血清、血漿中のコロナウイルススパイクタンパク質抗体を検出 ヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG 抗体測定ELISAキット

ヒト血清、血漿中の Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG 抗体（ヒトコロナウイルススパイクタンパク質に対するヒトIgG抗体）を定量的に測定するELISAキット（間接ELISA法）です。

本キットは、新型コロナウイルス感染症（COVID-19）の原因となるSARSコロナウイルス2（SARS-CoV-2）におけるスパイクタンパク質（Spike glycoprotein、S glycoprotein、Sタンパク質、S-protein RBD（Receptor-binding domain）、スパイク（S）タンパク質）に対するヒト抗体（IgG）を定量的に測定します。スパイクタンパク質（S-RBD protein）コート済みの96ウェルプレート（ストリップウェルタイプ）、スタンダード、HRP標識抗ヒトIgG抗体、バッファー類が付属します。

本商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）とは?

コロナウィルスのスパイク糖タンパク質（Spike glycoprotein、S glycoprotein、Sタンパク質、S-protein RBD（Receptor-binding domain）、スパイク（S）タンパク質）は、新たな疾患である「COVID-19」の診断と治療の両面において、有望な標的として研究されています。スパイクタンパク質は、全てのヒトコロナウイルスで「コロナ」（ラテン語で冠の意味、英語 crown）を出現させる、I型糖タンパク質です。これは、ウイルスと宿主細胞との相互作用において、特に重要な役割を果たします。スパイクタンパク質は、特異的な細胞受容体に結合して、ウイルスと細胞の融合を可能にするコンホメーション変化を起こします。これまでの研究により、SARS-CoV-2のスパイクタンパク質の受容体結合ドメイン（RBD：Receptor-binding domain、S-protein RBD）は、ACE2（Angiotensin-converting enzyme 2、アンジオテンシン変換酵素II）と強く相互作用することが示されています。スパイクタンパク質のRBD（S-RBD protein）は、抗体のエピトープとなり得ます。スパイクタンパク質（S-RBD protein）は、配列保存性と免疫原性が高いため、コロナウイルスの診断ツールとして、スパイクタンパク質（S-RBD protein）を選択して応用する研究が進められています。COVID-19抗体は、SARS-CoV-2への曝露後に宿主免疫系によって産生され得ます。IgGおよびIgM抗体は、それぞれ免疫グロブリンG（イムノグロブリンG）および免疫グロブリンM（イムノグロブリンM）としても知られており、脊椎動物の免疫系によって産生される抗体アイソタイプの1つです。本ELISAキットは、SARS-CoV-2の「スパイクタンパク質（S-RBD protein）」でコートされたELISAプレートを含みます。血清試料中のCOVID-19 スパイクタンパク質（S-RBD protein）に対するIgG/IgM抗体は、コートされたスパイクタンパク質（S-RBD protein）に結合します。

■ 測定原理

本製品（品番：KE30003）は、ヒト血清および血漿中のヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG 抗体（ヒトコロナウイルススパイクタンパク質に対するヒトIgG抗体）を検出および測定するためのELISAキットです。間接ELISA法を測定原理として利用しています。96ウェルプレートには、SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）の組換えタンパク質（リコンビナントタンパク質）がコートされており、ヒト血清/血漿サンプルまたはスタンダード（標準液）をウェルに添加し、インキュベーションします。ウェルを洗浄後、HRP（ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ）で標識された抗ヒトIgG抗体を各ウェルに加えて『［SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）の組換えタンパク質］-［ヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG抗体］-［HRP標識抗ヒトIgG抗体］』複合体を形成させます。さらにウェルを洗浄後、TMB（テトラメチルベンジジン）試薬を加えて発色させます。硫酸を含む反応停止溶液を加えて発色を停止し、補正波長である630nm、および450nmのシグナルを測定します。SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）の組換えタンパク質に結合したヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG 抗体量に比例した色の強度を得ることができます。

図1　ヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG 抗体測定ELISAキット（品番：KE30003）の原理

• ［関連］COVID-19（SARS-CoV-2）研究関連キット
  - 『Proteintech（プロテインテック）社 ELISAキットのご紹介』ページ内表へリンク

• SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）の組換えタンパク質コート済み 96 well マイクロプレート（8 wells x 12 ストリップ）：1 plate
• 凍結乾燥スタンダード：1 bottle
• HRP標識抗ヒトIgG抗体（検出抗体）（100X）- 120 µL/vial：1 vial
• サンプル希釈液 - 30 mL/bottle：2 bottles
• 検出抗体希釈液 - 30 mL/bottle：1 bottle
• 濃縮洗浄バッファー（20X）- 30 mL/bottle：1 bottle
• TMB 基質 - 12 mL/bottle：1 bottle
• 反応停止液 - 12 mL/bottle：1 bottle
• プレートカバーシール：2 pieces

［保存温度］：当社からは冷凍品（-20℃）としてお届けします。到着後は冷凍（-20℃）または冷蔵（4℃）で保管してください。
［有効期間］：キット有効期間（保証期間）は、商品到着後、冷凍（-20℃）条件下で12か月間、冷蔵（4℃）条件下で6か月間です。
［その他］：毒物及び劇物取締法、化管法に該当する危険有害成分は含まれておりません。なお、安衛法「表示、通知すべき有害物」に該当する9.8%硫酸を反応停止液（Stop Solution）中に含みます。

■ 測定手順

1. スタンダードまたはサンプルを100µL添加し、ウェルをカバーして、室温（25℃）で30分間インキュベーションします。
2. 洗浄を4回行います。
3. HRP標識抗ヒトIgG抗体（検出抗体）（1x希釈）を100µL添加し、ウェルをカバーして、室温（25℃）で30分間インキュベーションします。
4. 洗浄を4回行います。
5. TMB基質を100µL添加し、ウェルをカバーして、室温（25℃）で10-15分間インキュベーションします。
6. 洗浄は行わず、反応停止液を100µL添加します。
7. 直ちに、プレートリーダーで450nmおよび630nmのシグナルを検出します。

図2　スタンダードカーブ

• ヒト Anti-SARS-CoV-2 N protein IgG 抗体測定ELISAキット

• ヒト Anti-SARS-CoV-2 N protein IgM 抗体測定ELISAキット
• ヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgM 抗体測定ELISAキット

• ヒト Anti SARS-CoV-2 N protein トータル抗体（IgG and IgM）測定ELISAキット
• ヒト Anti SARS-CoV-2 S-RBD protein トータル抗体（IgG and IgM）測定ELISAキット

• SARS-CoV-2 N protein 測定ELISAキット

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