All-in-One ベクター／T7ベクターを販売 ORIGENE社 CRISPR-Cas9 ゲノム編集用ベクター

CRISPR-Cas9 システム

ゲノム編集の最新ツールであるCRISPR-Cas9 は、特異的なゲノムの破壊や置換を可能にするフレキシブルかつシンプルなシステムで、高い特異性と低毒性という特長を持ちます。CRISPR-Cas9ゲノム編集システムには、Cas9タンパク質と、ヒトU6ポリメラーゼIIIプロモーターで発現されたガイドRNAベクターの共発現が必要になります。導入されたgRNA(ガイドRNA,guide RNA,sgRNA)とCasタンパク質(Cas,Cas9)は複合体を形成します。3'末端にプロトスペーサー近接モチーフ（PAM - 配列NGG）が存在すると、gRNA-Cas9複合体が標的部位に接岸し、ゲノムDNAの両鎖を切断 (二重鎖切断, DSB) し、これを修復する機構を利用して標的遺伝子のノックアウトやノックインを可能とします。
→ CRISPR-Cas が簡単にわかる動画はこちら

本製品は、ゲノム編集用のガイドRNA(sgRNA, gRNA, 単鎖gRNA)をクローニングするベクターです。

ガイドRNAとCas9を共発現するAll-in-oneタイプのベクターは、ワイルドタイプのCas9を発現するスタンダードベクターのほか、GFP発現タイプ、CD4発現タイプ（導入細胞の濃縮用）、レンチウイルスベクターをご提供しています。また、遺伝子ノックアウトモデル（動物）作製にも有用なT7プロモータータイプや、オフターゲット作用の低減に有用なニッカーゼタイプのCas9(Cas9 D10A, Nickase Cas9)を発現するベクターも取り揃えています。標的遺伝子用のgRNAを組み込む部位は、リニア（線状化）タイプと、制限酵素サイト(BamH I/BsmB I)タイプがからお選びいただけます。

ORIGENE社では、無料でご利用頂けるgRNAデザインツールをWEB上にご用意しております。
こちらをご利用いただき、gRNAをデザイン、合成しお好みのベクターへクローニングしてご利用ください。

CRISPR-Cas9 All-in-One ベクター （ワイルドタイプ Cas9）

標的遺伝子に対するsgRNAをワイルドタイプのCas9と共発現するAll-in-Oneタイプのベクターです。
全てのベクターには、Myc-DDK*タグがついています。オフターゲット作用のリスクが少ない実験系にご利用ください

品番	特長	プロモーター （Cas9）	プロモーター （gRNA)	クローニングサイト	ベクターマップ
GE100001	スタートアップに最適*1	CMV	U6	線状化済
GE100002	スタートアップに最適*2	CMV	U6	BamH I/BsmB I
GE100018	tGFP	CMV	U6	BamH I/BsmB I
GE100022	CD4	CMV	U6	BamH I/BsmB I
GE100009	HIV骨格	CMV	U6	線状化済
GE100010	HIV骨格	CMV	U6	BamH I/BsmB I

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*1 アニーリングバッファー（品番GE100007）,CF3 シークエンスプライマー（品番GE100008）が含まれており、スタートアップに最適です。
*2 CF3 シークエンスプライマー（品番GE100008）が含まれておりスタートアップに最適です。

＊Peptide sequence of the DDK-tag（Flag®）: N-DYKDDDDK-C Flag® is a registered trademark of Sigma-Aldrich

CRISPR-Cas9 All-in-One ベクター / セパレート型ベクター （ニッカーゼタイプ Cas9）

標的遺伝子に対するsgRNAをニッカーゼタイプのCas9 D10Aと共発現するAll-in-Oneタイプおよびセパレートタイプのベクターです。
全てのベクターには、Myc-DDK*タグがついています。がん細胞を使用する場合など、オフターゲット作用のリスク考慮したほうがよい実験系にご利用ください。

品番	特長	プロモーター （Cas9）	プロモーター （gRNA)	クローニングサイト	ベクターマップ
GE100019	All-in-One	CMV	U6	BamH I/BsmB I
GE100020	In vitro トランスクリプション	Ｔ7	セパレート	-
GE100025	In vitro トランスクリプション	セパレート	T7	BamH I/BsmB I

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＊Peptide sequence of the DDK-tag（Flag®）: N-DYKDDDDK-C Flag® is a registered trademark of Sigma-Aldrich

CRISPR-Cas9 T7 ベクター / セパレート型ベクター（ワイルドタイプ Cas9）

標的遺伝子に対するsgRNAとをワイルドタイプのCas9 を各々T7プロモーターで駆動する、セパレートタイプのベクターです。遺伝子ノックアウトモデル（動物）を作製する際には、受精卵や胚にCas9 mRNAおよびgRNAをインジェクションする方法が頻繁に行われており、T7 駆動の CRISP-Cas システムはこの目的に適しています。 全てのベクターには、Myc-DDK*タグがついています。

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GE100017	pCMV6-Entry-Cre	Cre-Loxリコンビナイゼーション用ベクター
GE100007	Annealing Buffer	オリゴアニーリング用バッファー(10X)
GE100008	CF3 Primer	標的gRNA用フォワードプライマー

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＊Peptide sequence of the DDK-tag（Flag®）: N-DYKDDDDK-C Flag® is a registered trademark of Sigma-Aldrich

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