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免疫沈降（IP）で豊富な実績！高い特異性と親和性、Nano-Trap シリーズ SUMO-Tag-Trap Agarose（アガロースビーズ標識SUMOタグ抗体）

メーカー名：Proteintech Group, Inc.

SUMO-Tag-Trap Agarose（SUMOタグトラップアガロース）は、SUMOタグ融合タンパク質の免疫沈降（IP：Immunoprecipitation）実験に最適なアガロースビーズ担体結合済みのSUMOタグ抗体です。

アガロースビーズ（agarose beads）には、アルパカ（Alpaca）を宿主動物（免疫動物）として作製された「抗SUMOタグ組換えモノクローナルVHH抗体」が結合しています。VHH抗体は、Nanobody®としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体（Heavy chain-only antibody）」由来の抗原結合ドメインであり、高い特異性と親和性を示します。

高親和性&高特異性アルパカ組換えVHH 免疫沈降（IP）に最適

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背景

SUMO-Tagとは?

• 概要

SUMOタグ（SUMO-Tag）は、酵母からヒトに至るまでの真核生物に広く保存されたユビキチン様タンパク質（UBL：ubiquitin-like protein）の一種「SUMO（Small Ubiquitin-like Modifier）」タンパク質を基に設計された、約11 kDa（約100アミノ酸残基）の小型かつ高機能な融合用タンパク質タグです［PMID：15263846 外部リンク、19107426 ］。SUMOタンパク質は本来、翻訳後修飾「SUMO化（SUMOylation）」として細胞内タンパク質に可逆的に共有結合され、局在・安定性・相互作用等の多くの細胞機能を制御します［PMID：15189146 ］。

• 効果と利点

SUMOタンパク質を遺伝子組換えで目的タンパク質（POI）のN末端に融合させることで、タンパク質発現量の改善、可溶性の向上、プロテアーゼ分解の抑制、フォールディングの促進といった効果が得られることが多くの研究で報告されています［PMID：16084395 外部リンク］。SUMOタグの大きな利点は、タンパク質発現量や可溶性の向上に加えて、高精度なタグ除去に有効な点です。SUMO特異的なプロテアーゼ（酵母由来Ulp1、ヒト由来SenP2等）は、SUMOタグのC末端にあるGly-Glyモチーフとその立体構造全体を認識して切断するため、目的タンパク質のN末端には一切の余分なアミノ酸を残さず、完全なネイティブ配列で回収することができます［PMID：15263846 外部リンク、27771300 ］。この点は、短い線状配列を認識し、切断後に余分なアミノ酸残基を残す他のプロテアーゼ（TEV、thrombin等）と異なる特長を示します［PMID：27771300 ］。

• SUMOタグのバリアント

現在市販されているSUMOタグにはその由来や使用環境に応じていくつかのバリアントがあります［他社製品ページ：LifeSensors, Inc.社外部リンク、PMID：19107426 、22442034 、27771300 ］。

SUMOpro Tag（酵母Smt3由来タグ）：大腸菌等の原核細胞発現系での使用に適しています。
SUMOpro3 Tag（ヒトSUMO3由来タグ）：ヒト由来タンパク質等の哺乳類タンパク質の発現に適しており、大腸菌等の原核細胞に加えて、酵母等の真核発現系でも使用されます。
SUMOstar™ Tag（改変型Smt3タグ）：内在性のSUMOプロテアーゼに切断されないよう設計された耐性タグであり、酵母、昆虫、哺乳類細胞を含む様々な真核発現系での使用に適しています。専用のSUMOstar™ プロテアーゼと組み合わせて使用できます。

• 精製方法と最新のアプローチ

従来、SUMOタグはそのままではNi²⁺-NTA樹脂やグルタチオン樹脂のような精製用樹脂と特異的に結合する性質を持たないため、一般的にはHisタグ等と組み合わせたタンデムタグ戦略での精製が行われてきました［PMID：26297996 外部リンク］。この課題を解決するため、現在ではSUMOタグそのものを認識するVHH抗体（Nanobody®）を利用したビーズを用いる「SUMO-Tag-Trap」製品が開発され、SUMOタグ単独での免疫沈降（IP）やアフィニティ精製が可能となっています。SUMO-Tag-Trapは、酵母Smt3、ヒトSUMO3、SUMOstar™を含む複数のSUMOホモログに対する交差反応性を実験的に確認したVHH抗体によって構成されており、研究の幅をさらに広げる製品として開発されました。

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体（Heavy chain-only antibody）」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH

図. 従来の1/10ほどの分子量

ChromoTek（クロモテック）抗体・関連製品

■ Nano-Trapとは?

