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微量核酸を含む生体液試料に対応低濃度DNA定量キット

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メーカー名：Norgen Biotek Corp.

本商品は、PCR法を用いて生体液試料中の微量なDNAを定量するキットです。

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背景

核酸の抽出量はサンプルの種類によって様々です。数mg程度の組織・細胞サンプルからは数µgの核酸を容易に精製することができますが、液体の生検サンプルからの場合は非常に微量の核酸しか得ることができません。
核酸の濃度を測定する最も一般的な方法は、波長260 nmで吸光度を検出する手法ですが、最新の分光光度計であっても、この場合の検出限界は2～10 ng/mL以上となります。その他の蛍光核酸染色を利用する定量法では、ng/mLもしくはそれ以下の低濃度核酸にも対応可能です。しかしながら、生体液試料の場合、予想される核酸収量はpg/mLもしくはそれ以下になってしまうため、この手法も完璧とは言い切れません。

使用目的

本商品ではPCR法に基づき、広範な濃度域のDNA定量を行うことができます。Real-Time PCRを行いDNAの標準品でスタンダード曲線を作成し、目的のDNAを正確に定量することが可能です。

特長

生体液試料中の微量DNAを定量
フェムトグラム（fg）単位でも定量可能

構成内容

2× Real-Time PCRマスターミックス
DNA定量プライマーセットミックス
定量済DNAスタンダード
ヌクレアーゼフリー水
インサート

本商品ご使用の際には、精製済みDNAを準備する必要があります。
ノルジェン（Norgen）社では、下記DNA精製キットを推奨しています。

使用方法

**表1. qPCRアッセイの準備**
組成	容量/1PCR反応
ヌクレアーゼフリー水	5.5 µL
2× Real-Time PCRマスターミックス	10 µL
DNA定量用プライマーセットミックス	2 µL
DNAサンプル/スタンダード	2.5 µL
トータル容量	20 µL