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研究用

既存製品よりもさらに高感度な測定が可能カルシウム指示薬 Cal-520™

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Cal-520™ AMは既存の緑色カルシウム指示薬(Fluo-3 AMやFluo-4 AM)と比較し、シグナルノイズ比と細胞内保持が著しく改善された新規のカルシウム測定感受性蛍光色素です。

使用目的

GPCRやカルシウムチャネルを発現したカルシウムシグナルを測定したい細胞に、細胞膜透過性のCal-520™ AMを前負荷します。細胞内に取り込まれるとCal-520™ AMの脂溶性保護基がエステラーゼにより加水分解され、細胞内に残留する負電荷の蛍光色素となります。この蛍光はカルシウムと結合することで極度に増強されます。細胞がアゴニストで刺激されると、受容体は細胞内へカルシウムを放出するようシグナルを発し、Cal-520™の蛍光が著しく上昇します。長波長、高感度、蛍光増感が100倍以上という特徴を有するため、Cal-520™は細胞内カルシウムの測定に理想的な指示薬です。

特長

  • 有機アニオントランスポーター耐性:プロベネシドに干渉されるGPCR, Ca2+チャネルのアッセイが可能
  • ロバスト:Fluo-4 AM等の指示薬と比べ、著しくS/N比が向上
  • 簡便:Fluo-3, Fluo-4, Fluo-8™等と同一の波長で測定可能(最大Ex/Em = 492 nm/514 nm)
  • 様々な規格から自分に合ったサイズを:1 mg, 10x50 µg, ハイスループット用

使用例

プロベネシド非存在下でのCHO-M1細胞における内因性P2Y受容体のATPに対する応答

図1. プロベネシド非存在下でのCHO-M1細胞における内因性P2Y受容体のATPに対する応答。
40,000細胞/100 µL/wellの濃度でCHO-M1細胞を播種して一晩培養した。HBSSに溶解した4 µMのFluo-4 AM(左)、Cal-520™ AM(右)を100 µL添加し、37℃で2時間インキュベートした。色素負荷培地を100 µLのHBSSと置換し、50 µLの300 µM ATPを添加した。細胞はFITCチャンネルを用いて蛍光顕微鏡(オリンパスIX71)で観察した。

 

プロベネシド有無の条件でCal-520™ AMまたはFluo-4 AMを添加したCHO-K1細胞の内因性P2Y受容体をATPで刺激した際のカルシウム動態
図2. プロベネシド有無の条件でCal-520™ AMまたはFluo-4 AMを添加したCHO-K1細胞の内因性P2Y受容体をATPで刺激した際のカルシウム動態

 

Cal-520 の蛍光/励起スペクトル
図3. Cal-520™ の蛍光/励起スペクトル

カルシウム指示薬 Cal-520™

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Cal-520(R), AM詳細データ ABD 21130 10*50 UG
¥41,000
Cal-520(R), AM詳細データ ABD 21131 1 MG
¥62,000
Cal-520(R), sodium salt詳細データ ABD 21135 10*50 UG
¥62,000
Cal-520(R), sodium salt詳細データ ABD 21136 1 MG
¥83,000
Cal-520(R), potassium salt詳細データ ABD 21140 10*50 UG
¥62,000
Cal-520(R), potassium salt詳細データ ABD 21141 1 MG
¥83,000
Cal-520FFTM, AM詳細データ ABD 21143 10*50 UG
¥72,000
Cal-520FFTM, potassium salt詳細データ ABD 21144 10*50 UG
¥72,000
Cal-520TM PBX Calcium Assay Kit *Optimized for Probenecid-Sensitive Cell Lines* ABD 36401 100 PLATE
販売終了
Biocytin, Label Cal-520(R)詳細データ ABD 20606 5*50 UG
¥62,000
Biotin, Label Cal-520(R)詳細データ ABD 20605 5*50 UG
¥62,000
Dextran *MW 3,000*, Label Cal-520(R)詳細データ ABD 20600 1 MG
¥41,000
Dextran *MW 10,000*, Label Cal-520(R)詳細データ ABD 20601 5 MG
¥62,000
Cal-520(R) maleimide詳細データ ABD 20610 100 UG
¥83,000
Cal-520(R) NHS Ester詳細データ ABD 20609 100 UG
¥83,000
Cal-520FFTM, AM詳細データ ABD 21142 1 MG
¥104,000
Cal-520NTM, AM詳細データ ABD 21146 10*50 UG
¥72,000
Cal-520NTM, potassium salt詳細データ ABD 21147 500 UG
[10x50 ug]
¥72,000

[関連商品]Pluronic® F-127

非イオン性界面活性剤である Pluronic® F-127 は、カルシウム指示薬 AM ester の水溶性を高める働きがあります。
品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Pluronic(R) F-127 *10% solution in water*詳細データ ABD 20053 10 ML
¥16,000
Pluronic(R) F-127 *20% solution in DMSO*詳細データ ABD 20052 10 ML
¥16,000
Pluronic(R) F-127 *Cell culture tested *詳細データ ABD 20050 10 G
¥16,000

AAT Bioquest 社カルシウム指示薬製品一覧

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