Nano-Trap（ナノトラップ）は、迅速かつ効率的な免疫沈降（IP）に最適です。各種担体（アガロースビーズ、磁性アガロースビーズ、磁気ビーズ）に結合したVHH抗体で構成されます。

各種ビーズ上に結合したVHH抗体は、ビーズ上に残存し、SDSサンプルバッファー中で溶出されません。したがって、従来のIP解析でしばしば問題となるIP抗体由来の軽鎖または重鎖バンドの干渉が無く、シングルバンドの精製を可能とします。さらに、ウェスタンブロットに使用する一次抗体/二次抗体を自由に選択できます。

Nano-Trap（ナノトラップ）

■ Nano-Trapのアプリケーション

IP（免疫沈降）/ CoIP（共免疫沈降）
ChIP（クロマチン免疫沈降）/ RIP（RNA免疫沈降）
質量分析（Mass spectrometry）
On-bead enzyme assay

［参考資料］免疫沈降（IP）と共免疫沈降（Co-IP）のトラブルシューティングガイド

図. Nano-Trap（左）と従来型であるProtein A/G結合IgG抗体（右）を用いた免疫沈降の概要。Nano-Trapでは、単一のバンドを得られ、従来型とは異なり軽鎖/重鎖由来のバンドは観察されません。

■ Proteintech Group（プロテインテック）とは?

Proteintech Group, Inc.（プロテインテック）社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン（www.ptglab.co.jp 外部リンク）が担当しています。

全てオリジナル商品：自社ラボで製造、検証済み（購入後1年間の交換保証付き）
数多くの評判：国内・海外における累計130,300報以上の論文使用実績（2025年4月現在）
迅速な納期：約20,000品目を当社倉庫に国内在庫！

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プロテインテックは「世界で評価されている抗体サプライヤー」

プロテインテックは、引用数ランキング付き抗体検索サイトを運営する英国の「CiteAb 外部リンク」が主催する「2025 CiteAb Awards」において「Researchers' choice（研究者の選択）」部門および「Educational Resource of the Year（今年の教育リソース）」部門の受賞者として選出されました。優れた品質と製品ラインアップに加え、カスタマーサービスや教育コンテンツが高く評価されています。

以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

［新製品のご案内］『MultiPro™（マルチプロ）』シングルセル解析用オリゴヌクレオチド標識抗体

特長

■ SUMO-Tag-Trap Agarose（アガロースビーズ標識SUMOタグ抗体）
商品名	SUMO-Tag-Trap Agarose（SUMOタグトラップアガロース）（Nano-Trap alpaca anti-SUMO, recombinant VHH, coupled to agarose beads）（アガロースビーズ標識アルパカ由来抗SUMOタグナノ抗体）
品番	suta-10/suta-20/suta-100/suta-200/suta-400
免疫原	SUMO-Tag
交差種	-
特異性	SUMO-Tag (all common variants)
アプリケーション	IP（免疫沈降）、CoIP（共免疫沈降）
標識	アガロースビーズ（Agarose Beads）
宿主動物/免疫動物	アルパカ（組換えモノクローナルVHH抗体）
クローン番号	-
抗体タイプ	アルパカ由来シングルドメイン一価抗体（Alpaca single domain antibodies, monovalent）
抗体親和性（KD値）	50 nM
結合キャパシティ	20 µg of recombinant SUMO-tagged protein (~40 kDa) per 25 µL bead slurry
容量	250 µL (10 reactions)/500 µL (20 reactions)/2.5 mL (100 reactions)/5 mL (200 reactions)/10 mL (400 reactions) （25 µL/reaction, 20 reactions = 500 µL slurry）
フォーマット	液体（slurry）
ビーズ詳細	Bead size: ~ 90 µm (cross-linked 4% agarose beads)
洗浄バッファー適合性	1M NaCl, 5 mM DTT, 5 mM β-mercaptoethanol, 5 mM TCEP, 2% NP40, 2% Triton X-100, 2M Urea
溶出方法	2x SDS-sample buffer（Lämmli） 200 mM glycine pH 2.5
別名	Recombinant, monoclonal anti-SUMO single domain antibody (sdAb) fragment
バッファー・保存剤	20% ethanol
保存方法	商品到着後は、4℃で保管してください。凍結はしないよう注意してください（凍結禁止）。

