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記事ID : 45356
研究用

高い特異性と親和性!Nano-Secondary® アルパカ抗マウス免疫グロブリンG2a Alpaca anti-mouse IgG2a 抗体(CoraLite® Plus 555標識)

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Alpaca anti mouse IgG2a 抗体(Nano-Secondary® alpaca anti-mouse IgG2a, recombinant VHH, CoraLite® Plus 555)は、マウスIgG2a(mouse IgG2a)を検出するCoraLite® Plus 555 標識済みの二次抗体です。

アルパカ(Alpaca)を宿主動物(免疫動物)として作製された「組換えVHHモノクローナル抗体」(VHH:ラクダ科動物の「重鎖抗体」由来の抗原結合ドメイン、Nanobody® としても知られます)であり、高い特異性と親和性を示します。抗体サイズが小さく、高浸透性および高解像度の免疫蛍光染色を可能にします。

高親和性&高特異性アルパカ組換えVHH優れた浸透性&解像度

背景

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. 従来の1/10ほどの分子量
図. 従来の1/10ほどの分子量

■ Nano-Secondary®とは?

Nano-Secondary®(ナノ二次抗体)は、蛍光色素とアルパカ由来のVHH抗体からなる、動物種/抗体サブタイプ特異的な二次抗体です。従来のモノクローナル抗体やポリクローナル抗体とは異なり、無血清発現系を用いた組換え抗体として安定的に産生されます。また、開発過程で他種由来IgGや血清タンパク質との交差反応性を検証したクローンを選別しており、予備吸着不要で高い特異性と低バックグラウンドを示します。

図. Nano-Secondary® と従来のポリクローナル二次抗体の比較<br>(左)Nano-Secondary®(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(サイズが小さく、エピトープに対して標識物質がより近接した正確な複合体を形成)。<br>(右)従来のポリクローナル二次抗体(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(大規模であり、任意性のある複合体を形成)。
図. Nano-Secondary® と従来のポリクローナル二次抗体の比較
(左)Nano-Secondary®(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(サイズが小さく、エピトープに対して標識物質がより近接した正確な複合体を形成)。
(右)従来のポリクローナル二次抗体(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(大規模であり、任意性のある複合体を形成)。

抗体サイズが小さいため、高浸透性かつ高解像なイメージングに寄与し、免疫蛍光染色(IF)を中心としたアプリケーションに利用できます。

  • IF(免疫蛍光染色)
  • 超解像顕微鏡観察(SRM:Super-resolution microscopy)
  • WB(ウェスタンブロット)
  • FC(フローサイトメトリー)

また、Nano-Secondary®は、免疫蛍光染色(IF)やウェスタンブロット(WB)でワンステップ染色』(一次抗体と二次抗体(Nano-Secondary®)を同時にインキュベーションする方法)にも対応しています(参考プロトコール参照)。一価のVHH二次抗体は、小サイズでかつ高い特異性と親和性を示すため、従来の二価の二次抗体と異なり、一次抗体のエピトープに対するアクセス性や細胞内への浸透性を妨げる大きなクラスター(複合体)を形成しません。

■ Proteintech Group(プロテインテック)とは?

Proteintech Group, Inc.(プロテインテック)社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン(www.ptglab.co.jp 外部リンク)が担当しています。

  • 全てオリジナル商品:自社ラボで製造、検証済み(購入後1年間の交換保証付き)
  • 数多くの評判:国内・海外における累計122,300報以上の論文使用実績(2024年11月現在)
  • 迅速な納期:約17,000品目を当社倉庫に国内在庫!
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プロテインテックは「日本で成長している抗体サプライヤー」

プロテインテックとChromoTek(クロモテック、ドイツ)は、引用数ランキング付の抗体検索サイトを運営する英国「CiteAb 外部リンク」が主催の「2022 CiteAb Awards」において「Researchers' choice(研究者の選択)外部リンク」部門と「Environmental Initiative of the Year(今年の環境イニシアチブ)外部リンク」部門でそれぞれ受賞者として選出されました。優れた品質およびカスタマーサービス、環境への取り組みが高く評価されています。

また「Which suppliers should you watch in the Japanese antibody market?(日本の抗体市場で注目すべきサプライヤーは?)外部リンク」のブログ記事で、近年発表された論文中の製品引用数を根拠にプロテインテックが「日本で成長している抗体サプライヤー」として「注目に値するシェアの拡大・急上昇」を見せていると言及されています。以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

 

特長

■ Anti-mouse IgG2a 抗体(CoraLite® Plus 555標識)
商品名Alpaca anti mouse IgG2a抗体
(Nano-Secondary® alpaca anti-mouse IgG2a, recombinant VHH, CoraLite® Plus 555)
(アルパカ由来抗マウスIgG2aナノ二次抗体)
品番smsG2aCL488-1 -10/smsG2aCL488-1-100 外部リンク
免疫原精製マウスIgG2a
交差性マウスIgG2a
特異性マウスIgG2aのFcフラグメント
宿主動物/免疫動物アルパカ(組換えVHHモノクローナル抗体、バクテリア発現)
交差性交差動物種・交差サブクラス]マウス(IgG1、IgG2b、IgG2c、IgG3)、ウサギ、ラット、ヤギ、ヒツジ、モルモット、ヒト、マカクザル
クローン番号CTK0114
抗体タイプアルパカ由来シングルドメイン一価抗体
(Alpaca single domain antibodies, monovalent)
抗体親和性(KD値)KD <10 pM
容量10 µL/100 µL
フォーマット液体
アプリケーションIF(免疫蛍光染色)、WB(ウェスタンブロット)
標識(Ex/Em)CoraLite® Plus 555(554 nm/570 nm)
標識度
(Degree of labeling、DOL値)
2 fluorophores per Nanobody
精製方法リコンビナント抗体として発現および精製済み
別名Alpaca single domain antibody, VHH, Nanobody, binding domain of single domain antibody, Nano antibody
バッファー・保存剤10 mM HEPES pH 7.0, 500 mM NaCl, 5 mM EDTA, Preservative: 0.09 % Sodium azide
保存方法
  • 商品到着後は、-20℃(for short term) または -80℃(for long term)で保管してください。
  • 分注・小分けし、凍結融解の繰り返しを避けてください。
  • 抗体の有効期間(保証期間)は、到着後6か月間です。

