記事ID ： 10157

NFκBパスウェイ解析のための新規セルベーススクリーニングアッセイ PathHunter® IκB Functional Assay
DiscoverX社；NFκBパスウェイ解析のための新規セルベーススクリーニングアッセイ

DiscoverX社；NFκBパスウェイ解析のための新規セルベーススクリーニングアッセイ" data-hatena-bookmark-layout="standard-balloon" data-hatena-bookmark-lang="ja" title="このエントリーをはてなブックマークに追加">

メーカー名：Eurofins DiscoverX Corporation

特長

・ NFκB活性化の評価およびNFkB上流のシグナル伝達経路阻害剤のスクリーニング

・ IκB分解を測定するセルベースの化学発光アッセイ

・試薬を添加するだけのシンプル操作

・ HTSに対応可能なホモジニアスアッセイ

Nuclear factor-κB (NF-κB)は、炎症応答や免疫応答において中心的な役割を担う、高度に制御された転写因子ファミリーです。通常は、IκBと複合体を形成して細胞質に局在しています。NFκB パスウェイは、TNF-α、IL-1、T細胞およびB細胞から産生される分裂促進因子、リポ多糖(LPS)、またウイルスタンパク質等の様々な刺激によって活性化し、シグナル伝達が起こります。上記刺激に対する受容体など、上流からのシグナル伝達により活性化されたIKKは、IκBをリン酸化し、リン酸化されたIκBはNF-κBから遊離して、細胞内のタンパク質分解系により分解されます。

アッセイ原理

EFC（Enzyme Fragment Complementation）技術の原理

PathHunte® Pathway Assayでは、DiscoverX社独自のEFC技術（Enzyme Fragment Complementation）を用いております。
本アッセイでは、ED(ProLabel)を付加したIκBを細胞内に発現させております。EAを含むProLabel Detection Kit を使用して、再構成された活性型β-ガラクトシダーゼの酵素活性依存的なシグナルを検出し、IκBの分解量を測定します。EFC技術を用いる事によりレポーターアッセイのような長時間のインキュベーションは不要です。

商品ラインナップ

《安定発現細胞株及び検出試薬》

継代可能な安定発現細胞株は大規模なプロファイリングやスクリーニングに最適です。
ホスト細胞は、HEK、U2OS、THP-1をご用意しております。

PRODUCT DESCRIPTION	ASSAY MEASURES
PathHunter® HEK 293 IκB Degradation Cell Line	IκBの分解
PathHunter® U2OS IκB Degradation Cell Line
PathHunter® THP-1 IκB Degradation Cell Line
PathHunter™ ProLabel Detection Kit （EDが含まれております）	検出用試薬