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記事ID : 46419
研究用

免疫沈降(IP)で豊富な実績!高い特異性と親和性、Nano-Trap シリーズ mEos-Trap Magnetic Agarose(磁性アガロースビーズ標識mEos抗体)

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mEos-Trap Magnetic Agarose(mEosトラップ磁性アガロース)は、mEos融合タンパク質の免疫沈降(IP:Immunoprecipitation)実験に最適な磁性アガロースビーズ担体結合済みのmEos抗体です。

磁性アガロースビーズ(Magnetic agarose beads)には、アルパカ(Alpaca)を宿主動物(免疫動物)として作製された「抗mEos組換えモノクローナルVHH抗体」が結合しています。VHH抗体は、Nanobody®としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインであり、高い特異性と親和性を示します。

高親和性&高特異性アルパカ組換えVHH免疫沈降(IP)に最適

背景

mEosとは?

mEosは、蛍光タンパク質の一種で、光変換型蛍光タンパク質(Photoconvertible fluorescent proteins)として知られています。(参考文献 外部リンク紫外線を当てることで、緑色の蛍光(~516 nm)から赤色の蛍光(~581 nm)に変化します。この性質により、タイムラプスイメージングや単一細胞の追跡が可能になります。

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. 従来の1/10ほどの分子量
図. 従来の1/10ほどの分子量

■ Nano-Trapとは?

Nano-Trap(ナノトラップ)は、迅速かつ効率的な免疫沈降(IP)に最適です。各種担体(アガロースビーズ、磁性アガロースビーズ、磁気ビーズ)に結合したVHH抗体で構成されます。

各種ビーズ上に結合したVHH抗体は、ビーズ上に残存し、SDSサンプルバッファー中で溶出されません。したがって、従来のIP解析でしばしば問題となるIP抗体由来の軽鎖または重鎖バンドの干渉が無く、シングルバンドの精製を可能とします。さらに、ウエスタンブロットに使用する一次抗体/二次抗体を自由に選択できます。

ビーズに結合したVHH抗体

■ Nano-Trapのアプリケーション

  • IP(免疫沈降)/ CoIP(共免疫沈降)
  • ChIP(クロマチン免疫沈降)/ RIP(RNA免疫沈降)
  • 質量分析(Mass spectrometry)
  • On-bead enzyme assay
NanoTrap(左)と従来型であるProtein A/G結合IgG抗体(右)を用いた免疫沈降の概要。Nano-Trapでは、単一のバンドを得られ、従来型とは異なり軽鎖/重鎖由来のバンドは観察されません。
図. Nano-Trap(左)と従来型であるProtein A/G結合IgG抗体(右)を用いた免疫沈降の概要。Nano-Trapでは、単一のバンドを得られ、従来型とは異なり軽鎖/重鎖由来のバンドは観察されません。

■ Proteintech Group(プロテインテック)とは?

Proteintech Group, Inc.(プロテインテック)社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン(www.ptglab.co.jp 外部リンク)が担当しています。

  • 全てオリジナル商品:自社ラボで製造、検証済み(購入後1年間の交換保証付き)
  • 数多くの評判:国内・海外における累計130,300報以上の論文使用実績(2025年4月現在)
  • 迅速な納期:約20,000品目を当社倉庫に国内在庫!
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プロテインテックは「世界で評価されている抗体サプライヤー」

プロテインテックは、引用数ランキング付き抗体検索サイトを運営する英国の「CiteAb 外部リンク」が主催する「2025 CiteAb Awards」において「Researchers' choice(研究者の選択)外部リンク」部門および「Educational Resource of the Year(今年の教育リソース)外部リンク」部門の受賞者として選出されました。優れた品質と製品ラインアップに加え、カスタマーサービスや教育コンテンツが高く評価されています。

以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

 

特長

■ mEos-Trap® Magnetic Agarose(磁性アガロースビーズ標識mEos抗体)
商品名mEos-Trap Magnetic Agarose(mEosトラップ磁性アガロース)
(Nano-Trap alpaca anti-mEos, recombinant VHH, coupled to magnetic agarose beads)
(磁性アガロースビーズ標識アルパカ由来抗mEosナノ抗体)
品番metma-10/metma-20/metma-100/metma-200/metma-400 外部リンク
免疫原mEos-tag(mEos2およびmEos4b)
交差種mEos2, mEos4b
特異性Binds specifically to members of the mEos-tag family fused to a protein of interest at N-, C- or internal position. To ensure broad coverage of mEos variants, the Nanobody was optimized for binding to both mEos2 and mEos4b, which are representative of the different lineages of the mEos family. There is no cross-reactivity to other fluorescent proteins such as eGFP.
アプリケーションIP(免疫沈降)、CoIP(共免疫沈降)
標識磁性アガロースビーズ(Magnetic Agarose Beads)
宿主動物/免疫動物アルパカ(組換えモノクローナルVHH抗体)
クローン番号-
抗体タイプアルパカ由来シングルドメイン一価抗体
(Alpaca single domain antibodies, monovalent)
抗体親和性(KD値)75 nM
結合キャパシティ10 µg of recombinant mEos4b (28 kDa) per 25 ul bead slurry
容量250 µL (10 reactions)/500 µL (20 reactions)/2.5 mL (100 reactions)/5 mL (200 reactions)/10 mL (400 reactions)
(25 µL/reaction, 20 reactions = 500 µL slurry)
フォーマット液体(slurry)
ビーズ詳細Magnetic Agarose beads; ~40 um (cross-linked 6% magnetic agarose beads)
洗浄バッファー適合性2M NaCl, 5 mM DTT, 5 mM β-mercaptoethanol, 5 mM TCEP, 2% NP40, 2% Triton X-100, 0.2% SDS, 1M Urea
溶出方法2x SDS-sample buffer(Lämmli)
200 mM glycine pH 2.5
別名Recombinant, monoclonal anti-mEos single domain antibody (sdAb) fragment
バッファー・保存剤20 % EtOH
保存方法
  • 商品到着後は、4℃で保管してください。
  • 凍結はしないよう注意してください(凍結禁止)。

その他

■ mEos-Trap アプリケーション参考資料

よくある質問 FAQ

【01】非特異的タンパク質の結合を回避する方法はありますか?

