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研究用

セーフ・ハーバー(安全領域)ノックインシステムで簡単ゲノム編集! CRISPR-Cas9 AAVS1領域遺伝子挿入キット&ベクター

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ヒトゲノム上の safe harbor(セーフ・ハーバー/安全領域)である AAVS1領域に目的の遺伝子を挿入するためのキットおよびベクターです。

背景

AAVS1領域を標的とした遺伝子導入

ヒトゲノム内の AAVS1(Adeno-associated virus integration site 1)領域は、遺伝子導入による影響を受けにくい安全領域(セーフ・ハーバー/safe harbor)として知られています。AAVS1領域は様々な細胞で転写活性を有しており、確実で安定した導入遺伝子の発現が得られます。CRISPR-Cas9 システムは、AAVS1領域を標的として遺伝子を挿入するために最適な技術です。

特長

  • AAVS1領域を標的として目的遺伝子を挿入
  • 導入遺伝子の突然変異やランダムな挿入による影響がありません
  • 導入遺伝子のソースとして、ゲノムワイドにヒト遺伝子を網羅する TrueORF® cDNA クローン をご利用いただけます
    検索方法はこちら
  • TrueORF® クローンから AAVS1 ドナーベクターにインサートを簡単に交換可能(PrecisionShuttle™ システム)

CRISPR を介した AAVS1領域(Safe Harbor)ノックインシステム

本システムには、下記の2種類のベクターが必要です。

  1. pCas-Guide-AAVS1: AAVS1ターゲティング用 All-in-one CRISPR ベクター
    標的部位に二本鎖切断(DSB)を導入します
  2. pAAVS1-Puro-DNR: AAVS1ホモロジーアームを含む、目的遺伝子導入用ドナーベクター(目的遺伝子のクローニングが必要)
    DSBを導入した位置に目的遺伝子をノックインします

CRISPR を介した AAVS1領域(Safe Harbor)ノックインシステム

CRISPR を介した AAVS1領域への遺伝子ノックイン概略図

CRISPR を介した AAVS1領域への遺伝子ノックイン概略図

AAVS1 遺伝子ノックインベクターキット

CRISPR を介してヒト AAVS1領域に導入遺伝子を挿入するためのベクターキットです。
導入遺伝子を pAAVS1-puro-DNR ベクターにクローニングする必要があります。

[構成内容]

  • pCas-Guide-AAVS1(品番: GE100023)
  • pAAVS1-puro-DNR(品番: GE100024)
  • pCas-Guide-scramble(品番: GE100003)
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAVS1 Transgene knockin vector kit詳細データ ORG GE100027 1 KIT
¥370,000

pCas-Guide-AAVS1

  • ヒト AAVS1領域を標的とする検証済み CRISPR ベクター
  • AAVS1 標的配列: GTTAATGTGGCTCTGGTTCT
  • Cas9(CMV プロモーター)および AAVS1 gRNA(U6 プロモーター)を発現
pCas-Guide-AAVS1
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
AAVS1 gRNA vector, validated AAVS1 targeting sequence cloned in pCas-Guide vector詳細データ ORG GE100023 10 UG
¥160,000

pAAVS1-Puro-DNR

  • ヒト AAVS1領域に目的遺伝子を挿入するためのドナーベクター
  • AAVS1 相同配列(左・右、各 550 bp)を含む
  • 導入遺伝子クローニング用のマルチクローニングサイト(TrueORF® クローンからのインサートの交換に対応)
  • PGK プロモーター下に Puromycin 耐性遺伝子を搭載
  • pCas-Guide-AAVS1(品番: GE100023)との共導入により目的遺伝子をターゲット領域に挿入
pAAVS1-Puro-DNR
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Donor vector with AAVS1 homologous arms, C-terminal Myc-DDK tag, Puro resistance, ready for transgene cloning詳細データ ORG GE100024 10 UG
¥264,000

pAAVS1-RFP-DNR

  • PGK-puro および CMV-RFP を含む AAVS1 ドナーベクター
  • pCas-guide-AAVS1 と共に使用して CRISPR ノックインのポジティブコントロールに
  • AAVS1 相同配列(左・右、各 550 bp)を含む
  • pCas-guide-AAVS1(品番: GE100023)との共導入により、ヒト AAVS1領域に PGK-puro および CMV-RFP カセットを組み込み可能
pAAVS1-RFP-DNR
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Positive control for AAVS1 insertion (RFP insertion via CRISPR)詳細データ ORG GE100026 10 UG
¥130,000

TrueORF® cDNA クローン 商品検索方法

TrueORF® cDNA クローンは、ORF をタグ融合タンパク質として発現する Ready-to-use の cDNA クローンです。

  • ヒト・マウス・ラットのゲノムワイドなコレクション
  • タグは Myc-DDK / GFP の2種類
  • レンチウイルスベクターシステムもご用意
  • タンパク質発現検証済みの 20,000 種類のヒト cDNA クローン
  • 様々なアプリケーションに使用できる70種類のデスティネーションベクター

    商品検索方法

  1. ORIGENE社 TrueORF® cDNA クローン検索ページ「Clone Finder 外部リンク」にアクセス
  2. 生物種を選択し、遺伝子名やアクセッション番号などを入力して検索
    ORG_AAVS1_Transgene_Insertion_1.gif
  3. 検索結果よりご希望の遺伝子を選択
    ORG_AAVS1_Transgene_Insertion_3.gif クラウンのアイコンがついた cDNA クローンは、TrueORF® Gold クローンです。
    ORG_AAVS1_Transgene_Insertion_2.gif
  4. クローンの詳細情報で遺伝子名やアクセッション番号をご確認いただいた後、ページ上方に表示される品番をご利用の代理店へお伝えいただき、お見積をご依頼ください。クローンごとに価格が異なります。
    ORG_AAVS1_Transgene_Insertion_4.gif

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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