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商品情報

記事ID : 41421
研究用

免疫沈降(IP)で豊富な実績!高い特異性と親和性、Nano-Trap シリーズ GST-Trap® Agarose(アガロースビーズ標識GST抗体)

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GST-Trap® Agarose(GSTトラップ®アガロース)は、GSTタンパク質の免疫沈降(IP:Immunoprecipitation)実験に最適なアガロースビーズ担体結合済みのGST抗体です。

アガロースビーズ(agarose beads)には、アルパカ(Alpaca)を宿主動物(免疫動物)として作製された「抗GST組換えモノクローナルVHH抗体」が結合しています。VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインであり、高い特異性と親和性を示します。

高親和性&高特異性アルパカ組換えVHH免疫沈降(IP)に最適

背景

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain-only antibody)」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図. 従来の1/10ほどの分子量
図. 従来の1/10ほどの分子量
 

■ Nano-Trapとは?

ビーズに結合したVHH抗体Nano-Trap(ナノトラップ)は、迅速かつ効率的な免疫沈降(IP)に最適です。各種担体(アガロースビーズ、磁性アガロースビーズ、磁気ビーズ)に結合したVHH抗体で構成されます。

各種ビーズ上に結合したVHH抗体は、ビーズ上に残存し、SDSサンプルバッファー中で溶出されません。したがって、従来のIP解析でしばしば問題となるIP抗体由来の軽鎖または重鎖バンドの干渉が無く、シングルバンドの精製を可能とします。さらに、ウエスタンブロットに使用する一次抗体/二次抗体を自由に選択できます。

 

■ Nano-Trapのアプリケーション

  • IP(免疫沈降)/ CoIP(共免疫沈降)
  • ChIP(クロマチン免疫沈降)/ RIP(RNA免疫沈降)
  • 質量分析(Mass spectrometry)
  • On-bead enzyme assay
NanoTrap(左)と従来型であるProtein A/G結合IgG抗体(右)を用いた免疫沈降の概要。Nano-Trapでは、単一のバンドを得られ、従来型とは異なり軽鎖/重鎖由来のバンドは観察されません。
図. Nano-Trap(左)と従来型であるProtein A/G結合IgG抗体(右)を用いた免疫沈降の概要。Nano-Trapでは、単一のバンドを得られ、従来型とは異なり軽鎖/重鎖由来のバンドは観察されません。
 

■ Proteintech Group(プロテインテック)とは?

Proteintech Group, Inc.(プロテインテック)社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン(www.ptglab.co.jp 外部リンク)が担当しています。

  • 全てオリジナル商品:自社ラボで製造、検証済み(購入後1年間の交換保証付き)
  • 数多くの評判:国内・海外における累計61,000報以上の論文使用実績(2021年12月現在)
  • 迅速な納期:約12,500品目を当社倉庫に国内在庫!

お得なキャンペーンも随時開催しています。2022年3月10日(木)まで【1】『一次抗体通常サイズ』25% 割引キャンペーン、【2】『トライアルサイズ』¥20,000キャンペーン、【3】『旧クロモテック社製品、二次抗体、ELISA、タンパク質』20% 割引キャンペーンを実施しています。忙しい年度末に価格と納期の面でもサポートいたしますので、この機会にぜひご検討ください。

プロテインテックグループにChromoTek(クロモテック)が加わりました!

主に『アルパカ抗体(組換えVHH)』の製造を行う旧ChromoTek (クロモテック、ドイツ)社(www.chromotek.com 外部リンク)は、2020年10月よりProteintech Group(プロテインテック 、米国)ブランドの一部になりました。緑色蛍光タンパク質(GFP)の免疫沈降(IP)実験で2,950報以上の文献実績を有する GFP-Trap® をはじめ、アルパカ由来の組換えVHH抗体は、高い親和性、特異性、および安定性を発揮します。