その他

■ SUMO-Tag-Trap アプリケーション参考資料

［プロトコール］SUMO-Tag-Trap Agarose
［プロトコール］SUMO-Tag-Trap Agarose Kit

よくある質問 FAQ

【01】非特異的タンパク質の結合を回避する方法はありますか?

必要に応じて、サンプルの「プレクリア処理（Pre-clearing）」を実施してください。その際、コントロールアガロース（品番：bab-20）またはコントロール磁性アガロース（品番：bmab-20）を利用できます。詳細は以下のトラブルシューティングガイドをご覧ください。

［参考資料］免疫沈降（IP）と共免疫沈降（Co-IP）のトラブルシューティングガイド

【02】結合タンパク質をネイティブ状態で溶出できますか?

0.2 M glycine（pH 2.5）を利用して室温条件で溶出できます。ビーズを30~60秒間ピペッティングし、この手順を繰り返します。1 M Tris base（pH 10.4）を直後に添加して上清を中和してください。

［プロトコール］SUMO-Tag-Trap Agarose
［プロトコール］SUMO-Tag-Trap Agarose Kit

【03】免疫沈降に必要な哺乳類細胞数を教えてください。

1回の免疫沈降反応で約10^6~10^7の哺乳類細胞の使用をおすすめします。収量は目的のタンパク質や相互作用因子の発現レベルに依存する場合があります。

【04】免疫沈降に必要な細胞抽出物量を教えてください。

哺乳類細胞以外の場合、0.5~1.0mgの細胞抽出物の使用をおすすめします。

【05】質量分析のために、結合タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

免疫沈降後にビーズ上で直接消化する方法も利用可能です。より迅速で効率的なサンプル前処理と高収率を実現します。詳細は以下の資料をご覧ください。

［参考アプリケーション］MS解析用On-bead digestプロトコール

【06】酵素アッセイのために目的タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

いいえ、活性中心がブロックされていない限り、直接酵素アッセイが可能です。詳細は以下の資料をご覧ください。

［参考アプリケーション］ワンステップ精製：GFPタグ融合タンパク質の酵素活性検出

【07】1回の免疫沈降に必要なNano-Trap量を教えてください。

親和性が非常に高いため、1回の反応あたり25 µL（Nano-Trap slurry量）で十分です。

使用例

■ SUMO-Tag-Trap Agarose（アガロースビーズ標識SUMOタグ抗体）（品番：suta-10/-20/-100/-200/-400）

SUMOタグ-Spotタグ融合GFPのEcoliライセートをSUMO-Tag-TrapでIPし、Spot抗体でWB解析

図1
3種類のSUMOタグ（SUMOstar™ tag、SMT3 tag、SUMO3 tag）およびSpotタグ融合GFPタンパク質を発現させたE.coliライセートを用いてSUMO-Tag-Trap Agarose（品番：suta-10）により免疫沈降（IP）を実施した。インプット画分（I）、フロースルー画分（F）、結合画分（B）に対してChromoTek Mouse anti-Spot-tag Antibody（品番：28a5-20）を用いてウェスタンブロット（WB）を実施した。検出にはMulti-rAb CoraLite® Plus 647-Goat Anti-Mouse Recombinant Secondary Antibody（品番：RGAM005）を二次抗体として使用した。

