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記事ID : 15814
研究用

エクソソーム由来のRNAを含む cfc-DNA/RNA を精製尿用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製キット

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尿(フレッシュ/凍結/保存)から、エクソソーム由来のRNAを含む循環セルフリーDNA(cfc-DNA)やウイルスDNA/RNAを、迅速に精製・濃縮できるキットです。精製したDNA/RNAは高品質で、PCR阻害物質を含みません。

本キットは、Norgen社独自のスピンカラムクロマトグラフィーを用いて、全てのサイズの cfc-DNA・循環RNA(microRNA を含む)・エキソソーム由来のRNAを精製することができます。他社のキットとは異なり、フェノール/クロロホルム抽出やプロテアーゼ処理の必要がありません。また、使用目的に合わせて、50 µL から 100 µL の量で溶出することが可能です。精製した核酸は、PCR・qPCR・メチル化感受性逆転写 qPCR(methylation-sensitive reverse transcription qPCR)、RT-PCR、メチル化感受性PCR、サザンブロット法、ノーザンブロット法、RNase プロテクションアッセイ、プライマー伸長法、発現アレイ、次世代シーケンシング(NGS)などのアプリケーションにご使用いただけます。

サンプル量に合わせて、Mini キット(250 µL - 2 mL)、Midi キット(2 - 10 mL)、Maxi キット(10 - 30 mL)からお選びいただけます。

特長

  • 1回の溶出で、全てのサイズの循環DNA・循環RNA・エクソソーム由来のRNA(micro RNA・ウイルスDNA/RNAを含む)を単離
  • 様々な量の尿サンプルに対応
    (Mini キット: 250 µL - 2 mL 、Midi キット: 2 - 10 mL、Maxi キット: 10 - 30 mL)
  • フェノール抽出やキャリアRNA不要
  • サイズやGC含量に関わらず、全てのRNAをバイアスなしで結合・溶出
  • 循環セルフリーDNA/RNA、ウイルスDNA/RNAを目的に合わせた溶出量に濃縮
    (Mini/Midi/Maxi キット: 50 - 100 µL)
  • 短時間で高品質なRNA/DNAを精製
    (Mini キット: 25 - 30 分、Midi キット: 40 - 45 分、Maxi キット: 45 - 50 分)
  • 様々な尿サンプル(新鮮/凍結/保存)に対応

構成内容

構成内容 Mini キット
品番: 59900
Midi キット
品番: 60000
Maxi キット
品番: 60100
サイズ 50 プレップ 20 プレップ 10 プレップ
結合溶液 K 25 mL 75 mL 1 x 75 mL
1 x 25 mL
溶解バッファー A 30 mL 20 mL 20 mL
洗浄溶液 A 18 mL 18 mL 18 mL
溶出バッファー F 6 mL 6 mL 6 mL
Mini スピンカラム 50 20 10
Midi スピンカラム   20  
Maxi スピンカラム     10
コレクションチューブ 50 20 10
溶出チューブ(1.7 mL) 50 20 10

各キットの仕様

仕様 Mini キット
品番: 59900
Midi キット
品番: 60000
Maxi キット
品番: 60100
サンプルの種類 フレッシュ/凍結した尿 フレッシュ/凍結した尿 フレッシュ/凍結した尿
サンプル量 250 µL - 2 mL 2 - 10 mL 10 - 30 mL
最小溶出量 50 µL 50 µL 50 µL
最大溶出量 100 µL 100 µL 100 µL
10回の精製にかかる時間 25 - 30 分 40 - 45 分 45 - 50 分
精製できるDNAのサイズ ≥ 50 bp
精製できるRNAのサイズ 全てのサイズ
miRNA および small RNA(< 200 nt)を含む
平均的な収量 サンプルにより異なる

使用例

Mini キット(品番: 59900)の使用例

図1 様々な量の尿から精製したRNAの直線性
(画像はクリックで拡大されます)

図1 様々な量の尿から精製したRNAの直線性
本キットを用いて、尿(500 µL、1 mL、2 mL)からRNAを精製した。精製RNA 2 µL を RT-qPCR のテンプレートとして使用し、様々な量の尿から精製した miR-21 の直線性を評価した。本キットは、500 µL の尿から精製した miR-21 量に対して、1 mL の尿からの回収率は 95% であった。また、1 mL の尿から精製した miR-21 量に対して、2 mL の尿からの回収率は 92% であった。

