記事ID ： 46374

ヒスタグタンパク質の高効率かつ特異的な精製・免疫沈降（IP）に最適 His Fab-Trap® Agarose（アガロースビーズ標識Hisタグ抗体）

メーカー名：Proteintech Group, Inc.

His Fab-Trap® Agarose（His-Fabトラップ®アガロース）は、Hisタグ融合タンパク質の単離・精製・免疫沈降（IP：Immunoprecipitation）実験に最適なアガロースビーズ担体結合済みのHisタグ抗体です。

アガロースビーズ（Agarose Beads）には、Hisタグ配列を特異的に認識する「抗Hisタグ組換えモノクローナル抗体（Fab領域）」が結合しています。

各種担体ビーズの選び方についてはこちらをご覧ください。

高親和性&高特異性組換えFab抗体免疫沈降（IP）に最適

サンプルのお申し込み

背景

■ Proteintech Group（プロテインテック）とは?

Proteintech Group, Inc.（プロテインテック）社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン（www.ptglab.co.jp 外部リンク）が担当しています。

全てオリジナル商品：自社ラボで製造、検証済み（購入後1年間の交換保証付き）
数多くの評判：国内・海外における累計130,300報以上の論文使用実績（2025年4月現在）
迅速な納期：約20,000品目を当社倉庫に国内在庫！

＼新年度スタートを応援！キャンペーン開催中／

［最大25%オフ★人気抗体がまとめてお得！］PRIME BUY抗体特割キャンペーンキャンペーン中

［日頃のご愛顧に感謝を込めて♪もれなく進呈］春の特典キャンペーン2025 キャンペーン中

プロテインテックは「世界で評価されている抗体サプライヤー」

プロテインテックは、引用数ランキング付き抗体検索サイトを運営する英国の「CiteAb 外部リンク」が主催する「2025 CiteAb Awards」において「Researchers' choice（研究者の選択）」部門および「Educational Resource of the Year（今年の教育リソース）」部門の受賞者として選出されました。優れた品質と製品ラインアップに加え、カスタマーサービスや教育コンテンツが高く評価されています。

以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

［新製品のご案内］『MultiPro™（マルチプロ）』シングルセル解析用オリゴヌクレオチド標識抗体

特長

■ His Fab-Trap® Agarose（アガロースビーズ標識Hisタグ抗体）
商品名	His Fab-Trap® Agarose（His-Fabトラップ®アガロース）（Fab-Trap anti-His, recombinant Fab, coupled to agarose beads）（アガロースビーズ標識組換え抗Hisタグ抗体）
品番	hfa-10/hfa-20/hfa-100
免疫原	Hisタグ
交差種	-
特異性	His-tag sequence
アプリケーション	IP（免疫沈降）、CoIP（共免疫沈降）
標識	アガロースビーズ（Agarose Beads）
宿主動物/免疫動物	マウス（組換えモノクローナルFab抗体）
クローン番号	-
抗体タイプ	マウス由来組換えFab抗体（Recombinant Fab fragment of monoclonal mouse Ig）
抗体親和性（KD値）	10 nM for a C-terminal His-tag and 220 nM for a N-terminal His-tag
結合キャパシティ	25 µg of recombinant His-tagged protein (~30kDa) per 25 µL bead slurry
容量	250 µL (10 reactions)/500 µL (20 reactions)/2.5 mL (100 reactions)
フォーマット	液体（slurry）
ビーズ詳細	Bead size: ~ 90 µm (cross-linked 4 % agarose beads)
洗浄バッファー適合性	2 M NaCl, 5 mM DTT, 5 mM β-mercaptoethanol, 5 mM TCEP, 2% NP40, 2% Triton X-100, 0.1% SDS, 5 M Urea
溶出方法	-2x SDS-sample buffer (Laemmli) -200 mM glycine pH 2.5 -100 µM His-Peptide
別名	-
バッファー・保存剤	PBS pH 7.4. Preservative: 0.09% sodium azide
保存方法	商品到着後は、4℃で保管してください。凍結はしないよう注意してください（凍結禁止）。

