商品情報

記事ID : 41366
研究用

高い特異性と親和性!Nano-Secondary® アルパカ抗ウサギ/ヒト免疫グロブリンG Anti-rabbit/human IgG 抗体(Alexa Fluor® 568標識)

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Alpaca anti rabbit/human IgG 抗体(Nano-Secondary® alpaca anti-rabbit/human IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor® 568)は、ウサギIgGおよびヒトIgG(rabbit/human IgG)を検出するAlexa Fluor® 568 標識済みの二次抗体です。

アルパカ(Alpaca)を宿主動物(免疫動物)として作製された「組換えVHHモノクローナル抗体」(VHH:ラクダ科動物の「重鎖抗体」由来の抗原結合ドメイン、Nanobody® としても知られます)であり、高い特異性と親和性を示します。抗体サイズが小さく、高浸透性および高解像度の免疫蛍光染色を可能にします。

高親和性&高特異性アルパカ組換えVHH優れた浸透性&解像度

背景

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. 従来の1/10ほどの分子量
図. 従来の1/10ほどの分子量
 

■ Nano-Secondary®とは?

Nano-Secondary®(ナノ二次抗体)は、蛍光色素とアルパカ由来のVHH抗体からなる、動物種/抗体サブタイプ特異的な二次抗体です。従来のモノクローナル抗体やポリクローナル抗体とは異なり、無血清発現系を用いた組換え抗体として安定的に産生されます。また、開発過程で他種由来IgGや血清タンパク質との交差反応性を検証したクローンを選別しており、予備吸着不要で高い特異性と低バックグラウンドを示します。

図. Nano-Secondary® と従来のポリクローナル二次抗体の比較<br />(左)Nano-Secondary®(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(サイズが小さく、エピトープに対して標識物質がより近接した正確な複合体を形成)。<br />(右)従来のポリクローナル二次抗体(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(大規模であり、任意性のある複合体を形成)。
図. Nano-Secondary® と従来のポリクローナル二次抗体の比較
(左)Nano-Secondary®(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(サイズが小さく、エピトープに対して標識物質がより近接した正確な複合体を形成)。
(右)従来のポリクローナル二次抗体(緑色)と一次抗体(灰色)の複合体形成(大規模であり、任意性のある複合体を形成)。

抗体サイズが小さいため、高浸透性かつ高解像なイメージングに寄与し、免疫蛍光染色(IF)を中心としたアプリケーションに利用できます。

  • IF(免疫蛍光染色)
  • 超解像顕微鏡観察(SRM:Super-resolution microscopy)
  • WB(ウェスタンブロット)
  • FC(フローサイトメトリー)

また、Nano-Secondary®は、免疫蛍光染色(IF)やウェスタンブロット(WB)でワンステップ染色』(一次抗体と二次抗体(Nano-Secondary®)を同時にインキュベーションする方法)にも対応しています(参考プロトコール参照)。一価のVHH二次抗体は、小サイズでかつ高い特異性と親和性を示すため、従来の二価の二次抗体と異なり、一次抗体のエピトープに対するアクセス性や細胞内への浸透性を妨げる大きなクラスター(複合体)を形成しません。

■ Proteintech Group(プロテインテック)とは?

Proteintech Group, Inc.(プロテインテック)社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン(www.ptglab.co.jp 外部リンク)が担当しています。

  • 全てオリジナル商品:自社ラボで製造、検証済み(購入後1年間の交換保証付き)
  • 数多くの評判:国内・海外における累計64,900報以上の論文使用実績(2022年3月現在)
  • 迅速な納期:約12,500品目を当社倉庫に国内在庫!

プロテインテックグループにChromoTek®(クロモテック)が加わりました!