図2 尿RNAサンプル中に存在する阻害物質量の測定
(画像はクリックで拡大されます)

図2 尿RNAサンプル中に存在する阻害物質量の測定
本キットを用いて、尿(500 µL、1 mL、2 mL)からRNAを単離した。様々な量で溶出したRNA(2、4、8 µL)を用いて、反応容量 20 µL で逆転写反応を行った後に qPCR により増幅し、Ct値の変動を検討した。テンプレート量の増加に伴いCt値が上昇する場合は、サンプル中にPCR阻害物質が存在する可能性がある。逆転写反応のテンプレートとして用いるPCRインプット量が増加しても、miR-21 qPCR の Ct値に影響は見られなかった。実際には、PCRインプット量の増加に伴い、Ct値が低下する傾向にあることから、本キットで精製したRNAは、尿中に存在する一般的な阻害物質を含まないことが示される。

図3 様々な量の尿から精製したDNAの直線性
(画像はクリックで拡大されます)

図3 様々な量の尿から精製したDNAの直線性
本キットを用いて、尿(500 µL、1 mL、2 mL)から循環DNAを精製した。精製DNA 2 µL を qPCR のテンプレートとして使用し、様々な量の尿から精製したハウスキーピング遺伝子 5S rRNA 量の直線性を評価した。500 µL の尿から精製した 5S rRNA 遺伝子量に対して、1 mL の尿からの回収率は 91% であった。また、1 mL の尿から精製した 5S rRNA 遺伝子量に対して、2 mL の尿からの回収率は 95% であった。

尿用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製キット

■ Mini キット(250 µL - 2 mL)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Mini Kit詳細データ NOG 59900 50 PREP.
¥59,000

■ Midi キット(2 - 10 mL)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Midi Kit詳細データ NOG 60000 20 PREP.
¥73,000

■ Maxi キット(10 - 30 mL)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Urine Cell-Free Circulating and Viral Nucleic Acid Purification Maxi Kit詳細データ NOG 60100 10 PREP.
¥51,000

血漿/血清サンプル調製キット セレクションガイド

品名 品番 サイズ サンプル量
循環セルフリーDNA精製キット
血漿/血清用 循環セルフリーDNA精製 Micro キット 55500 50 preps 10-200 μL
血漿/血清用 循環セルフリーDNA精製 Mini キット 55100 50 preps 200-500 μL
血漿/血清用 循環セルフリーDNA精製 Midi キット 55600 20 preps 1-4 mL
血漿/血清用 循環セルフリーDNA精製 Maxi キット 55800 10 preps 4-10 mL
尿用 循環セルフリー DNA 精製 Mini キット 56600 50 preps 200 μL-2 mL
尿用 循環セルフリー DNA 精製 Midi キット 56700 20 preps 2-10 mL
尿用 循環セルフリー DNA 精製 Maxi キット 56800 10 preps 10-30 mL
循環セルフリーRNA精製キット
血漿/血清用 RNA精製 Mini キット 55000 50 preps 50-200 μL
血漿/血清用 RNA精製 Midi キット 56100 20 preps 250 μL-1.5 mL
血漿/血清用 RNA精製 Maxi キット 56200 10 preps 4-10 mL
尿用 循環セルフリーRNA精製 Mini キット 56900 50 preps 250 μL-2 mL
尿用 循環セルフリーRNA精製 Midi キット 57000 20 preps 2-10 mL
尿用 循環セルフリーRNA精製 Maxi キット 57100 10 preps 10-30 mL
トータル(全)核酸精製キット
血漿/血清用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製 Mini キット 56300 50 preps 50-200 μL
血漿/血清用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製 Midi キット 56400 20 preps 250 μL-1.5 mL
血漿/血清用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製 Maxi キット 56500 10 preps 2-5 mL
尿用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製 Mini キット 59900 50 preps 250 μL-2 mL
尿用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製 Midi キット 60000 20 preps 2-10 mL
尿用 循環セルフリー&ウイルス核酸精製 Maxi キット 60100 10 preps 10-30 mL

商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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