍結乾燥エクソソームは、4℃で3年間保存できます。
再水和したエクソソームスタンダードは、室温での長期保存に適していないため、2時間以内に使用してください。残った再水和スタンダードのストック溶液は、ポリプロピレンバイアル(低結合性のものが望ましい)に分注し、-20℃で1ヶ月間、-80℃で6ヶ月間保存できます。凍結溶解を繰り返さないでください。

使用例

細胞培養上清から精製したエクソソームスタンダードのSD63検出による滴定
図1 細胞培養上清から精製したエクソソームスタンダードのSD63検出による滴定

 

新鮮なエクソソームと凍結乾燥エクソソームのエクソソーマルマーカーの比較
図2 新鮮なエクソソームと凍結乾燥エクソソームのエクソソーマルマーカーの比較
ヒト結腸癌細胞株の培養上清から分画遠心法で精製したエクソソームのFACSプロファイル

 

血漿エクソソーム由来エクソソームのNanosight分析の比較
図3 血漿由来エクソソームのNanosight分析の比較
左:新鮮なエクソソーム、右:凍結乾燥エクソソーム

 

エクソソーマルマーカーのウェスタンブロット比較
図4 エクソソーマルマーカーのウェスタンブロット比較
F:新鮮なエクソソーム
-20℃:凍結エクソソーム
L:凍結乾燥エクソソーム
参考文献
  1. Valkonen, S., van der Pol, E., Böing, A., Yuana, Y., Yliperttula, M., Nieuwland, R., ... & Siljander, P. R. M. (2016). Biological reference materials for extracellular vesicle studies. European Journal of Pharmaceutical Sciences.
  2. Oliveira-Rodríguez, M., López-Cobo, S., Reyburn, H. T., Costa-García, A., López-Martín, S., Mo, M. Y., ... & Blanco-López, M. C. (2016). Development of a rapid lateral flow immunoassay test for detection of exosomes previously enriched from cell culture medium and body fluids. Journal of Extracellular Vesicles, 5.
  3. Arcangeletti, M. C., Simone, R. V., Rodighiero, I., De Conto, F., Medici, M. C., Maccari, C., ... & Calderaro, A. (2016). Human cytomegalovirus reactivation from latency: validation of a “switch” model in vitro. Virology Journal, 13(1), 179.
  4. Zhang, Peng, Mei He, and Yong Zeng. "Ultrasensitive Microfluidic Analysis of Circulating Exosomes Using Nanostructured Graphene Oxide/Polydopamine Coating." Lab on a Chip (2016).
  5. Sitar, S., Kejz?ar, A., Pahovnik, D., Kogej, K., Tus?ek-Z?nidaric?, M., Lenassi, M., & Z?agar, E. (2015). Size characterization and quantification of exosomes by asymmetrical-flow field-flow fractionation. Analytical chemistry, 87(18), 9225-9233.
  6. Gardiner, C., Shaw, M., Hole, P., Smith, J., Tannetta, D., Redman, C. W., & Sargent, I. L. (2014). Measurement of refractive index by nanoparticle tracking analysis reveals heterogeneity in extracellular vesicles. Journal of extracellular vesicles, 3.
  7. Ferrante, S. C., Nadler, E. P., Pillai, D. K., Hubal, M. J., Wang, Z., Wang, J. M., ... & Freishtat, R. J. (2014). Adipocyte-derived exosomal miRNAs: a novel mechanism for obesity-related disease. Pediatric research, 77(3), 447-454.

健常人ドナー由来の凍結乾燥エクソソーム

血漿

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Lyophilized exosomes from Plasma of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEP-100/2 200 UG
[2x100μg]
¥98,000
Lyophilized exosomes from Plasma of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEP-100/5 500 UG
[5x100μg]
¥199,000
Lyophilized exosomes from Plasma of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEP-30/2 60 UG
[2x30μg]
¥73,000
Lyophilized exosomes from Plasma of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEP-30/5 150 UG
[5x30μg]
¥163,000
Lyophilized exosomes from Plasma of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEP30/6 6*30 UG
販売終了
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血清

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Lyophilized exosomes from serum of healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PES-100/2 200 UG
[2x100μg]
¥98,000
Lyophilized exosomes from Serum of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PES-100/5 500 UG
[5x100μg]
¥199,000
Lyophilized exosomes from Serum of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PES-30/2 60 UG
[2x30μg]
¥73,000
Lyophilized exosomes from Serum of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PES-30/5 150 UG
[5x30μg]
¥163,000
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尿

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Lyophilized exosomes from Urine of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEU-100/2 200 UG
[2x100μg]
¥98,000
Lyophilized exosomes from Urine of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEU-100/5 500 UG
[5x100μg]
¥199,000
Lyophilized exosomes from Urine of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEU-30/2 60 UG
[2x30μg]
¥73,000
Lyophilized exosomes from Urine of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PEU-30/5 150 UG
[5x30μg]
¥163,000
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唾液

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Lyophilized exosomes from Saliva of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PESL-100/2 200 UG
[2x100μg]
販売終了
Lyophilized exosomes from Saliva of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PESL-100/5 500 UG
[5x100μg]
販売終了
Lyophilized exosomes from Saliva of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PESL-30/2 60 UG
[2x30μg]
販売終了
Lyophilized exosomes from Saliva of Healthy donors, Human詳細データ HNB HBM-PESL-30/5 150 UG
[5x30μg]
販売終了
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