■ 試薬
- ローダミン標識筋アクチン (#AR05)
- アクチン用バッファー(5 mM Tris-HCl pH 8.0, 0.2 mM CaCl2; #BSA01)
- Tissue culture cells seeded on glass coverslips
■ 機器
- マイクロインジェクター
技術情報
Cytoskeleton（CYT）社 ファロイジン‐アクチン染色プロトコール
プロトコル-概略-
- ローダミン標識筋アクチンをアクチン用バッファーで0.2 mM ATP および 1 mM DTTを添加し、 2 mg/mlに再懸濁します。氷上に1時間置き、脱重合させます。
Note: カルシウムイオンが細胞に影響する場合は、ローダミン標識アクチンは純水で再懸濁してください。 - 筋アクチン溶液を14,000Cxg,4℃で10分間遠心します。（より最適な方法としては 100,000 x g，4°Cで10分間遠心します。）
90％の上清を新しいチューブに移し、 マイクロインジョクション用針に毛細管現象によって充填します。 - ローダミン標識筋アクチンを細胞にマイクロインジェクションします。
Note: 組織培養培地および細胞質中の塩が、針内でのアクチン重合を引き起こす場合が有ります。 - 弱光条件でCCDカメラにより、温度制御した顕微鏡ステージ上で細胞を観察します。
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ファロイジン‐アクチン染色（Phalloidin / Actin）とは
商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては
使用しないように、十分ご注意ください。
