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HitHunter® Kinase Enzyme Activity Assay Kits は、キナーゼ反応に伴う ADP 蓄積量を直接測定する、抗体不使用・非放射性の均一系（No-wash）アッセイキットです。標的ごとに最適化された試薬がすべて揃った Ready-to-use 仕様のキットによりスムーズな実験導入を可能にし、反応から測定までわずか約 90 分の迅速なワークフローでスピーディーに結果を取得できます。さらに最大 1 mM の高 ATP 耐性を備えており、実際の体内環境に近い条件や難易度の高い脂質キナーゼの評価においても信頼性の高いデータを取得できます。
記事ID ： 47450
洗浄不要の均一系アッセイ！約 90 分で結果が得られる Ready-to-use キナーゼ活性測定キット キナーゼ活性測定キット｜HitHunter® Kinase Enzyme Activity Assay Kits
特長
- 酵素・基質からプレートまで必要な試薬がすべて揃ったオールインワンの Ready-to-use 仕様
- 洗浄工程が不要 (No-wash) な均一系フォーマット
- キナーゼ反応から測定完了までわずか約 90 分で結果が得られる迅速なアッセイ
- 微量酵素 (ng/wellレベル) で成立する高感度・高 S/N 比
- 最大 1 mM の高 ATP・高基質濃度に対応し、生理的環境や難関標的の評価が可能
アッセイ原理
ATP 存在下で標的キナーゼが基質をリン酸化することで生じた ADP を、ADP Hunter Plus 試薬による酵素反応で過酸化水素 (H2O2) へと変換し、最終的に赤色蛍光シグナルとして検出します。洗浄工程が不要な均一系フォーマットのため、ハイスループットな活性測定が可能です。
ワークフロー
キナーゼ、基質、ATP、阻害剤を混合し 30℃ で 1 時間反応させた後、洗浄なしで検出試薬を加え、暗所で 30 分置くだけで、約 90 分で蛍光測定まで完了します。
評価データ例
微量の酵素量 (3 ng/well 未満) で優れた直線性を確認 (左図)。わずか 1 ng/well の酵素量で S/N 比＝9 の高いシグナルが得られ、低 nM レベル (IC50=0.45 nM) の阻害活性を明瞭に検出した (右図)。
[左図：ATP] AMPK 1 ng/well、基質 50 µM。Km(ATP)= 29 µM を算出。
[右図：基質] AMPK 1 ng/well、ATP 87 µM。Km(Substrate)= 114 µM を算出。
高濃度域でもバックグラウンドの上昇を起こさず滑らかな飽和曲線を描くため、最大 1 mM までの高 ATP・高基質条件を必要とするアッセイにも適用可能。
キット構成内容
- 標的キナーゼ
- 基質
- ATP Gold (25 mM)
- 検出試薬 (ADP Hunter™ Plus Assay Kit)
- 384-well プレート
ターゲットリスト
| 品名 | 品番 | 品名 | 品番 | 品名 | 品番 |
|---|---|---|---|---|---|
| CDK16 Kinase EAA Kit | 46-041 | ICK Kinase EAA Kit | 45-023 | PIM2 Kinase EAA Kit | 44-607 |
| CDK17 Kinase EAA Kit | 46-042 | LOK Kinase EAA Kit | 44-686 | PKBβ (Akt2) Kinase EAA Kit | 44-339 |
| CK1α Kinase EAA Kit | 46-050 | LRRK2 Kinase EAA Kit | 44-919 | PKBγ (Akt3) Kinase EAA Kit | 44-502 |
| CK1ε Kinase EAA Kit | 46-045 | LTK Kinase EAA Kit | 44-958 | SGK1 Kinase EAA Kit | 44-331 |
| CK1γ1 Kinase EAA Kit | 44-711 | MAP4K3 Kinase EAA Kit | 45-030 | SLK Kinase EAA Kit | 45-027 |
| CK1γ2 Kinase EAA Kit | 44-712 | MAP4K4 Kinase EAA Kit | 45-012 | SRMS Kinase EAA Kit | 46-036 |
| CK1γ3 Kinase EAA Kit | 44-713 | MSK1 Kinase EAA Kit | 44-438 | STK25 Kinase EAA Kit | 44-929 |
| c-Kit Kinase EAA Kit | 44-559 | MSK2 Kinase EAA Kit | 44-616 | TNIK Kinase EAA Kit | 45-016 |
| DYRK1A Kinase EAA Kit | 44-951 | MST4 Kinase EAA Kit | 44-928 | TrkC Kinase EAA Kit | 44-922 |
| DYRK1B Kinase EAA Kit | 44-944 | MYO3B Kinase EAA Kit | 45-008 | Txk Kinase EAA Kit | 44-761 |
| DYRK3 Kinase EAA Kit | 45-002 | NEK1 Kinase EAA Kit | 45-020 | ||
| HIPK4 Kinase EAA Kit | 45-003 | NEK5 Kinase EAA Kit | 45-037 |
※384-well×2, 6, 25 フォーマットの 3 サイズを提供しています。
関連情報
創薬支援サービスに関するご相談
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。
※ 表示価格について
※ CAS Registry Numbers have not been verified by CAS and may be inaccurate.
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