高親和性リンカーを用いて蛍光色素、HRP、ビオチンをラベリング FlexAble（フレクサブル）抗体標識キット

FlexAble（フレクサブル）抗体標識キットは、"非"共有結合性の「高親和性リンカー」を使用するタイプの新しい抗体標識キットです。

■ FlexAble（フレクサブル）抗体標識キットの原理

FlexAble（フレクサブル）抗体標識キットは、高い親和性を示す"非"共有結合性の『FlexLinker（フレックスリンカー）』を用いて抗体を標識します。FlexLinkerは、抗体と数分以内で強く結合します。抗体と結合しなかったFlexLinkerは『FlexQuencher（フレックスクエンチャー）』を添加することによって無効化（中和／遮断）されます。

図. FlexAble抗体標識キットの原理

■ 様々なバッファーで保存されている一次抗体を標識可能

FlexAble（フレクサブル）抗体標識キットは、全サプライヤー（全抗体メーカー）の一次抗体に使用することができます。"非"共有結合性の抗体標識キットであるため、共有結合性の標識法を利用した製品で必要となる場合がある、事前の抗体精製やバッファー置換、抗体の濃縮を必要としません。バッファー中にBSA等のキャリアタンパク質、50%グリセロールが添加されている場合や抗体濃度が低い場合でもあらゆる条件の一次抗体を標識することができます。

共有結合性のランダムな標識法とは異なり、免疫グロブリン（Ig）のFc領域に特異的であるため、抗原結合部位に干渉せず、一次抗体の機能性を維持した状態で均一に標識します。

■ 各種アプリケーション適用

FlexAble（フレクサブル）抗体標識キットを用いて標識された一次抗体は、各種アプリケーションで使用できます。

■ マルチプレックス染色（多重染色）を容易化

様々な抗体と組み合わせて、容易にマルチプレックス染色（多重染色）を実施することができます。

［多重化可能な抗体の組み合わせ］

• 本製品で標識された複数の抗体
• 市販の標識済み一次抗体
• 同一の免疫動物由来の一次抗体

■ ウサギ抗体×3種類の同時染色

図. TDP-43（緑）、Tom20（赤）、Lamin B1（シアン）
PFA固定HeLa細胞の免疫蛍光染色。緑：CoraLite® Plus 488 Kit（品番：KFA001）で標識したTDP-43抗体（品番：10782-2-AP）。赤：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA002）で標識したTom20抗体（品番：11802-1-AP）。シアン：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA003）で標識したLamin B1抗体（品番：12987-1-AP）。

■ マウス抗体×3種類の同時染色

図. Lamin B1（緑）、HSP60（赤）、GORASP2（シアン）
PFA固定HeLa細胞の免疫蛍光染色。緑：FlexAble CoraLite®488 Kit（品番：KFA021）で標識したLamin B1抗体（品番：66095-1-Ig）。赤：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA022）で標識したHSP60抗体（品番：66041-1-Ig）。シアン：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA023）で標識したGORASP2抗体（品番：66627-1-Ig）。

• 抗体濃度やバッファー組成に関係なく標識可能
• 所要時間はわずか10分！すぐに使えて、迅速かつ簡便な2ステッププロトコール
• 最低0.5µgの抗体から標識可能、バッファーの置換操作不要でロスは最小限
• 専用装置不要

■ 標準ワークフロー

FlexAble抗体標識キットは、「標識」と「無効化（中和／遮断）」のシンプルな2ステッププロトコールで、迅速かつ簡便に抗体を標識します。各操作の所要時間はわずか30秒程度であり、専用装置を必要とせず、お手元のピペットのみを使用して抗体標識操作を実施できます。1）一次抗体を標識するために、FlexLinkerとFlexBufferを加えて混和し、5分間インキュベーションします。2）遊離のFlexLinkerを無効化（中和／遮断）するために、FlexQuencherを添加し、再度5分間インキュベーションします。この2ステップの操作だけで、目的抗体の標識が完了し、直ちに使用できる状態になります。

