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ヒト末梢血からの単核球（リンパ球および単球）の分離に最適リンパ球分離溶液　Lymphoprep™ / Lymphoprep™ Tube

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メーカー名：Serumwerk Bernburg AG

Lymphoprep™は、Bøyum^1）らの方法を応用して、世界で最初に販売された単核球（単球、リンパ球）分離用の遠心分離媒体です。Ready-to-use チューブタイプのLymphoprep™ チューブもご用意しています。

Abbott Diagnostics Technologies社（旧Axis-Shield社、メーカー略号：AXS）密度勾配遠心分離媒体について

これまで、製造元Serumwerk Bernburg 社、販売元Abbott Diagnostics Technologies社として販売されていましたが、この度、Serumwerk Bernburg社が販売も行うこととなりました。今後も継続して、コスモ・バイオが製品をお届けいたします。

■ リンパ球分離溶液 Lymphoprep™ のサンプル

サンプルのお申し込み

* 無料サンプルは1研究室あたり1点のみです。

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特集：PBMC（末梢血単核細胞）

特長

単核細胞（単球およびリンパ球）をワンステップで分離
ISO13485 に準拠した製造
滅菌済み

適用

ヒト全血からのPBMC（リンパ球、単球）の分離

図1. ヒト血液細胞の密度と細胞数
Lymphoprepは密度1.077g/mLを境に細胞画分を分離します。

使用例

Lymphoprepを用いて分離後のチューブ写真：6人の異なるドナーのサンプルをたが、どのサンプルも再現性良く分離できた。
図：Lymphoprep™を用いて分離後のチューブ写真
6人の異なるドナーのサンプルをたが、どのサンプルも再現性良く分離できた。

製品仕様

Sodium diatrizoate	9.1% (w/v)
Polysucrose 400	5.7% (w/v)
密度	1.077 ± 0.001 g/ml
浸透圧	290 ± 15 mOsm
エンドトキシン	< 1.0 IU/ml

図2. Diatrizoic acid
Diatrizoic acidは Lymphoprep™, Polymorphprep™に使用されています。

使用方法

Lymphoprep 使用方法

(1) 全血を抗凝固剤(EDTA、heparin、ACD)入りのチューブに回収、もしくは脱繊維血を使用して下さい。

(2) 全血サンプルを等量の0.9％NaCl 水で1：1に希釈します。

(3) 12-15mLの遠心チューブの中で、3ml の Lymphoprep™ 上層に 6ml の希釈血液を注意深く重層します。あるいは、Lymphoprep™ を希釈血液の下に重層する事も可能です。希釈血液と分離媒体が混ざらないよう注意して操作して下さい。エアロゾル形成を防ぐためキャップを閉めて下さい。

(4) 800 x g、20分、室温（20°C 程度）でスイングローターを用いて遠心します。2時間以上保存された血液を使用する場合、遠心時間を30分に増やして下さい。

(5) 遠心後は右上図の様にサンプルと Lymphoprep™ の境界面に明瞭な単核球のバンドが形成されます。バンドをパスツールピペットで回収します。

(6) 回収した画分を 0.9％ NaClもしくは培地を用いて希釈し、画分の密度を下げ、250 x g、10分遠心して細胞をペレットにします。

技術情報（FAQ）あります！

参考文献

1) Bøyum, A (1968) : Separation of leucocytes from blood and bone marrow. Scand. J. Clin Lab. Invest, 21, Suppl. 97.
2) Favour, C. B. (1964) : Antigen-antibody reactions in tissue culture. Immunological Methods, ed. J. R. Ackroyd, pp. 195-223. Blackwell Scientific Publ., Oxford.
3) Harris, R. & Ukayiofo, E. V. (1969) : Rapid preparation for lymphocytes for tissue typing. Lancet 327, 7615.
4) Ting, A. & Morris, P. J. (1971) : A technique for lymphocyte preparation from stored heparinized blood. Vox Sang. 20, 561.
5) Thorsby, E. & Bratlie, A. (1970) : A rapid method for preparation of pure lymphocyte suspensions. Histocompatibility Testing 1970, ed P. I. Terasaki, p. 655 Munksgard, Copenhagen.