Atelerix（ATX）社　WellReady™ 細胞保存・輸送用ハイドロゲル（接着細胞、3Dモデル用） アプリケーション

• WellReady™ 細胞保存・輸送用ハイドロゲル
  （接着細胞、3Dモデル用）

• マクロファージ前駆細胞
• 角膜実質幹細胞
• 間葉系幹細胞
• 皮膚ケラチノサイト
• 皮膚線維芽細胞
• 大腸がんオルガノイド
• 皮質ニューロン
• プライマリースキン
• 腎臓近位尿細管上皮細胞
• 肝細胞モデル
• 心筋細胞
• 3D足場モデル
• がん細胞株
• 間葉系幹細胞スフェロイド
• その他（ハイスループットアプリケーション）

ヒト肝細胞の保存

96 wellプレートで共培養したヒト肝細胞と間質フィーダー細胞を、WellReady™ を用いて37℃で5日間保存した。
WellReady™で保存することで、Cytochrome P450活性の減少を抑制した。また、細胞の形態や生細胞率に影響はなかった。

図1. ヒト肝細胞および間質フィーダー細胞中のCytochrome P450活性

図2. 肝細胞の明視野像(上段)と肝細胞の生細胞/死細胞染色 (calcein-AM/ethidium homodimer-1 染色)（下段）

ヒトiPSC由来大脳皮質ニューロンの保存

成熟させたヒトiPS細胞由来大脳皮質ニューロンを、0.3 mLの神経維持培地のみ、または、WellReady™を用いて室温で3〜7日間保存した。 WellReady™で保存したニューロンは細胞生存率が回復し、正常な軸索を示した。

図3. 5日間保存後、回収したヒトiPS細胞由来大脳皮質ニューロンの細胞生存率

図4. ヒトiPS細胞由来大脳皮質ニューロンの保存前後の生細胞/死細胞染色 (緑：calcein-AM、赤：ethidium homodimer-1)

心筋細胞の保存

96wellプレートに播種したヒトiPS細胞由来心筋細胞を、WellReady™を用いて20℃で7日間保存した。 回収後の心筋細胞は、活動電位を回復し、以前の拍動に戻った。

図5. 心筋細胞の保存前後の生細胞/死細胞染色(緑：calcein-AM、赤：ethidium homodimer-1)

図6. 保存前後のAlamar Blue代謝活性測定

In vitro皮膚モデルの保存

In vitro皮膚モデルをWellReady™を用いて室温で最大7日間保存した。 保存後の皮下細胞は高い細胞生存率を保持し、無傷だった。

図7. 皮膚角化細胞（上段）および皮膚線維芽細胞（下段）の保存前後の生細胞/死細胞染色(緑：calcein-AM、赤：ethidium homodimer-1)

図8. wellReady™を用いて保存した間質/上皮皮膚モデルの代謝活性

ハイスループットアプリケーション

HEK293細胞を96wellまたは384wellプレートに播種して、WellReady™を用いて封入、輸送し、合計で5日間保存した。
輸送・保存後の細胞機能を各アッセイで評価した。いずれの場合も、WellReady™で保存、回収後の細胞の刺激応答性は、保存していないサンプルと同程度であった。

図9. WellReady™を用いて384wellプレートで保存したHEK293細胞のcyclicAMPアッセイ

図10. WellReady™を用いて384wellプレートで保存したHEK293細胞のflux based FLIPRアッセイ

図11. WellReady™を用いて96wellプレートで保存したHEK293細胞のkinase based target engagement live bindingアッセイ

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