SUMO/Spotタグ融合GFPのE.coliライセートをIP後、Spot抗体と蛍光二次抗体でWB解析

図2
3種類のSUMOタグ（SUMOstar™ tag、SMT3 tag、SUMO3 tag）GFPタンパク質を発現させたHEK293Tライセートを用いてSUMO-Tag-Trap Agarose（品番：suta-10）により免疫沈降（IP）を実施し、SenP2プロテアーゼを用いてビーズ上消化・溶出を行った。切断されたSUMOタグフリーのGFPタンパク質の大部分は1回目の溶出（E1）で回収された。SenP2プロテアーゼおよびSUMOタグは残留画分（R）であるビーズ上に保持された。SenP2に対して耐性を持つSUMOStar™ はコントロールとして用いた。3種類のすべてのバリアントについて、インプット画分（I）、フロースルー画分（FT）、結合画分（B）、1回目・2回目の溶出画分（E1、E2）、残留画分（R）を対象に、CoraLite® Plus 647標識Hisタグモノクローナル抗体（品番：CL647-66005）およびFlexAble 2.0 CoraLite® Plus 488 Antibody Labeling Kit for Rabbit IgG（品番：KFA501）で標識したGFPポリクローナル抗体（品番：PABG1-20）を用いて多重蛍光ウェスタンブロット（WB）解析を行った。

SUMOタグ融合GFPをプロテアーゼ処理後、タグとGFPの結合性をSUMO-Tag-Trapで評価

図3
3種類のSUMOタグ（SUMOstar™ tag、SMT3 tag、SUMO3 tag）GFPタンパク質ををSenP2プロテアーゼで消化した。得られた消化産物（D）をSUMO-Tag-Trap Agarose（品番：suta-10）とインキュベートした。酵素処理によってSUMOタグが切断されたGFPタンパク質はフロースルー画分（F1およびF2）に検出され、一方でHis-SUMOタグはSUMO-Tag-Trap結合画分（B）に保持された。SenP2プロテアーゼに耐性を持つSUMOStar™はコントロールとして使用された。

■ 全ての評価データはこちらから閲覧できます

SUMO-Tag-Trap Agarose（アガロースビーズ標識SUMOタグ抗体）（品番：suta-10/-20/-100/-200/-400）検証データ

SUMO-Tag-Trap Agarose（アガロースビーズ標識SUMOタグ抗体）

■アガロースビーズ標識モノクローナル抗体（組換えVHH抗体）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti SUMO-Tag, SUMO-Tag-Trap^(R), recombinant VHH (Alpaca) Agarose	PGI	SUTA-10	10 RXN	￥53,000
Anti SUMO-Tag, SUMO-Tag-Trap^(R), recombinant VHH (Alpaca) Agarose	PGI	SUTA-20	20 RXN	￥91,000
Anti SUMO-Tag, SUMO-Tag-Trap^(R), recombinant VHH (Alpaca) Agarose	PGI	SUTA-100	100 RXN [5 x 20 rxns]	￥421,000
Anti SUMO-Tag, SUMO-Tag-Trap^(R), recombinant VHH (Alpaca) Agarose	PGI	SUTA-200	200 RXN [10 x 20 rxns]	お問い合わせ
Anti SUMO-Tag, SUMO-Tag-Trap^(R), recombinant VHH (Alpaca) Agarose	PGI	SUTA-400	400 RXN [20 x 20 rxns]	お問い合わせ

［関連］SUMO-Tag-Trap Agarose（アガロースビーズ標識SUMOタグ抗体）キット

■ 「推奨バッファー」も入ってお得な免疫沈降（IP）キットです。

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
SUMO-Tag-Trap Agarose Kit (Alpaca)	PGI	SUTAK-20	20 RXN	￥122,000

「アガロースビーズ標識SUMO抗体」と「バッファー類（Lysis buffer、RIPA buffer、Dilution buffer、Wash bufferを含む）」のセット商品です。

［関連］Binding Control Agarose（コントロールアガロース）

「結合コントロール」または「プレクリア処理（Pre-clearing）」に利用できるアガロースビーズです。VHH抗体は結合していません。プレクリア処理に関しては、プロテインテック社ブログ記事「ヒントとコツ | 免疫沈降（IP）でバックグラウンドを低減するための最適化方法外部リンク」をご参照ください。