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蛍光標識法による糖鎖解析に！還元剤は2種類ご用意 LudgerTag™ PROC（プロカインアミド）糖鎖標識キット

メーカー名：Ludger Ltd.

LudgerTag™ PROC 糖鎖標識キットは、N-グリカン、O-グリカン、GSL-グリカン、ヘパリン、または還元末端を持つあらゆる糖鎖をプロカインアミドで標識できるキットです。還元的アミノ化反応により、糖鎖のフリーの還元末端に色素を結合します。 2-AB 標識に比べてイオン化効率が向上しているため、LC-MSシステム、ESI-MS、またHPLC（HILIC,RP,WAX）にも適しています。

還元剤は、2-ピコリンボラン（2-PB）とシアノ水素化ホウ素ナトリウム（NaCNBH₃）の2種類からお選びいただけます。

本製品を使用した学会発表ポスター

特長

色素の特性	分子量 = 235.33 励起波長 = 310 nm、蛍光波長 = 370 nm
標識可能なサンプル数	標識試薬1セットにつき、12サンプルの標識が可能（合計24サンプル）
必要なサンプル量	1サンプルにつき、25 pmol - 25 nmol の糖鎖
適したサンプル	フリーの還元末端を持つ精製された糖鎖

表1.蛍光色素とU(HPLC), MSへの適合性

構成内容

本キットには、試薬が2セット（標識反応24回分）含まれます。

プロカインアミド色素（品番：LT-PROC-01）　×2本
2-PB 還元剤（2-ピコリンボラン）（品番：LT-PB-01）　×2本
または、NaCNBH₃ 還元剤（シアノ水素化ホウ素ナトリウム）　（品番：LT-CYANOB-05）　×2本
30% 酢酸 in DMSO （品番：LT-ACETIC-DMSO-01）　×2本

原理

標識は2段階の反応からなります。

シッフ塩基の形成
この反応には、閉環構造と開環構造が平衡状態にあるフリーの還元末端を持つ糖鎖が必要です。色素の第一級アミンが、開環状の還元末端残基のカルボニル炭素に求核攻撃し、部分的に安定したシッフ塩基を形成します。
シッフ塩基の還元
シッフ塩基（イミン）は化学的に還元され、安定した標識糖鎖が生成されます。

図1. 還元的アミノ化による糖鎖のプロカインアミド（PROC）標識

プロトコール概略

使用例

プロカインアミド標識キット（品番：LT-KPROC-VP24）、クリーンアッププレート（品番：LCPROC-96）を使用

図2. プロカインアミド標識糖鎖のUHPLC分析
上図：ヒトIgG　下図：エリスロポエチン

参考文献

Lucy et al., Prominent members of the human gut microbiota express endo-acting O-glycanases to initiate mucin breakdown. Nat Commun . 2020 Aug 11;11(1):4017. [DOI]10.1038/s41467-020-17847-5,(品番：LT-KPROC-24)
Daniel et al., Interlaboratory evaluation of plasma N-glycan antennary fucosylation as a clinical biomarker for HNF1A-MODY using liquid chromatography methods. Glycoconj J . 2021 Jun;38(3):375-386. doi: 10.1007/s10719-021-09992-w.(品番：LT-KPROC-96)
Radoslaw et al., Tsetse salivary glycoproteins are modified with paucimannosidic N-glycans, are recognised by C-type lectins and bind to trypanosomes. PLoS Negl Trop Dis . 2021 Feb 2;15(2):e0009071. doi: 10.1371/journal.pntd.0009071.(品番：LT-KPROC-VP24)

LudgerTag™ PROC（プロカインアミド）糖鎖標識キット

■ 還元剤：2-PB（2-ピコリンボラン）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Procainamide glycan labelling kit (2PB reductant)	LUD	LT-KPROC-VP24	1 KIT [24サンプル]	￥163,000

■ 還元剤：NaCNBH₃（シアノ水素化ホウ素ナトリウム）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Procainamide glycan labelling kit	LUD	LT-KPROC-24	1 KIT [24サンプル]	￥169,000
Procainamide glycan labelling kit	LUD	LT-KPROC-96	1 KIT [96サンプル]	お問い合わせ

【関連商品】 Ludger Clean™ プロカインアミドクリーンアッププレート

標識後のサンプルのクリーンアップ（未反応の色素やその他の標識試薬の除去）にご使用いただけるプレート（96ウェル）です。

商品詳細： Ludger Clean™ プロカインアミドクリーンアッププレート

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
LudgerClean procainamide plate	LUD	LC-PROC-96	96 WELL	￥72,000

【関連商品】LudgerClean™ Sカートリッジ

標識後のサンプルのクリーンアップ（未反応の色素やその他の標識試薬の除去）にご使用いただけるカートリッジです。

商品詳細： LudgerClean™ Sカートリッジ

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
LudgerClean S Cartridges	LUD	LC-S-A6	6 EACH [6_カートリッジ入り]	￥55,000
LudgerClean S-plus (saver pack)	LUD	LC-S-A48	48 EACH [48 cartridges]	￥370,000