図. FlexAble抗体標識キットの標準ワークフロー

■ 組織切片のマルチプレックス（多重）染色

ラット脳組織切片

ラット脳組織の免疫蛍光染色。使用組織：FFPE（ホルマリン固定パラフィン包埋）ラット脳組織切片。マゼンタ：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA023）で標識したNeuN抗体（品番：66836-1-Ig）。オレンジ：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA022）で標識したTUBB3抗体（品番：66375-1-Ig）。緑：CoraLite®488標識GFAP抗体（品番：CL488-60190）。

ヒト腎臓組織切片

ヒト腎臓の免疫蛍光染色。使用組織：FFPE（ホルマリン固定パラフィン包埋）ヒト腎臓切片。黄色：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA002）で標識したCalbindin抗体（品番：14479-1-AP）。マゼンタ：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA023）で標識したACE2抗体（品番：66699-1-Ig）。緑：CoraLite®488標識Podocalyxin抗体（品番：CL488-18150）。青：DAPI。

■ 培養細胞のマルチプレックス（多重）染色

HeLa細胞

PFA固定HeLa細胞の免疫蛍光染色。黄色：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA022）で標識したHSP60抗体（品番：66041-1-Ig）。シアン：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA023）で標識したGORASP2抗体（品番：66627-1-Ig）。青：DAPI。

HeLa細胞

PFA固定HeLa細胞の免疫蛍光染色。黄色：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA002）で標識したTOM20抗体（品番：11802-1-AP）。シアン：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA003、シアン）で標識したLamin B1抗体（品番：12987-1-AP）。

■ フローサイトメトリー解析

Jurkat細胞

Jurkat細胞のフローサイトメトリー：1X10^6個のJurkat細胞を染色した。シアン：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA002）で標識したHSP90抗体（品番： 13171-1-AP、0.5µg）。赤：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA002）で標識したアイソタイプコントロール抗体（0.5µg）。

PBMC（ヒト末梢血単核細胞）

PBMCのフローサイトメトリー：1X10^6個のPBMC（ヒト末梢血単核細胞、human peripheral blood mononuclear cells）を、FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA003）で標識したヒトCD45抗体、FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA022）で標識したヒトCD3抗体（クローン番号：UCHT1、品番：65151-1-Ig）で染色した。

■ ウェスタンブロット検出

A431細胞ライセート

A431細胞ライセートのWB（ウェスタンブロット）：siRNAをトランスフェクションしたA431細胞のライセートを使用した。緑：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA002）で標識したP53抗体（品番：80077-1-RR ）。赤：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA023）で標識したPCNA抗体（品番：60097-1-Ig）。

HeLa細胞ライセート

HeLa細胞ライセートのWB（ウェスタンブロット）。緑：FlexAble CoraLite® Plus 555 Kit（品番：KFA002）で標識したGAPDH抗体（品番：10494-1-AP）。赤：FlexAble CoraLite® Plus 647 Kit（品番：KFA023 ）で標識したNUDT21抗体（品番：66335-1-Ig）。

■ CoraLite®&CoraLite® Plusスペクトル

マルチプレックス（多重）染色のために各種CoraLite®／CoraLite® Plus色素を使用したFlexAble抗体標識キットを提供しています。重複する蛍光スペクトル領域が最小限であり、それぞれの蛍光色素を同時に使用できます。以下に表示するプロテインテックの蛍光スペクトルビューアーは、Fluorofinder  のプラットフォームを搭載しており、多重免疫蛍光染色等の実験のデザインに活用できます。

■ 製品ラインアップ

ウサギ IgG用、マウス IgG1用、マウス IgG2a用、マウス IgG2b用、ヒト IgG用の5種類をラインアップしています。

■ ウサギ IgG 抗体標識キット

適合動物種	対象アイソタイプ	標識物質		励起/蛍光波長 （Ex/Em）	品番	包装サイズ
ウサギ	IgG		CoraLite® Plus 405	399 nm/422 nm	KFA006	10 rxn、50 rxn、200 rxn
			FITC Plus	495 nm/524 nm	KFA008
			CoraLite® Plus 488	493 nm/522 nm	KFA001
			CoraLite® Plus 555	554 nm/570 nm	KFA002
			CoraLite® Plus 647	654 nm/674 nm	KFA003
			CoraLite® Plus 750	755 nm/780 nm	KFA004
			HRP酵素	-	KFA005
			Biotin（ビオチン）	-	KFA007

