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研究用

高い浸透性!免疫細胞染色に最適、Nano-Label シリーズ Histone-Label®(蛍光標識ヒストン抗体)

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Histone-Label®(Histoneラベル®)は、Histoneタンパク質の免疫蛍光染色(IF:Immunofluorescence)実験に最適な蛍光色素標識済みのアルパカ由来Histone抗体です。

蛍光色素には、アルパカ(Alpaca)を宿主動物(免疫動物)として作製された「抗Histone組換えモノクローナルVHH抗体」が結合しています。VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインであり、高い特異性と親和性を示します。VHH抗体は、一般的の抗体よりもサイズが小さく浸透性が高いため、細胞染色に最適です。

高浸透性&高親和性アルパカ組換えVHH免疫蛍光染色(IF)に最適

背景

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. 従来の1/10ほどの分子量
図. 従来の1/10ほどの分子量
 

■ NanoBooster®/NanoLabel®とは?

Nano-Booster(ナノブースター)およびNano-Label(ナノラベル)は、蛍光タンパク質や細胞内タンパク質を標識する蛍光プローブです。蛍光色素(Alexa Fluor®またはAtto色素)に共有結合したVHH抗体で構成されます。抗体サイズが小さいため、高浸透性かつ高解像なイメージングに寄与し、免疫蛍光染色(IF)を中心としたアプリケーションに利用できます。

  • IF(免疫蛍光染色)/ ICC(免疫細胞化学)
  • IHC(免疫組織化学)
  • 超解像顕微鏡観察(SRM:Super-resolution microscopy)
図. Nano-Boosterの概要。GFP/RFP融合タンパク質の蛍光シグナルは、細胞固定後に減少します。GFP/RFP-Booster®は、蛍光シグナルの増幅に利用できます
図. Nano-Boosterの概要。
GFP/RFP融合タンパク質の蛍光シグナルは、細胞固定後に減少します。蛍光シグナルの増幅にGFP/RFP-Booster®を利用できます。

■ Proteintech Group(プロテインテック)とは?

Proteintech Group, Inc.(プロテインテック)社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン(www.ptglab.co.jp 外部リンク)が担当しています。

  • 全てオリジナル商品:自社ラボで製造、検証済み(購入後1年間の交換保証付き)
  • 数多くの評判:国内・海外における累計109,200報以上の論文使用実績(2024年6月現在)
  • 迅速な納期:約15,500品目を当社倉庫に国内在庫!
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プロテインテックは「日本で成長している抗体サプライヤー」

プロテインテックとChromoTek(クロモテック、ドイツ)は、引用数ランキング付の抗体検索サイトを運営する英国「CiteAb 外部リンク」が主催の「2022 CiteAb Awards」において「Researchers' choice(研究者の選択)外部リンク」部門と「Environmental Initiative of the Year(今年の環境イニシアチブ)外部リンク」部門でそれぞれ受賞者として選出されました。優れた品質およびカスタマーサービス、環境への取り組みが高く評価されています。

また「Which suppliers should you watch in the Japanese antibody market?(日本の抗体市場で注目すべきサプライヤーは?)外部リンク」のブログ記事で、近年発表された論文中の製品引用数を根拠にプロテインテックが「日本で成長している抗体サプライヤー」として「注目に値するシェアの拡大・急上昇」を見せていると言及されています。以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

 

特長

■ Histone-Label®(蛍光標識Histone抗体)
商品名Histone-Label®(Histoneラベル®)
(Nano-Label alpaca anti-Histone, recombinant VHH, coupled to ATTO488)
(蛍光標識アルパカ由来抗Histoneナノ抗体)
品番tba488-10/-100 外部リンク
免疫原Histone
交差種-
特異性Histoneラベル®は、ヒストンH2A-H2Bヘテロダイマーに特異的に結合するため、細胞周期全体でクロマチン(間期クロマチン、クロマチン凝縮、有糸分裂染色体)を免疫染色します。
アプリケーションIF(免疫蛍光染色)、ICC(免疫細胞化学)
標識ATTO488
宿主動物/免疫動物アルパカ(組換えモノクローナルVHH抗体)
クローン番号-
抗体タイプアルパカ由来シングルドメイン一価抗体
(Alpaca single domain antibodies, monovalent)
検証済みサンプルTested in cell culture human HeLa cells. Fixed (formaldehyde, methanol, or glutaraldehyde) and permeabilized cells
適合顕微鏡例Wide-field or epifluorescence microscopy; confocal microscopy; super-resolution microscopy e.g. 3D-SIM, PALM, STED, STORM; light sheet microscopy
抗体親和性(KD値)-
フォーマット液体
容量10µL/100µL(for Atto)
(Because of the small size of the VHH these volumes correspond to about 10 times the volume of conventional IgG antibodies.)
タンパク質濃度0.5 - 1 mg/mL (conjugates)
参考希釈倍率-
別名Recombinant, monoclonal anti-histone single domain antibody (sdAb) fragment
バッファー・保存剤Purified recombinant protein in PBS supplemented with preservative 0.09 % sodium azide
保存方法
  • ATTO蛍光色素標識抗体は4℃で遮光して保管してください。
  • ATTO蛍光色素標識抗体は凍結しないよう注意してください。

その他

■ Histone-Label® アプリケーション参考資料

よくある質問 FAQ

【01】超解像顕微鏡法に使用できますか?