旧ChromoTek社製品はプロテインテックがお届けします

主に『アルパカ抗体(組換えVHH)』の製造を行う旧ChromoTek®(クロモテック、ドイツ)社(www.chromotek.com 外部リンク)は、2020年10月よりProteintech Group(プロテインテック 、米国)ブランドの一部になりました。緑色蛍光タンパク質(GFP)の免疫沈降(IP)実験で3,030報以上の文献実績を有する GFP-Trap® をはじめ、アルパカ由来の組換えVHH抗体は、高い親和性、特異性、および安定性を発揮します。

特長

■ Anti-rabbit/human IgG 抗体(Alexa Fluor® 568標識)
商品名Alpaca anti rabbit/human IgG抗体
(Nano-Secondary® alpaca anti-rabbit/human IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor® 568)
(アルパカ由来抗ウサギ/ヒトIgGナノ二次抗体)
品番srbAF568-1-10/srbAF568-1-100 外部リンク
免疫原精製ウサギIgG
交差性ウサギIgG(ヒトIgGにも交差性有り)
特異性
  • ウサギIgGのFabフラグメントおよびFcフラグメント
  • ヒトIgG1, IgG2, IgG3, IgG4のFcフラグメント
宿主動物/免疫動物アルパカ(組換えVHHモノクローナル抗体、バクテリア発現)
交差性交差動物種・交差サブクラス]マウス、ラット、ヒツジ、ヤギ、モルモット
クローン番号CTK0101, CTK0102
(Mixture of 2 monoclonal Nanobodies [CTK0101], [CTK0102])
抗体タイプアルパカ由来シングルドメイン一価抗体
(Alpaca single domain antibodies, monovalent)
抗体親和性(KD値)CTK0101: KD = 0.2 nM, CTK0102: KD = 1.2 nM
容量10 µL/100 µL
フォーマット液体
アプリケーションIF(免疫蛍光染色)、WB(ウェスタンブロット)、FC(フローサイトメトリー)
標識Alexa Fluor® 568
標識度
(Degree of labeling、DOL値)
2 fluorophores per Nanobody
精製方法リコンビナント抗体として発現および精製済み
別名Alpaca single domain antibody, VHH, Nanobody, binding domain of single domain antibody, Nano antibody
バッファー・保存剤10 mM HEPES pH 7.0, 500 mM NaCl, 5 mM EDTA, Preservative: 0.09 % Sodium azide
保存方法
  • 商品到着後は、-20℃(for short term) または -80℃(for long term)で保管してください。
  • 分注・小分けし、凍結融解の繰り返しを避けてください。
  • 抗体の有効期間(保証期間)は、到着後6か月間です。

その他

■ 組換えVHHモノクローナル抗体の結合特性・特異性(クローン:CTK0101, CTK0102)

Well-defined and characterized immunostaining with Nano-Secondary alpaca anti-rabbit IgG: Primary anti-rabbit IgG antibody (grey) with 2 copies each of rabbit Fab- and Fc-specific monoclonal Nanobodies (green) bound. In total, 8 fluorophores (red stars) label the primary rabbit IgG antibody.
図. クローンCTK0101, CTK0102のウサギIgG結合部位
Well-defined and characterized immunostaining with Nano-Secondary alpaca anti-rabbit IgG: Primary anti-rabbit IgG antibody (grey) with 2 copies each of rabbit Fab- and Fc-specific monoclonal Nanobodies (green) bound. In total, 8 fluorophores (red stars) label the primary rabbit IgG antibody.
ChromoTek's Nano-Secondary alpaca anti-rabbit IgG is highly specific and binds only rabbit gamma immunoglobulins (IgG). In contrast, competitor A’s goat anti-rabbit IgG antibody shows unwanted cross-reactivity to mouse IgGs (red square) despite its pre-adsorption against mouse serum.
図. マウス、ラット、ウサギIgへの特異性(他社比較)
ChromoTek's Nano-Secondary alpaca anti-rabbit IgG is highly specific and binds only rabbit gamma immunoglobulins (IgG). In contrast, competitor A’s goat anti-rabbit IgG antibody shows unwanted cross-reactivity to mouse IgGs (red square) despite its pre-adsorption against mouse serum.
 
