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ヒト末梢血からの単核球（リンパ球および単球）の分離に最適リンパ球分離溶液　Lymphoprep™ / Lymphoprep™ Tube

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メーカー名：Serumwerk Bernburg AG

Lymphoprep™は、Bøyum^1）らの方法を応用して開発された、ヒト単核細胞（単球、リンパ球）分離用の遠心分離媒体です。新鮮なヒト末梢血（全血）から、単核細胞 (Peripheral Blood Mononuclear Cells; PBMC) をワンステップで分離します。Ready-to-useタイプのLymphoprep™ チューブもご用意しています。

■ リンパ球分離溶液 Lymphoprep™ のサンプル

サンプルのお申し込み

* 無料サンプルは1研究室あたり1点のみです。

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特集：密度勾配遠心分離媒体（血液細胞、細胞小器官の分離）

アプリケーション

ヒト全血からのPBMC（リンパ球、単球）の分離

図1. ヒト血液細胞の密度と細胞数
Lymphoprep™は密度1.077g/mLを境に細胞画分を分離します。

データ

Lymphoprepを用いて分離後のチューブ写真：6人の異なるドナーのサンプルをたが、どのサンプルも再現性良く分離できた。
図2：Lymphoprep™を用いて分離後のチューブ写真
異なる６ドナーのサンプル全てで、再現性良く分離できた。

図3. 他社製品との性能比較
(左) Lymphoprep™を用いて分離したヒトPBMC。
(右) 他社製品を用いて分離したヒトPBMC。一部の細胞に空胞変性（矢印）の兆候が認められた。

使用方法

全血を抗凝固剤(EDTA、heparin、ACD)入りのチューブに回収、もしくは脱繊維血を使用して下さい。
全血サンプルを等量の0.9％NaClで希釈します。（１：１）
12-15mLの遠心チューブの中で、3ml の Lymphoprep™ 上層に 6ml の希釈血液を注意深く重層します。あるいは、Lymphoprep™ を希釈血液の下に重層する事も可能です。希釈血液と分離媒体が混ざらないよう注意して操作して下さい。エアロゾル形成を防ぐためキャップを閉めて下さい。
800 x g、20分、室温（20°C 程度）でスイングローターを用いて遠心します。2時間以上保存された血液を使用する場合、遠心時間を30分に増やして下さい。
遠心後は右図の様にサンプルと Lymphoprep™ の境界面に明瞭な単核細胞のバンドが形成されます。バンドをパスツールピペットで回収します。
回収した画分を 0.9％ NaClもしくは培地を用いて希釈し、溶液の密度を下げ、250 x gで10分遠心して細胞をペレット化します。

製品仕様

GMP準拠およびISO 13485認証を取得した製造業者であるSerumwerk Bernburg社によって、製造、品質管理されています。

Sodium diatrizoate	9.1% (w/v)
Polysucrose 400	5.7% (w/v)
密度	1.077 ± 0.001 g/ml
浸透圧	290 ± 15 mOsm
エンドトキシン	< 1.0 IU/ml
無菌性	滅菌済み。欧州薬局方の無菌試験にて確認

参考文献

1) Bøyum, A (1968) : Separation of leucocytes from blood and bone marrow. Scand. J. Clin Lab. Invest, 21, Suppl. 97.
2) Favour, C. B. (1964) : Antigen-antibody reactions in tissue culture. Immunological Methods, ed. J. R. Ackroyd, pp. 195-223. Blackwell Scientific Publ., Oxford.
3) Harris, R. & Ukayiofo, E. V. (1969) : Rapid preparation for lymphocytes for tissue typing. Lancet 327, 7615.
4) Ting, A. & Morris, P. J. (1971) : A technique for lymphocyte preparation from stored heparinized blood. Vox Sang. 20, 561.
5) Thorsby, E. & Bratlie, A. (1970) : A rapid method for preparation of pure lymphocyte suspensions. Histocompatibility Testing 1970, ed P. I. Terasaki, p. 655 Munksgard, Copenhagen.

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Lymphoprep^TM	SEW	1856	250 ML	￥14,000
Lymphoprep^TM	SEW	1856	4*250 ML	￥43,000
Lymphoprep^TM	SEW	1858	6*500 ML	￥104,000

Lymphoprep™ Tube

Lymphoprep™が 50 mL チューブに入っている滅菌済みReady-to-use タイプです。
チューブ内に多孔の仕切り板があるため、サンプルを直接チューブに注ぐことができ操作が簡便です。

■ Lymphoprep™ チューブのサンプル

サンプルのお申し込み

* 無料サンプルは1研究室あたり1点のみです。

使用方法

全血を抗凝固剤(EDTA、heparin、ACD)入りのチューブに回収、もしくは脱繊維血を使用して下さい。
Lymphoprep™ は使用前に1 分間、400xg で遠心し、Lymphoprep™ をチューブの底に移動させてください。
20-30 mL の希釈血液 (1:1) を 10 mL の Lymphoprep™ が入ったチューブに直接注ぎます。
800 x g、20分、室温（20°C 程度）でスイングローターを用いて遠心します。
遠心後は図の様にサンプルと Lymphoprep™ の境界面に明瞭な単核細胞のバンドが形成されます。バンドをパスツールピペットで回収します。もしくはチューブを静かに傾けて、しきり板の上部にある溶液を注ぎだすことも可能です。
回収した画分を 0.9％ NaClもしくは培地を用いて希釈し、溶液の密度を下げ、250 x gで10分遠心して細胞をペレット化します。

技術情報（FAQ）あります！