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研究用

従来の Ca2+ プローブ Fluo-3、4 よりも高明度で早い!カルシウム指示薬 Fluo-8®

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Fluo-8® は、Fluo-3、Fluo-4 の便利な波長(最大励起波長 〜490 nm、最大蛍光波長 〜520 nm)は維持したまま、細胞ローディングやカルシウム応答を改善した Ca2+ 指示薬です。

使用目的

Fluo-3 や Fluo-4 はよく使われている可視光励起のカルシウム指示薬です。しかし、Fluo-3 AM や Fluo-4 AM はエステラーゼ加水分解が行われる生細胞や、細胞内カルシウム応答を最大にするための細胞ローディングコンディションが厳しい生細胞では、蛍光は控えめになります。

Fluo-8® では、Fluo-3、Fluo-4 の便利な波長(最大励起波長 〜490 nm、最大蛍光波長 〜520 nm)は維持したまま、細胞ローディングやカルシウム応答を改善しています。細胞ローディングに、Fluo-3 AM、Fluo-4 AM では 37℃ でのインキュベーションが必要でしたが、Fluo-8® AM では室温でのインキュベーションで大丈夫です。さらに、Fluo-8® AM は Fluo-4 AM よりも2倍以上の、Fluo-3 AM よりも4倍以上の明るさを示します。

ABD社では、カルシウム結合親和性の異なる Fluo-8® 試薬をご用意しています。

特長

  • 明るいシグナル: Fluo-3 AM よりも4倍、Fluo-4 AM よりも2倍明るい
  • 早いローディング: 室温、37℃ で 30分 〜 45分 で細胞に取り込まれます。
  • 便利: 励起 490 nm & 蛍光 520 nm(FITCフィルターセット適合)

製品データ

Fluo-8® AM と Fluo-4 AM を用いたHEK293細胞のカルバコール応答性

図1 Fluo-8® AM と Fluo-4 AM を用いた HEK293 細胞のカルバコール応答性
HEK-293 細胞を、96ウェルプレート(Costar black wall/clear bottom)に 40,000細胞/100 µL/ウェル の濃度で播種し、一晩培養した。培養培地を除去後、Fluo-4 AM、Fluo-8 AM を溶解した色素ローディング溶液 100 µL を添加し、室温で1時間インキュベートした。カルバコール(25µL/ウェル)を最終表示濃度になるように NOVOstar で加えた。蛍光シグナルは Ex/Em=490/525 nm で測定した。Fluo-8® で測定したカルバコールの EC50 は約 1.2 µM であった。

Fluo-3
Fluo-3 AM
Fluo-4
Fluo-4 AM
Fluo-8
Fluo-8 AM

図2
U2OS 細胞を、96ウェルプレート(Costar black wall/clear bottom)に 40,000細胞/100µL/ウェル の濃度で播種し、一晩培養した。培養培地を除去後、HHBS に溶解した 4 µM の Fluo-3 AM、Fluo-4 AM、Fluo-8 AM を添加し、37℃で1時間インキュベートした。 HHBS(200 µL)で2回洗浄後、FITC チャンネルを用いた蛍光顕微鏡で観察した。

Fluo-8®

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Fluo-8(R), AM詳細データ ABD 21080 1 MG
¥37,000
Fluo-8(R), AM詳細データ ABD 21083 20*50 UG
¥62,000
Fluo-8(R), AM詳細データ ABD 21082 10*50 UG
¥37,000
Fluo-8(R), AM詳細データ ABD 21081 5*50 UG
¥20,000
Fluo-8(R), potassium salt詳細データ ABD 21087 1 MG
¥62,000
Fluo-8(R), potassium salt詳細データ ABD 21089 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8(R), sodium salt詳細データ ABD 21086 1 MG
¥62,000
Fluo-8(R), sodium salt詳細データ ABD 21088 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8FFTM, AM詳細データ ABD 21105 1 MG
¥62,000
Fluo-8FFTM, AM詳細データ ABD 21104 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8FFTM, potassium salt詳細データ ABD 21103 1 MG
¥62,000
Fluo-8FFTM, potassium salt詳細データ ABD 21102 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8LTM, AM詳細データ ABD 21096 1 MG
¥62,000
Fluo-8LTM, AM詳細データ ABD 21097 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8LTM, potassium salt詳細データ ABD 21101 1 MG
¥62,000
Fluo-8LTM, potassium salt詳細データ ABD 21100 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8LTM, sodium salt詳細データ ABD 21099 1 MG
¥62,000
Fluo-8LTM, sodium salt詳細データ ABD 21098 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8HTM, AM詳細データ ABD 21090 1 MG
¥62,000
Fluo-8HTM, AM詳細データ ABD 21091 10*50 UG
¥41,000
Fluo-8HTM, sodium salt詳細データ ABD 21095 10*50 UG
¥41,000

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品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
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¥16,000
Pluronic(R) F-127 *Cell culture tested *詳細データ ABD 20050 10 G
¥16,000

AAT Bioquest 社カルシウム指示薬製品一覧

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