その他

■ 組換えVHHモノクローナル抗体の結合特性・特異性(クローン:CTK0114)

クローンCTK0114のマウスIgG2a結合部位
図. クローンCTK0114のマウスIgG2a結合部位
Schematic representation of anti-mouse IgG2a Nano-Secondary binding to its target. Mouse IgG2a primary antibody (grey) is bound with two identical monoclonal mouse IgG2a Fc- specific Nanobody molecules (green). In total, 4 fluorophores (red stars) label the mouse IgG2a primary antibody.
クローンCTK0114のドットブロットによる各アイソタイプへの特異性
図. マウスIgG1、IgG2、IgG3への特異性
Dot-blot assay demonstrates that anti-mouse IgG2a Nano-Secondary is subclass-specific and does not cross-react with other mouse IgG subclasses including IgG1, IgG2b, IgG2c and IgG3.

■ アルパカ由来抗IgG2a抗体の高い親和性

図. 抗IgG2a抗体(アルパカ由来VHH抗体)の解離定数(KD)[Molar]
図. 抗IgG2a抗体(アルパカ由来VHH抗体)の解離定数(KD)[Molar]

使用例

■Anti-mouse IgG2a 抗体(CoraLite® Plus 555標識)(品番:smsG2aCL488-1-10/-100)

HeLa細胞とCoraLite Plus 555標識アルパカ抗マウス免疫グロブリンG2a二次抗体を用いたGLN3の免疫蛍光染色(IF)結果
図1
Immunofluorescence analysis of Hela cells stained with mouse IgG2a anti-GLN3 antibody (67169-1-Ig) and Nano-Secondary® alpaca anti-mouse IgG2a, recombinant VHH, CoraLite® Plus 555 (magenta). Nuclei were stained with DAPI (blue). Images were recorded at the Core Facility Bioimaging at the Biomedical Center, LMU Munich.
PBMCとCoraLite Plus 555標識アルパカ抗マウス免疫グロブリンG2a二次抗体を用いたCD3のフローサイトメトリー解析結果
図2
Flow cytometry analysis of 1X10^6 human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) stained with anti-human CD3 (clone OKT3, 65133-1-Ig) and Nano-Secondary® alpaca anti-mouse IgG2a, recombinant VHH, CoraLite® Plus 555.

蛍光スペクトルビューアー

■ CoraLite® Plus(コーラライトプラス)スペクトル

マルチプレックス(多重)染色にも有用な、各種CoraLite® Plus色素(コーラライトプラス:プロテインテックが提供する独自の蛍光色素)を標識したNano-Secondary®(ナノセカンダリー)二次抗体を提供しています。重複する蛍光スペクトル領域が最小限であり、それぞれの蛍光色素を同時に使用できます。以下に表示するプロテインテックの蛍光スペクトルビューアーは、Fluorofinder 外部リンク のプラットフォームを搭載しており、多重免疫蛍光染色等の実験のデザインに活用できます。

Alpaca anti-mouse IgG2a 抗体(CoraLite® Plus 555標識)

■ アルパカ由来の抗マウスIgG2a抗体(CoraLite® Plus 555 標識、組換えVHHモノクローナル抗体)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 555, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL555-1-10 10 UL
¥21,000
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 555, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL555-1-100 100 UL
¥75,000

※ 国内在庫[あり/なし]の最新状況は、↑  品名  クリック先ページ  当社在庫  の表示をご確認ください。タイミングによって[入荷予定あり/当社在庫なし]の場合があります。

[関連]Alpaca anti-mouse IgG2a 抗体(各種標識)

■ アルパカ由来の「抗マウスIgG2a抗体」のその他の蛍光色素標識製品も取り揃えています。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 488, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL488-1-10 10 UL
¥21,000
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 488, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL488-1-100 100 UL
¥75,000
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 647, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL647-1-10 10 UL
¥21,000
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 647, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL647-1-100 100 UL
¥75,000
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 750, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL750-1-10 10 UL
¥21,000
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) CoraLite(R) 750, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACL750-1-100 100 UL
¥75,000

※ 国内在庫[あり/なし]の最新状況は、↑  品名  クリック先ページ  当社在庫  の表示をご確認ください。タイミングによって[入荷予定あり/当社在庫なし]の場合があります。

[関連]未標識 Nano-Secondary®(ナノセカンダリー)

未標識のナノ二次抗体(VHH)です。VHHのシステイン残基(チオール基を含む)にマレイミド活性化蛍光体をご自身で結合することができます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti IgG2a Fc-specific, recombinant VHH, for 2xCys conjugation, Mouse (Alpaca) Unlabeled, CTK0114詳細データ PGI SMSG2ACYS2-1-500 500 UG
¥139,000

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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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