cAMPの簡便かつ高感度な検出に！ ScreenQuest™ ELISA cAMPアッセイキット(比色/蛍光)

Screen Quest™ ELISA cAMPアッセイは、独自のHRP基質Amplite™GreenまたはAmplite™Red を使用した直接競合ELISAを原理とした簡便、高感度なアッセイです。

cAMP活性の決定は、cAMPと相互作用する受容体の活性化や特性解析、および受容体とリガンドの同定を評価する機能アッセイに

• 高感度：比色　0.1 nMのcAMPを検出 / 蛍光1 nMのcAMPを検出
• 簡便：面倒なアセチル化ステップを排除&1次抗体を固相化したプレートを梱包

比色

• Component A: cAMP Standard
• Component B: Assay Buffer
• Component C: HRP-cAMP Conjugate
• Component D: 10X Wash Solution
• Component E: Cell Lysis Buffer
• Component F: Anti-cAMP Ab Coated 96-Well Plate
• Component G: Amplite™ Green

蛍光

• Component A: cAMP Standard
• Component B: Assay Buffer
• Component C: HRP-cAMP Conjugate
• Component D: 10X Wash Solution
• Component E: Cell Lysis Buffer
• Component F: 3% H₂O₂
• Component G: Amplite™ Red
• Component H: Anti-cAMP Ab Coated 96-Well Plate
• Component I: Substrate Buffer

比色

1. サンプルの調整
2. cAMPスタンダードまたはテストサンプルを抗cAMP抗体コート済プレートに添加A
3. 室温で5-10分インキュベート
4. 1ｘHRP-cAMPコンジュゲートを添加
5. 室温で3時間インキュベート
6. 洗浄バッファーで4回洗浄
7. Amplite™グリーン試薬を添加
8. 室温で1-3時間インキュベート
9. 吸光度を405, 650 or 740 nm で測定

蛍光

1. サンプルの調整
2. cAMPスタンダードまたはテストサンプルを抗cAMP抗体コート済プレートに添加
3. 1ｘHRP-cAMPコンジュゲートを添加
4. 室温で2時間インキュベート
5. 4回洗浄
6. Amplite™Redワーキング試薬を添加
7. 15-60分インキュベート
8. 蛍光強度（Ex/Em = 540/590 nm ）モニタリング

Screen Quest™ 比色ELISA cAMPアッセイキット（品番36370）

図.1 Screen Quest™ ELISA cAMPアッセイキットを用いたcAMPの用量反応測定
96ウェルクリアプレート使用/ SpectraMaxマイクロプレートリーダー(Molecular Devises)

A：インキュベーション時間の比較
Amplite™Greenとのインキュベーション時間：1時間（青線）および3時間（赤線）
100 µLの反応液中で0.1 nMのcAMPを検出 （検出波長：405 nm）
B：測定吸光度の比較
Amplite™Greenとインキュベーション時間：3時間
405 nm（青線）、650 nm（赤線）または740 nm（緑線）

Screen Quest™ 蛍光ELISA cAMPアッセイキット（品番36373）

図.2 Screen Quest™ 蛍光ELISA cAMPアッセイキットを用いたcAMPの用量反応測定
96ウェル黒色プレート使用 / Geminiマイクロプレートリーダーで測定
100 µL反応量において、1 nMのcAMPを検出

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