必要に応じて、サンプルの「プレクリア処理(Pre-clearing)」を実施してください。その際、コントロールアガロース(品番:bab-20)またはコントロール磁性アガロース(品番:bmab-20)を利用できます。詳細は以下のトラブルシューティングガイドをご覧ください。

【02】結合タンパク質をネイティブ状態で溶出できますか?

0.2 M glycine(pH 2.5)を利用して室温条件で溶出できます。ビーズを30~60秒間ピペッティングし、この手順を繰り返します。1 M Tris base(pH 10.4)を直後に添加して上清を中和してください。

【03】免疫沈降に必要な哺乳類細胞数を教えてください。

1回の免疫沈降反応で約10^6~10^7の哺乳類細胞の使用をおすすめします。収量は目的のタンパク質や相互作用因子の発現レベルに依存する場合があります。

【04】免疫沈降に必要な細胞抽出物量を教えてください。

哺乳類細胞以外の場合、0.5~1.0mgの細胞抽出物の使用をおすすめします。

【05】質量分析のために、結合タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

免疫沈降後にビーズ上で直接消化する方法も利用可能です。より迅速で効率的なサンプル前処理と高収率を実現します。詳細は以下の資料をご覧ください。

【06】酵素アッセイのために目的タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

いいえ、活性中心がブロックされていない限り、直接酵素アッセイが可能です。詳細は以下の資料をご覧ください。

【07】1回の免疫沈降に必要なNano-Trap量を教えてください。

親和性が非常に高いため、1回の反応あたり25 µL(Nano-Trap slurry量)で十分です。

使用例

■ mEos-Trap Magnetic Agarose(磁性アガロースビーズ標識mEos抗体)(品番:metma-10/-20/-100/-200/-400)

 mEos-Trap磁性アガロースを用いた免疫沈降後のSDS-PAGE泳動像とウェスタンブロット画像
図1
トランスフェクションしたmEos4b発現HEK293T細胞を用いてmEos-Trap磁性アガロース(品番:metma-10)によりmEos4bタンパク質の免疫沈降(IP)を実施した。I:インプット分画、F:フロースルー分画、B:結合分画。

mEos-Trap Magnetic Agarose(磁性アガロースビーズ標識抗体)

■ 磁性アガロースビーズ標識モノクローナル抗体(組換えVHH抗体)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti mEos, mEos-Trap(R) Magnetic Agarose, recombinant VHH (Alpaca) Magnetic Particle/Agarose new詳細データ PGI METMA-10 10 RXN
¥53,000
Anti mEos, mEos-Trap(R) Magnetic Agarose, recombinant VHH (Alpaca) Magnetic Particle/Agarose new詳細データ PGI METMA-20 20 RXN
¥91,000
Anti mEos, mEos-Trap(R) Magnetic Agarose, recombinant VHH (Alpaca) Magnetic Particle/Agarose new詳細データ PGI METMA-100 100 RXN
[5 x 20 rxns]
¥421,000
Anti mEos, mEos-Trap(R) Magnetic Agarose, recombinant VHH (Alpaca) Magnetic Particle/Agarose new詳細データ PGI METMA-200 200 RXN
[10 x 20 rxns]
お問い合わせ
Anti mEos, mEos-Trap(R) Magnetic Agarose, recombinant VHH (Alpaca) Magnetic Particle/Agarose new詳細データ PGI METMA-400 400 RXN
[20 x 20 rxns]
お問い合わせ

[関連]mEos-Trap Magnetic Agarose(磁性アガロースビーズ標識mEos抗体)キット

■ 「推奨バッファー」も入ってお得な免疫沈降(IP)キットです。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
mEos-Trap Magnetic Agarose Kit (Alpaca)  new詳細データ PGI METMAK-20 20 RXN
¥122,000

「磁性アガロースビーズ標識mEos抗体」と「バッファー類(Lysis buffer、RIPA buffer、Dilution buffer、Wash bufferを含む)」のセット商品です。

[関連]Binding Control Agarose(コントロール磁性アガロース)

結合コントロール」または「プレクリア処理(Pre-clearing)」に利用できる磁性アガロースビーズです。VHH抗体は結合していません。プレクリア処理に関しては、プロテインテック社ブログ記事「ヒントとコツ | 免疫沈降(IP)でバックグラウンドを低減するための最適化方法 外部リンク」をご参照ください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Blocked magnetic agarose beads (binding control), Magnetic Particle/Agarose詳細データ PGI BMAB-20 20 RXN
¥16,000

[関連]mEos-Trap Agarose(アガロースビーズ標識mEos抗体)

[関連]Nano-Trap(ナノトラップ)一覧

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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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