Well-defined and characterized immunostaining: Primary anti-human IgG antibody (grey) with 2 copies of human Fc-specific monoclonal Nanobodies (green), Nano-Secondary alpaca anti-human IgG, bound. In total, 4 fluorophores (red stars) label the primary human IgG antibody.
図. クローンCTK0101のヒトIgG結合部位
Well-defined and characterized immunostaining: Primary anti-human IgG antibody (grey) with 2 copies of human Fc-specific monoclonal Nanobodies (green), Nano-Secondary alpaca anti-human IgG, bound. In total, 4 fluorophores (red stars) label the primary human IgG antibody.
 

使用例

■Anti-rabbit/human IgG 抗体(Alexa Fluor® 568標識)(品番:srbAF568-1-10/-100)

Immunostaining of Ki67 in HeLa cells with rabbit anti-Ki67 antibodies and Nano-Secondary® alpaca anti-human IgG/anti-rabbit IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor®568 [CTK0101, CTK0102] 1:1,000 (red). Scale bar, 20 µm.
図1
Immunostaining of Ki67 in HeLa cells with rabbit anti-Ki67 antibodies and Nano-Secondary® alpaca anti-human IgG/anti-rabbit IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor®568 [CTK0101, CTK0102] 1:1,000 (red). Scale bar, 20 µm.
Western blot analysis of EGFP (EGFP-250, ChromoTek) added to HEK293T cell lysate.Detection with GFP antibody rabbit polyclonal [PABG1] (PABG1, ChromoTek) 1:1,000 and Nano-Secondary® alpaca anti-rabbit IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor® 568[CTK0101, CTK0102] 1:1,000.
図2
Western blot analysis of EGFP (EGFP-250, ChromoTek) added to HEK293T cell lysate.Detection with GFP antibody rabbit polyclonal [PABG1] (PABG1, ChromoTek) 1:1,000 and Nano-Secondary® alpaca anti-rabbit IgG, recombinant VHH, Alexa Fluor® 568[CTK0101, CTK0102] 1:1,000.
 
HeLa cells were immunostained with rabbit anti-Lamin B1 antibodies and Nano-Secondary alpaca anti-rabbit IgG Alexa Fluor® 568 (1:1,000). Confocal and gated STED images were acquired with a Leica TCS SP8 STED 3X microscope, pulsed depletion with a 775 nm laser. Images were recorded at the Core Facility Bioimaging at the Biomedical Center, LMU Munich.
図3
HeLa cells were immunostained with rabbit anti-Lamin B1 antibodies and Nano-Secondary alpaca anti-rabbit IgG Alexa Fluor® 568 (1:1,000). Confocal and gated STED images were acquired with a Leica TCS SP8 STED 3X microscope, pulsed depletion with a 775 nm laser. Images were recorded at the Core Facility Bioimaging at the Biomedical Center, LMU Munich.
 

Anti-rabbit/human IgG 抗体(Alexa Fluor® 568標識)

■ アルパカ由来の抗ウサギIgG抗体(ヒトIgGにも交差性有り)(Alexa Fluor® 568 標識、組換えVHHモノクローナル抗体)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti IgG, recombinant VHH, Rabbit (Alpaca) Alexa FluorTM 568, CTK0101, CTK0102詳細データ PGI SRBAF568-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG, recombinant VHH, Rabbit (Alpaca) Alexa FluorTM 568, CTK0101, CTK0102詳細データ PGI SRBAF568-1-100 100 UL
¥65,000

[関連]Anti-rabbit/human IgG 抗体(各種標識)

