培養細胞の免疫蛍光染色（IF）に有用な抗体を紹介 神経幹細胞／前駆細胞マーカー

神経細胞（ニューロン）の特定サブタイプとグリア細胞を同定するためのツールとして有用な、神経幹細胞（NSC：Neural stem cell）／神経前駆細胞（NPC：Neural progenitor cell）マーカー抗体を紹介します。

• 神経幹細胞とは?
• iPS/ES細胞と神経細胞研究
• 神経前駆細胞／成熟神経細胞マーカー

■ 神経幹細胞とは?

神経幹細胞（NSC：Neural stem cell）は、自己複製能と分化多能性を持つ細胞、つまり増殖して神経前駆細胞（NPC：Neural progenitor cell）の細胞集団を維持するとともに、領域的・空間的に異なる神経細胞（ニューロン）とグリア細胞に分化して特定の機能を果たすことが可能な細胞です。化学的に組成の明確な神経誘導培地で、神経幹細胞（NSC：Neural stem cell）を培養すると、前駆細胞から様々なサブタイプの神経細胞（ニューロン）に分化します。

■ iPS/ES細胞と神経細胞研究

人工多能性幹細胞（iPS細胞、iPSC：induced pluripotent stem cell）は、胚性幹細胞（ES細胞、ESC：embryonic stem cell）と同様に、神経前駆細胞（NPC：Neural progenitor cell）に誘導し、最終的に特定のニューロン（神経細胞）サブタイプとグリア細胞（アストロサイト、オリゴデンドロサイト）に分化させることができます［PMID: 20160098 、19252484 ］。

胚性幹細胞（ES細胞）由来の神経前駆細胞（NPC）は、3種類の主要な神経系細胞（ニューロン、アストロサイト、オリゴデンドロサイト）に分化させることができます。妊娠4週目から6週目まで、ヒト神経前駆細胞（NPC）は、数回の対称分裂で以後の神経分化のために決まった数の細胞を準備します。ヒト皮質ニューロンの分化は、妊娠6週目に開始されます。この時点で、神経前駆細胞（NPC）の対称分裂は非対称分裂に変わります。神経前駆細胞（NPC）の非対称分裂により、1つの神経前駆細胞（NPC）と、1つのニューロンまたはグリア細胞が生じます［PMID: 14623439 ］。

増殖性の神経前駆細胞（NPC）は、SOX2（SRY (sex determining region Y)-box 2）とPAX6（paired box 6）を発現していることが特徴です。通常、in vitroでの神経誘導の効率は、NESTIN、PAX6、およびSOX系の遺伝子発現分析によってモニタリングされます［PMID: 16002783 ］。

神経前駆細胞（NPC）由来のニューロン集団は、ニューロンマーカー（MAP2およびTUBB3）に対する抗体を使用して決定し、単層培養系または3D構造物によってニューロン分化をさらに進めることができます（図1）。神経前駆細胞（NPC）は、in vitroでの細胞モデリングと神経発生の模倣、神経変性疾患の動的病理の解明、および細胞補充療法の実現のための新しいツールとなります［PMID: 28105055 、27725795 ］。

皮質ニューロンへの最終分化については、TUBB3（Tubulin Beta 3 class III）とMAP2（microtubule-associated protein 2）の発現レベルの分析によって細胞をモニタリングします。

図1. 4% PFA固定hiPSC由来神経培養（35日培養）を用いたMAP2（品番：17490-1-AP、1:250希釈）とTUBB3（品番：66375-1-Ig、1：250）の免疫蛍光染色（赤色：MAP2、緑色：TUBB3、青色：DAPI）。BioTalentum社（ハンガリー）の提供

製品フォーカス | SOX2 抗体

SOX2 抗体

品番	11064-1-AP
タイプ	ウサギポリクローナル
適用	WB（ウェスタンブロット）、IHC（免疫組織化学）、IF（免疫蛍光染色）、FC（フローサイトメトリー）、ELISA
交差種	ヒト、マウス、ラット、ゼブラフィッシュ

図. 4% PFA固定マウス脳を用いたSOX2（品番：11064-1-AP、1:50希釈）の免疫蛍光染色（緑：SOX2、青：DAPI）。

製品フォーカス | Nestin 抗体

Nestin 抗体

品番	19483-1-AP
タイプ	ウサギポリクローナル
適用	WB（ウェスタンブロット）、IHC（免疫組織化学）、IF（免疫蛍光染色）、ELISA
交差種	ヒト、マウス、ラット

図. 4% PFA固定ラット脳を用いたNestin（品番：19483-1-AP、1：100希釈）のSOX2との共免疫蛍光染色（緑：Nestin、赤：SOX2、青：DAPI）。

製品フォーカス | PAX6 抗体

PAX6 抗体

品番	12323-1-AP
タイプ	ウサギポリクローナル
適用	WB（ウェスタンブロット）、IHC（免疫組織化学）、IF（免疫蛍光染色）、FC（フローサイトメトリー）、ELISA
交差種	ヒト、マウス、ラット

図. 4% PFA固定ヒト人工多能性幹細胞（hiPSC）由来の神経前駆細胞（NPC）を用いたPAX6（品番：12323-1-AP、1:250希釈）の免疫蛍光染色（赤：PAX6、青：DAPI）。BioTalentum社（ハンガリー）の提供

製品フォーカス | TUBB3 抗体

TUBB3 抗体

品番	66375-1-Ig
タイプ	マウスモノクローナル
適用	WB（ウェスタンブロット）、IHC（免疫組織化学）、IF（免疫蛍光染色）、FC（フローサイトメトリー）、ELISA
交差種	ヒト、マウス、ラット

図. 4% PFA固定hiPSC由来神経培養（35日培養）を用いたTUBB3（品番：66375-1-Ig、1：250）の免疫蛍光染色（緑：TUBB3、青：DAPI）。BioTalentum社（ハンガリー）の提供

製品フォーカス | MAP2 抗体

MAP2 抗体

品番	17490-1-AP
タイプ	マウスモノクローナル
適用	WB（ウェスタンブロット）、IHC（免疫組織化学）、IF（免疫蛍光染色）、IP（免疫沈降）、FC（フローサイトメトリー）、ELISA
交差種	ヒト、マウス、ラット

図. 4% PFA固定hiPSC由来神経培養（35日培養）を用いたMAP2（品番：17490-1-AP、1:250希釈）の免疫蛍光染色（赤色：MAP2、青色：DAPI）。BioTalentum社（ハンガリー）の提供

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