商品情報

記事ID : 14501
研究用

血漿、血清、尿や細胞培養上清からワンステップで単離エクソソーム(エキソソーム)単離キット EXO-Prep

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EXO-Prep は、生体液(血漿、血清、尿など)または細胞培養上清から、エクソソーム(エキソソーム)をワンステップで単離できる試薬です。

エクソソーム(エキソソーム)単離キット EXO-Prep

【関連情報】

背景

エクソソーム(エキソソーム)は、ほとんどの生細胞から活発に分泌される、エンドソーム由来の脂質二重膜で形成される分泌顆粒(50-120 nm)です。エクソソームは、健常・病的状態の両方で恒常的に、あるいは誘導によって放出されます。その放出量や分子構成(エクソソーム内に保持されるmiRNAやタンパク質など)は由来する細胞の状態によってダイナミックに調節され、また生物学的に重要な機能を果たします。

使用目的

本製品は、たった1回のインキュベーションで血漿、血清、尿のような液状の臨床検体や細胞上清から短時間でエクソソームを単離することができるキットです。サンプルにEXO-Prepを加えて1時間インキュベートした後、1回遠心してエクソソームのペレットを回収し、1X PBS に再懸濁します。可溶化したエクソソームは、タンパク質/miRNAを含む核酸バイオマーカープロファイリング、ナノ粒子トラッキング解析(NTA)、電子顕微鏡解析などにご使用いただけます。

特長

  • 短時間でエクソソーム単離
  • 超遠心不要
  • 簡単で迅速な手順
  • 臨床検体、細胞培養上清からエクソソームを単離
  • 少量のサンプルからも単離可能
  • タンパク質プロファイリングに最適
  • エクソソームに含まれる核酸(miRNAを含む)の抽出・プロファイリングに最適
  • 4℃で保存可能

プロトコール

エクソソーム(エキソソーム)単離キットのプロトコール

アプリケーション

■ ELISA アッセイ

EXOPrep で単離したエクソソームは、ELISA アッセイを用いたタンパク質プロファイリングに適している。
ELISA には、ヒト血漿中のエクソソームを捕捉(キャプチャー)する、エクソソーム捕捉用イムノプレート(品番: HBM-POF-XX/XX)を用いた。

エクソソーム(エキソソーム)単離キット-ELISA アッセイ

■ ウェスタンブロット

エクソソーム(エキソソーム)単離キット-ウェスタンブロット

EXO-Prep を用いて、100 uL / 500 uL の血漿・血清、および、10 mL / 20 mL の尿からエクソソームを単離し、タンパク質ライセート(30 ug)中のエクソソームマーカー Alix を検出した。超遠心(UC)によって精製したエクソソームのタンパク質ライセート(30 ug)をコントロールとした。

 

■ トータル RNA 抽出および miRNA 発現プロファイリング

EXO-Prep または超遠心(UC)により、100 uL / 500 uL の血漿から単離したエクソソームを使用して、トータル RNA の抽出、および、4種類のエクソソーム miRNA のプロファイリングを行った。
超遠心により同量の血漿から精製したエクソソームと比較すると、EXO-Prep を用いて単離したエクソソームには、より多くの miRNA が含まれていた。

トータルRNA抽出およびmiRNA発現プロファイリング

■ ナノ粒子トラッキング解析(Nano Tracking Analysis: NTA)

EXO-Prep で単離し、1X PBS 100 uL に再懸濁したエクソソームを用いて、ナノ粒子トラッキング解析(NTA)を行った。粒子のサイズは、エクソソーム小胞のサイズ(50-120 nm)に対応していた。

ナノ粒子トラッキング解析

他社製品との比較

特徴 EXO-Prep 他社製品
細胞培養上清からのエクソソームの単離
生体液(血漿、血清、尿)からのエクソソームの単離
ペレットの可溶化は困難
血漿からのエクソソームの単離 トロンビンで前処理 不要 必要
ペレットの可溶化 簡単 非常に困難
最小サンプル量 100 uL 250 uL
インタクトなエクソソームを単離することができ、
ELISA アッセイに適している
ELISA アッセイには不適
核酸抽出・解析に適している

EXO-Prep 生体液(血漿/血清)用

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
EXO-Prep: isolation from biofluids (plasma, serum)詳細データ HNB HBM-EXP-B5 5 ML
¥73,000

EXO-Prep 培養細胞上清用

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
EXO-Prep: isolation from cell culture supernatants詳細データ HNB HBM-EXP-C25 25 ML
[25rxn]
¥93,000

EXO-Prep 尿用

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
EXO-Prep: isolation from Urine詳細データ HNB HBM-EXP-U25 30 ML
[25rxn]
¥93,000

関連商品

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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