■ アルパカ由来の「抗ウサギIgG抗体(ヒトIgGにも交差性有り)」のその他の蛍光色素標識製品も取り揃えています。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti IgG, recombinant VHH, Rabbit (Alpaca) Alexa FluorTM 488, CTK0101, CTK0102詳細データ PGI SRBAF488-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG, recombinant VHH, Rabbit (Alpaca) Alexa FluorTM 488, CTK0101, CTK0102詳細データ PGI SRBAF488-1-100 100 UL
¥65,000
Anti IgG, recombinant VHH, Rabbit (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0101, CTK0102詳細データ PGI SRBAF647-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG, recombinant VHH, Rabbit (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0101, CTK0102詳細データ PGI SRBAF647-1-100 100 UL
¥65,000

[関連]Anti-mouse IgG1/IgG2b/IgG3 抗体(各種標識)

■ アルパカ由来の「抗マウスIgG1/IgG2b/IgG3サブクラス特異的二次抗体」の蛍光標識製品も取り揃えています。
特異性が高いため、ウサギ/ヒトIgGまたはマウスIgGサブクラスの異なる一次抗体同士を用いた「多重蛍光染色」や「多重蛍光ウェスタンブロット検出」等のマルチプレックス検出にも使用できます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 488, CTK0103, CTK0104詳細データ PGI SMS1AF488-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 488, CTK0103, CTK0104詳細データ PGI SMS1AF488-1-100 100 UL
¥65,000
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 568, CTK0103, CTK0104詳細データ PGI SMS1AF568-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 568, CTK0103, CTK0104詳細データ PGI SMS1AF568-1-100 100 UL
¥65,000
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0103, CTK0104詳細データ PGI SMS1AF647-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0103, CTK0104詳細データ PGI SMS1AF647-1-100 100 UL
¥65,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 488, CTK0105, CTK0106詳細データ PGI SMS2BAF488-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 488, CTK0105, CTK0106詳細データ PGI SMS2BAF488-1-100 100 UL
¥65,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 568, CTK0105, CTK0106詳細データ PGI SMS2BAF568-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 568, CTK0105, CTK0106詳細データ PGI SMS2BAF568-1-100 100 UL
¥65,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0105, CTK0106詳細データ PGI SMS2BAF647-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0105, CTK0106詳細データ PGI SMS2BAF647-1-100 100 UL
¥65,000
Anti IgG3 Fab-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0107詳細データ PGI SMS3AF647-1-10 10 UL
¥18,000
Anti IgG3 Fab-specific, recombinant VHH, Mouse (Alpaca) Alexa FluorTM 647, CTK0107詳細データ PGI SMS3AF647-1-100 100 UL
¥65,000

[関連]未標識 Nano-Secondary®(ナノセカンダリー)

未標識のナノ二次抗体(VHH)です。VHHのシステイン残基(チオール基を含む)にマレイミド活性化蛍光体をご自身で結合することができます。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti IgG Fc-specific, recombinant VHH, for 2xCys conjugation, Rabbit (Alpaca) , CTK0101 詳細データ PGI SRBGCYS2-1-500 500 UG
¥132,000
Anti IgG, recombinant VHH, for 2xCys conjugation, Rabbit (Alpaca) , CTK0102 詳細データ PGI SRBGCYS2-2-500 500 UG
¥132,000
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, for 2xCys conjugation, Mouse (Alpaca) , CTK0103 詳細データ PGI SMSG1CYS2-1-500 500 UG
¥132,000
Anti IgG1 Fc-specific, recombinant VHH, for 2xCys conjugation, Mouse (Alpaca) , CTK0104 詳細データ PGI SMSG1CYS2-2-500 500 UG
¥132,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, for 2xCys conjugation, Mouse (Alpaca) , CTK0105 詳細データ PGI SMSG2BCYS2-1-500 500 UG
¥132,000
Anti IgG2b Fc-specific, recombinant VHH, for 2xCys conjugation, Mouse (Alpaca) , CTK0106 詳細データ PGI SMSG2BCYS2-2-500 500 UG
¥132,000

[関連]Nano-Secondary®(ナノセカンダリー)一覧

[関連]プロテインテックの二次抗体まとめ

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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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