その他

■ His Fab-Trap® アプリケーション参考資料

［プロトコール］His Fab-Trap Agarose
［プロトコール］His Fab-Trap Agarose Kit

よくある質問 FAQ

【01】N末端またはC末端の融合タグを使用する必要がありますか？

His Fab-Trap®は、タンパク質のN末端／C末端に加えて、タンパク質内部に融合したタグも認識します。しかし、C末端Hisタグ融合体に対する親和性が最も高く、解離定数（KD）は10 nM、N末端Hisタグ融合体に対する解離定数（KD）は220 nMです。

【02】非特異的タンパク質の結合を回避する方法はありますか?

必要に応じて、サンプルの「プレクリア処理（Pre-clearing）」を実施してください。その際、コントロールアガロース（品番：bab-20）またはコントロール磁性アガロース（品番：bmab-20）を利用できます。詳細は以下のトラブルシューティングガイドをご覧ください。

［参考資料］免疫沈降（IP）と共免疫沈降（Co-IP）のトラブルシューティングガイド

【03】免疫沈降に必要な哺乳類細胞数を教えてください。

1回の免疫沈降反応で約10^6~10^7の哺乳類細胞の使用をおすすめします。収量は目的のタンパク質や相互作用因子の発現レベルに依存する場合があります。

【04】免疫沈降に必要な細胞抽出物量を教えてください。

哺乳類細胞以外の場合、0.5~1.0 mgの細胞抽出物の使用をおすすめします。

【05】質量分析のために、結合タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

免疫沈降後にビーズ上で直接消化する方法も利用可能です。より迅速で効率的なサンプル前処理と高収率を実現します。詳細は以下の資料をご覧ください。

［参考アプリケーション］MS解析用On-bead digestプロトコール

【06】酵素アッセイのために目的タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

いいえ、活性中心がブロックされていない限り、直接酵素アッセイが可能です。詳細は以下の資料をご覧ください。

［参考アプリケーション］ワンステップ精製：GFPタグ融合タンパク質の酵素活性検出

【07】1回の免疫沈降に必要なFab-Trap量を教えてください。

親和性が非常に高いため、1回の反応あたり25 µL（Fab-Trap slurry量）で十分です。

【08】各担体ビーズ（アガロース、磁性アガロース、磁気ビーズ）の違いを教えてください。

各ビーズの特性（表1）に基づいて以下のように推奨します。

アガロースビーズ（Agarose）：非常に低いバックグラウンドおよび高い結合能を必要とするIPに最適
磁性アガロースビーズ（Magnetic Agarose）：磁気分離および高い結合能を必要とするIPに最適
磁気ビーズ（Magnetic Particles M-270）：磁気分離および非常に大きなタンパク質を対象とするIPに最適

表1. His Fab-Trap® 各種ビーズの特性
His Fab-Trap® 結合担体	アガロース	磁性アガロース	磁気ビーズ
ビーズ詳細	アガロース（4% cross-linked）	磁性アガロース（6% cross-linked）	磁気ビーズ M-270
ビーズ形状	多孔質	多孔質、鉄コア	固体
結合抗体	抗Hisタグ組換えモノクローナルVHH抗体
分離可能なタンパク質サイズ*	小～大（<200 kDa）		小～大（<200 kDa）特大（>200 kDa）
ビーズ外観	白	黒	茶
ビーズサイズ	90 µm	40 µm	2.8 µm
結合能（10 µLあたり）	25 µg	10 µg	1 µg
バックグラウンド	非常に低い	低い
磁気分離/自動化	No	Yes
最大遠心力（x g）	2,500 x g	800 x g	8,000 x g