■ マウス IgG1抗体標識キット

適合動物種	対象アイソタイプ	標識物質		励起/蛍光波長 （Ex/Em）	品番	包装サイズ
マウス	IgG1		CoraLite® Plus 405	399 nm/422 nm	KFA026	10 rxn、50 rxn、200 rxn
			FITC Plus	495 nm/524 nm	KFA028
			CoraLite® Plus 488	493 nm/522 nm	KFA021
			CoraLite® Plus 555	554 nm/570 nm	KFA022
			CoraLite® Plus 647	654 nm/674 nm	KFA023
			CoraLite® Plus 750	755 nm/780 nm	KFA024
			HRP酵素	-	KFA025
			Biotin（ビオチン）	-	KFA027

■ マウス IgG2a抗体標識キット

適合動物種	アイソタイプ	標識物質		励起/蛍光波長 （Ex/Em）	品番	包装サイズ
マウス	IgG2a		CoraLite® Plus 405	399 nm/422 nm	KFA046	10 rxn、50 rxn、200 rxn
			FITC Plus	495 nm/524 nm	KFA048
			CoraLite® Plus 488	493 nm/522 nm	KFA041
			CoraLite® Plus 555	554 nm/570 nm	KFA042
			CoraLite® Plus 647	654 nm/674 nm	KFA043
			CoraLite® Plus 750	755 nm/780 nm	KFA044
			HRP酵素	-	KFA045
			Biotin（ビオチン）	-	KFA047

■ マウス IgG2b抗体標識キット

適合動物種	対象アイソタイプ	標識物質		励起/蛍光波長 （Ex/Em）	品番	包装サイズ
マウス	IgG2b		CoraLite® Plus 405	399 nm/422 nm	KFA066	10 rxn、50 rxn、200 rxn
			FITC Plus	495 nm/524 nm	KFA068
			CoraLite® Plus 488	493 nm/522 nm	KFA061
			CoraLite® Plus 555	554 nm/570 nm	KFA062
			CoraLite® Plus 647	654 nm/674 nm	KFA063
			CoraLite® Plus 750	755 nm/780 nm	KFA064
			HRP酵素	-	KFA065
			Biotin（ビオチン）	-	KFA067

■ ヒト IgG抗体標識キット

適合動物種	対象アイソタイプ	標識物質		励起/蛍光波長 （Ex/Em）	品番	包装サイズ
ヒト	IgG		CoraLite® Plus 405	399 nm/422 nm	KFA108	10 rxn、50 rxn、200 rxn
			FITC Plus	495 nm/524 nm	KFA109
			CoraLite® Plus 488	493 nm/522 nm	KFA104
			CoraLite® Plus 555	554 nm/570 nm	KFA105
			CoraLite® Plus 647	654 nm/674 nm	KFA106
			CoraLite® Plus 750	755 nm/780 nm	KFA107
			HRP酵素	-	KFA110
			Biotin（ビオチン）	-	KFA111

• ［製品詳細］ウサギ IgG 抗体標識キット（FITC／CoraLite®色素／HRP酵素／ビオチン）

• ［製品詳細］マウス IgG1 抗体標識キット（FITC／CoraLite®色素／HRP酵素／ビオチン）

• ［製品詳細］マウス IgG2a 抗体標識キット（FITC／CoraLite®色素／HRP酵素／ビオチン）

• ［製品詳細］マウス IgG2b 抗体標識キット（FITC／CoraLite®色素／HRP酵素／ビオチン）

• ［製品詳細］ヒト IgG 抗体標識キット（FITC／CoraLite®色素／HRP酵素／ビオチン）

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