はい、Nano-BoosterおよびNano-Labelは超解像顕微鏡法に最適です。小サイズ(2~3 nm)であるため、結合誤差が最小限に抑えられ、従来の抗体(直線寸法:15 nm)よりも正確で高密度の染色が可能です。Nano-BoosterまたはNano-Labelの蛍光色素の選択は、顕微鏡のセットアップとレーザーによって異なります。以下をおすすめします。

  • STED:ATTO647N、Abberior STAR 635P
  • STORM:Alexa Fluor® 647、ATTO488
  • SIM:ATTO488/594

【02】生細胞イメージングに使用できますか?

はい、細胞表面に融合タンパク質が発現している場合に使用可能です。
Nano-BoosterとNano-Labelはタンパク質であり、透過処理されていない細胞膜は透過しません。したがって、融合タンパク質が細胞内にある場合は、エレクトロポレーション等のタンパク質導入法やタンパク質導入試薬の使用が必要です。旧クロモテック社の経験上、最も効率的な方法はマイクロインジェクション法です。

【03】2つ以上のターゲットを同時染色できますか?

はい、Nano-BoosterまたはNano-Labelを2つ以上組み合わせて使用できます。
例えば、通常1:200希釈でNano-Boosterを使用する場合、200 µLのブロッキング溶液に、ATTO488標識GFPモノクローナル抗体(品番:gba488-10/-100)とATTO594標識RFPモノクローナル抗体(品番:rba594-10/-100)をそれぞれ1 µLずつ添加します。

【04】いくつの蛍光色素分子が結合していますか?

各Nano-BoosterまたはNano-Label分子は、平均して1~2個の蛍光色素分子を有します。Alexa Fluor®蛍光色素標識Nano-Boosterは、部位特異的方法によって、VHHあたり合計2つの蛍光色素が標識されています。Atto647N蛍光色素標識Nano-Boosterは、VHHあたり最大1つの蛍光色素がC末端に標識されています。

【05】生細胞の細胞膜を透過しますか?

いいえ、透過処理されていない細胞膜は透過しません。

使用例

■ Histone-Label®(蛍光標識Histone抗体)

Hela cells immunostained with Histone-Label_ATTO488, 1:400. Scale Bar, 10µm.
図1
Hela cells immunostained with Histone-Label_ATTO488, 1:400. Scale Bar, 10µm.
ChromoTek Histone-Label is a convenient, ready to use, and high-performing chromatin staining probe with low background levels and that differentiates between euchromatin and heterochromatin. HeLa cells stained in parallel with Histone-Label (1.25 mg/L) and a monoclonal rabbit anti-H2A IgG / anti-rabbit Alexa568 secondary antibody. Histone-Label co-localizes with conventional antibody staining, however Histone-Label better penetrates into the compactly packed nuclei than the anti-H2A IgG and secondary IgGs, which are one order of magnitude larger than the Histone-Label: see more green signal from Histone-Label at center of nuclei and more red signal from anti-H2A IgG on surface/edge of nuclei of merge image on very right.
図2
ChromoTek Histone-Label is a convenient, ready to use, and high-performing chromatin staining probe with low background levels and that differentiates between euchromatin and heterochromatin. HeLa cells stained in parallel with Histone-Label (1.25 mg/L) and a monoclonal rabbit anti-H2A IgG / anti-rabbit Alexa568 secondary antibody. Histone-Label co-localizes with conventional antibody staining, however Histone-Label better penetrates into the compactly packed nuclei than the anti-H2A IgG and secondary IgGs, which are one order of magnitude larger than the Histone-Label: see more green signal from Histone-Label at center of nuclei and more red signal from anti-H2A IgG on surface/edge of nuclei of merge image on very right.
 

■ 全ての評価データはこちらから閲覧できます

Histone-Label®(蛍光標識ヒストン抗体)

• ATTO488標識モノクローナル抗体(組換えVHH抗体)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti Histone, Histone-Label, recombinant VHH (Alpaca) ATTO 488詳細データ PGI TBA488-10 10 UL
¥22,000
Anti Histone, Histone-Label, recombinant VHH (Alpaca) ATTO 488詳細データ PGI TBA488-100 100 UL
¥76,000

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