*タンパク質のサイズ、形状、多量体/複合体、相互作用因子に依存します。

使用例

■ His Fab-Trap® Agarose（アガロースビーズ標識Hisタグ抗体）（品番：hfa-10/-20/-100）

His Fab-Trap® Agarose（品番：hfa）を用いた免疫沈降実験後のTOM70タンパク質のウェスタンブロット画像

図1
トランスフェクションを実施していないHEK293T細胞（コントロール）およびN末端Hisタグ融合TOM70（His-TOM70）またはC末端Hisタグ融合TOM70タンパク質（TOM70-His）のいずれかをトランスフェクションしたHEK293T細胞を用いてHis Fab-Trap® Agarose（品番：hfa）で免疫沈降（IP）を実施した。インプット画分（I）、フロースルー画分（F）、および結合画分（B）に対して、Anti-TOM70 Polyclonal Antibody（品番：14528-1-AP）およびCoraLite® Plus 488標識アルパカ由来抗ウサギIgG（品番：srb2GCL488-1）を用いてウエスタンブロット（WB）を実施した。

His Fab-Trap® Agarose（品番：hfa）を用いて、トランスフェクションしたHEK293T細胞からAurKinB-His融合タンパク質とその相互作用パートナーを共免疫沈降（Co-IP）し、Hisタグ、CDC37、HSP90AB1を特異的抗体で検出した多重ウエスタンブロット画像

図2
トランスフェクションを実施していないHEK293T細胞（コントロール）とトランスフェクションを実施したHEK293T細胞を用いてHis Fab-Trap® Agarose（品番：hfa）でAurKinB-Hisタグ融合タンパク質とその相互作用パートナーの共免疫沈降（Co-IP）を行った。インプット画分（I）、フロースルー画分（F）、結合画分（B）に対して、多重蛍光ウェスタンブロット実施した。検出にはFlexAble CoraLite® Plus 647 Kit for Mouse IgG（品番：KFA023）で標識したHis-tagモノクローナル抗体（品番：66005-1-Ig。FlexAble CoraLite® Plus 750 Kit for Mouse IgG2a（品番：KFA044）で標識したCDC37モノクローナル抗体（品番：66420-1-Ig）、FlexAble CoraLite Plus 488 Kit for Mouse IgG2b（品番：KFA061）で標識したHSP90AB1モノクローナル抗体（品番：67450-1-Ig）を使用した。

His Fab-Trap Agarose（品番：hfa）を用いて、トランスフェクションしたHEK293T細胞からGFP-His融合タンパク質を免疫沈降し、His-Peptide（品番：hp）を用いた2段階の溶出を実施。各画分（入力・フロースルー・溶出1・溶出2・残渣）を分析。

図3
GFP-Hisタグ融合タンパク質を発現させたHEK293T細胞を用いてHis Fab-Trap® Agarose（品番：hfa）で免疫沈降（IP）を実施した。免疫沈降後、His-Peptide（品番：hp）を用いて2回に分けて溶出を実施した。画像内の各サンプルの表記は、インプット画分（I）、フロースルー画分（F）、1回目の溶出サンプル（E1）、2回目の溶出サンプル（E2）、残渣（R）を示した。

■ 全ての評価データはこちらから閲覧できます

His Fab-Trap® Agarose（アガロースビーズ標識His抗体）（品番：hfa-10/-20/-100）検証データ

His Fab-Trap® Agarose（アガロースビーズ標識Hisタグ抗体）

■アガロースビーズ標識モノクローナル抗体（組換えHisタグ抗体）

品名	メーカー	品番	包装	希望販売価格
Anti His-Tag, Fab-Trap^(R), recombinant Fab, Agarose	PGI	HFA-10	10 RXN	￥53,000
Anti His-Tag, Fab-Trap^(R), recombinant Fab, Agarose	PGI	HFA-20	20 RXN	￥91,000
Anti His-Tag, Fab-Trap^(R), recombinant Fab, Agarose	PGI	HFA-100	100 RXN [5 x 20 rxns]	￥421,000
Anti His-Tag, Fab-Trap^(R), recombinant Fab, Agarose	PGI	HFA-200	200 RXN [10 x 20 rxns]	お問い合わせ
Anti His-Tag, Fab-Trap^(R), recombinant Fab, Agarose	PGI	HFA-400	400 RXN [20 x 20 rxns]	お問い合わせ