GMP-Grade もしくは GMP-Ready mRNA 製造のための酵素(KACTUS社)

KACTUS社では、mRNA を製造するための酵素を豊富に取り揃えております。多くの酵素は cGMPガイドラインに従って製造され、FDA の Drug Master Files (DMF) に提出しています。残りの酵素は GMP-Readyで、お客様のニーズに合わせて cGMPスタンダードに移行します。

• GMP：現在、cGMPガイドラインに基づき製造されています。
• DMF：FDA Drug Master Files （DMF） に提出し、規制当局への申請を簡略化したもの。

GMPグレードの T7 RNAポリメラーゼは、高い mRNA収量 と DNAテンプレートからの正確な mRNA の転写を提供するように設計されています。転写物中の dsRNA の混入を最小限に抑えるよう設計されており、抗生物質や動物由来の製品を一切含んでいません。当社のT7ポリメラーゼは、FDA の Drug Master Files (#037660) に登録されています。

T7 RNAポリメラーゼは、DNA を鋳型として RNA を合成する役割を担っています。DNA中の T7プロモーター配列に非常に特異的であるため、制御された特異的な遺伝子発現に理想的なツールです。エラー率が低く、高効率で、高い処理能力を持つことで知られています。1つの DNAテンプレートから大量の RNA を転写することができます。mRNA を使ったアプリケーションには高品質で高純度の RNA が不可欠なため、T7 RNAポリメラーゼは mRNA の大量生産に理想的です。

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制限酵素は、mRNA の合成において、DNAテンプレートを配列特異的な部位で切断するために使用されます。酵素は DNA に特異的で明確な切断を導入し、これにより定義された長さと配列を持つ RNA の転写を可能にします。
KACTUS社では、様々な GMPグレードおよびGMP ready の制限酵素を提供しています。各酵素の詳細については、以下をご覧ください。

• BsaI
• KpnI
• SalI
• BspQI
• NruI
• SapI
• I-SceI
• PvuII
• XbaI

Vacciniaウイルス由来のキャップ酵素は、mRNA分子の 5'末端に 7-methylguanosine キャップ (m7Gまたはm7Gppp) を付加する酵素です。これにより、mRNA を分解から保護する Cap0構造が形成されます。このキャップ構造は、mRNA の効率的な翻訳と核から細胞質への輸送に重要です。

mRNA cap 2'-O-メチルトランスフェラーゼは、リボースの 2'-O位で最初のヌクレオチドにメチル基を付加し、Cap1鎖 (m7GpppNm) を形成します。この2'-O-メチル化は、外来RNAを「自己RNA」として認可し、その mRNA に対する自然免疫応答の非自己識別に関与しています。

KACTUS社では、Cap1構造を生成するためのワンステップキャッピング反応システムでの使用に設計された GMPグレードのワクシニアキャッピング酵素と mRNA Cap 2'-O-メチルトランスフェラーゼを提供します。KACTUS社のキャッピング酵素は、95%以上のキャッピング効率を実証しています。

ポリ(A)ポリメラーゼは、mRNA のポリアデニル化において重要な役割を果たします。 この酵素は、mRNA分子の 3'末端へのアデノシン一リン酸 (AMP) の付加を触媒し、ポリ (A) テールとして知られるものを作成します。 ポリ (A) テールは、RNA をヌクレアーゼによる分解から保護し、核からの RNA の輸送を助け、RNA のタンパク質への翻訳を促進します。

環状化酵素は、mRNA分子の最初と最後のヌクレオチド間にユニークな5'-5'ホスホジエステル結合を形成し、いわゆる環状mRNAを作成する役割を果たします。この環状化プロセスは、mRNA分子の安定性と翻訳効率を高め、細胞のエキソヌクレアーゼによる分解から保護するために重要です。

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