セルバイオラボ社 アデノウイルスによる遺伝子デリバリー プロトコール内で使用した商品
技術情報
セルバイオラボ社 アデノウイルスによる遺伝子デリバリー
使用するキットおよび試薬
● ViraBindTM Adenovirus Purification Kit（品番：VPK-100）
【構成内容】
1．Purification Filter
2．10X Wash Buffer
3．2X Elution Buffer
4．1X Regeneration Solution
<< キットに含まれないもの>>
・Glycerol
・0.45μm filter
・10 or 30-mL size syringe with a Luer-Lok® tip
プロトコール
1． 増幅したウイルス上清を精製フィルターに入れる前に，0.45μm sterile filter を通してください。
2． シリンジを精製フィルターにつけ，1x 洗浄バッファーでフィルターを事前に洗浄します。ウイルス上清を精製フィルターに通し，フロースルーは捨てずにとっておきます。回収量を最大にするために，フロースルーを同じフィルターで流します。
3． 洗浄フィルターを10mL の1x 洗浄バッファーで洗浄します（2回）。
4． コレクションチューブを洗浄フィルターの下にセットし，2-3mL の1X Elution Buffer（25 mM Tris, pH 7.5, 2.5 mM Mg2Cl, 1 M NaCl）を加え，流します。
※シリンジとフィルターの間に気泡ができないように気をつけてください。
5． グリセロールを最終濃度が10％になるように，精製ウイルスに加えます。精製したウイルスは-80℃で保存可能です。
6． 4 で使用した精製フィルターは2 回ご使用いただけます。精製が終わったら，10mL の1X Regeneration Solution をフィルターに加えた後，5mL の洗浄バッファーを加えます。regenerated filter はパラフィルムでラップし，次回使用するまで，4℃で保存してください。
