血清、血漿中のコロナウイルススパイクタンパク質に対する総抗体を検出 ヒト Anti SARS-CoV-2 S-RBD protein トータル抗体（IgG and IgM）測定ELISAキット

ヒト血清、血漿中の ヒト Anti SARS-CoV-2 S-RBD protein トータル IgG+IgM 抗体（ヒトコロナウイルススパイクタンパク質 IgG+IgM 抗体）を半定量的に測定するELISAキット（IgG/IgMキャプチャーELISA法）です。

本キットは、新型コロナウイルス感染症（COVID-19）の原因となるSARSコロナウイルス2（SARS-CoV-2）におけるスパイクタンパク質（Spike glycoprotein、S glycoprotein、Sタンパク質、S-protein RBD（Receptor-binding domain）、スパイク（S）タンパク質）に対するヒト抗体（IgG+IgM）を測定します。抗ヒトIgGおよび抗ヒトIgM抗体コート済みの96ウェルプレート（ストリップウェルタイプ）、スタンダード、HRP標識スパイクタンパク質（S-RBD protein）、バッファー類が付属します。

本商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）とは?

コロナウィルスのスパイク糖タンパク質（Spike glycoprotein、S glycoprotein、Sタンパク質、S-protein RBD（Receptor-binding domain）、スパイク（S）タンパク質）は、新たな疾患である「COVID-19」の診断と治療の両面において、有望な標的として研究されています。スパイクタンパク質は、全てのヒトコロナウイルスで「コロナ」（ラテン語で冠の意味、英語 crown）を出現させる、I型糖タンパク質です。これは、ウイルスと宿主細胞との相互作用において、特に重要な役割を果たします。スパイクタンパク質は、特異的な細胞受容体に結合して、ウイルスと細胞の融合を可能にするコンホメーション変化を起こします。これまでの研究により、SARS-CoV-2のスパイクタンパク質の受容体結合ドメイン（RBD：Receptor-binding domain、S-protein RBD）は、ACE2（Angiotensin-converting enzyme 2、アンジオテンシン変換酵素II）と強く相互作用することが示されています。スパイクタンパク質のRBD（S-RBD protein）は、抗体のエピトープとなり得ます。スパイクタンパク質（S-RBD protein）は、配列保存性と免疫原性が高いため、コロナウイルスの診断ツールとして、スパイクタンパク質（S-RBD protein）を選択して応用する研究が進められています。COVID-19抗体は、SARS-CoV-2への曝露後に宿主免疫系によって産生され得ます。IgGおよびIgM抗体は、それぞれ免疫グロブリンG（イムノグロブリンG）および免疫グロブリンM（イムノグロブリンM）としても知られており、脊椎動物の免疫系によって産生される抗体アイソタイプの1つです。

■ 測定原理

本製品（品番：KE30006）は、ヒト血清および血漿中のヒト Anti SARS-CoV-2 S-RBD protein トータル IgG+IgM 抗体（ヒトコロナウイルススパイクタンパク質 IgG+IgM 抗体）を検出および測定するためのELISAキットです。キャプチャーELISA法を測定原理として利用しています。96ウェルプレートには、抗ヒトIgGおよび抗ヒトIgM抗体がコートされており、ヒト血清/血漿サンプルまたはスタンダード（標準液）をウェルに添加し、インキュベーションします。ウェルを洗浄後、HRP（ホースラディッシュ・ペルオキシダーゼ）で標識されたSARS-CoV-2 S-RBD protein 組換えタンパク質（リコンビナントタンパク質）を各ウェルに加えて『［抗ヒトIgGおよびIgM抗体］-［サンプル中のヒトIgGおよびIgM抗体］-［HRP標識SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）の組換えタンパク質］』複合体を形成させます。さらにウェルを洗浄後、TMB（テトラメチルベンジジン）試薬を加えて発色させます。硫酸を含む反応停止溶液を加えて発色を停止し、補正波長である630nm、および450nmのシグナルを測定します。抗ヒトIgGおよび抗ヒトIgM抗体によってキャプチャーされたヒト IgG+IgM 抗体の内、ヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG+IgM 抗体の総量に比例した色の強度を得ることができます。

図1　ヒト Anti SARS-CoV-2 S-RBD protein トータル抗体（IgG and IgM）測定ELISAキット（品番：KE30006）の原理

• ［関連］COVID-19（SARS-CoV-2）研究関連キット
  - 『Proteintech（プロテインテック）社 ELISAキットのご紹介』ページ内表へリンク

• 抗ヒトIgGおよび抗ヒトIgM抗体コート済み 96 well マイクロプレート（8 wells x 12 ストリップ）：1 plate
• 凍結乾燥スタンダード：1 bottle
• HRP標識SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）の組換えタンパク質（100X）- 120 µL/vial：1 vial
• サンプル希釈液 - 30 mL/bottle：2 bottles
• 検出抗体希釈液 - 30 mL/bottle：1 bottle
• 濃縮洗浄バッファー（20X）- 30 mL/bottle：1 bottle
• TMB 基質 - 12 mL/bottle：1 bottle
• 反応停止液 - 12 mL/bottle：1 bottle
• プレートカバーシール：2 pieces

［保存温度］：当社からは冷凍品（-20℃）としてお届けします。到着後は冷凍（-20℃）または冷蔵（4℃）で保管してください。
［有効期間］：キット有効期間（保証期間）は、商品到着後、冷凍（-20℃）条件下で12か月間、冷蔵（4℃）条件下で6か月間です。
［その他］：毒物及び劇物取締法、化管法に該当する危険有害成分は含まれておりません。なお、安衛法「表示、通知すべき有害物」に該当する9.8%硫酸を反応停止液（Stop Solution）中に含みます。

■ 測定手順

1. スタンダードまたはサンプルを100µL添加し、ウェルをカバーして、室温（25℃）で30分間インキュベーションします。
2. 洗浄を4回行います。
3. HRP標識SARS-CoV-2 スパイクタンパク質（S-RBD protein）の組換えタンパク質（1x希釈）を100µL添加し、ウェルをカバーして、室温（25℃）で30分間インキュベーションします。
4. 洗浄を4回行います。
5. TMB基質を100µL添加し、ウェルをカバーして、室温（25℃）で10-15分間インキュベーションします。
6. 洗浄は行わず、反応停止液を100µL添加します。
7. 直ちに、プレートリーダーで450nmおよび630nmのシグナルを検出します。

図2　スタンダードカーブ

• ヒト Anti SARS-CoV-2 N protein トータル抗体（IgG and IgM）測定ELISAキット

• ヒト Anti-SARS-CoV-2 N protein IgG 抗体測定ELISAキット
• ヒト Anti-SARS-CoV-2 S-RBD protein IgG 抗体測定ELISAキット

• ヒト Anti-SARS-CoV-2 N protein IgM 抗体測定ELISAキット
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• SARS-CoV-2 N protein 測定ELISAキット

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