旧ChromoTek社製品はプロテインテックがお届けします

特長

■ GST-Trap® Agarose(アガロースビーズ標識GST抗体)
商品名GST-Trap® Agarose(GSTトラップ®アガロース)
(Nano-Trap alpaca anti-GST, recombinant VHH, coupled to agarose beads)
(アガロースビーズ標識アルパカ由来抗GSTナノ抗体)
品番sta-10/sta-20/sta-100/sta-200/sta-400 外部リンク
免疫原GST
交差種-
特異性Glutathione S-Transferase (GST), Schistosoma japonicum
アプリケーションIP(免疫沈降)、CoIP(共免疫沈降)、ChIP(クロマチン免疫沈降)、RIP(RNA免疫沈降)
標識アガロースビーズ(Agarose Beads)
宿主動物/免疫動物アルパカ(組換えモノクローナルVHH抗体)
クローン番号-
抗体タイプアルパカ由来シングルドメイン一価抗体
(Alpaca single domain antibodies, monovalent)
抗体親和性(KD値)Dissociation constant KD of 1 nM
結合キャパシティ-
容量250 µL (10 reactions)/500 µL (20 reactions)/2.5 mL (100 reactions)/5 mL (200 reactions)/10 mL (400 reactions)
フォーマット液体(slurry)
ビーズ詳細Bead size: ~ 90 µm (cross linked 4 % agarose beads)
洗浄バッファー適合性4 M urea, 2 M NaCl, 10 mM DTT, 2 % Nonidet P40 Substitute, 1 % Triton X-100
溶出方法- SDS sample buffer for SDS/PAGE & Western blot - 0.2 M glycine pH 2.5 Instead of elution, we recommend on bead assays like on-bead digestion for MS analysis.
別名Recombinant, monoclonal anti-GST single domain antibody (sdAb) fragment
バッファー・保存剤20 % EtOH
保存方法
  • 商品到着後は、4℃で保管してください。
  • 凍結はしないよう注意してください(凍結禁止)。

その他

よくある質問 FAQ

【01】N末端とC末端融合タグはどちらも機能しますか?

はい、N末端とC末端融合タグのどちらも機能します。

【02】非特異的タンパク質の結合を回避する方法はありますか?

必要に応じて、サンプルの「プレクリア処理(Pre-clearing)」を実施してください。その際、コントロールアガロース(品番:bab-20)またはコントロール磁性アガロース(品番:bmab-20)を利用できます。詳細は以下のトラブルシューティングガイドをご覧ください。

【03】結合タンパク質をネイティブ状態で溶出できますか?

0.2 M glycine(pH 2.5)を利用して室温条件で溶出できます。ビーズを60~120秒間ピペッティングし、この手順を繰り返します。1 M Tris base(pH 10.4)を直後に添加して上清を中和してください。

【04】免疫沈降に必要な哺乳類細胞数を教えてください。

1回の免疫沈降反応で約10^6~10^7の哺乳類細胞の使用をおすすめします。収量は目的のタンパク質や相互作用因子の発現レベルに依存する場合があります。

【05】免疫沈降に必要な細胞抽出物量を教えてください。

哺乳類細胞以外の場合、0.5~1.0mgの細胞抽出物の使用をおすすめします。

【06】質量分析のために、結合タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

免疫沈降後にビーズ上で直接消化する方法も利用可能です。より迅速で効率的なサンプル前処理と高収率を実現します。詳細は以下の資料をご覧ください。

【07】酵素アッセイのために目的タンパク質をビーズから溶出する必要がありますか?

いいえ、活性中心がブロックされていない限り、直接酵素アッセイが可能です。詳細は以下の資料をご覧ください。

【08】Nano-Trapの解離定数を教えてください。

一般的に重鎖抗体は高い親和性を有します。解離定数(Kd値)は、低ナノモラー(nM)からピコモラー(pM)レベルの範囲です。旧クロモテック社は以下のKd値を決定しました。

  • GFP-Trap:1 pM(Picomolar:10^-12 molar)*
  • RFP-Trap:5 nM(Nanomolar:10^-9 molar)
  • MBP-Trap:4 nM(Nanomolar:10^-9 molar)
  • GST-Trap:1 nM(Nanomolar:10^-9 molar)*
  • Myc-Trap:0.5 nM(Nanomolar:10^-9 molar)(2x Myc ペプチドに対して)
  • Spot-Trap:6 nM(Nanomolar:10^-9 molar)

* Kinetic parameterは、Dynamic Biosensors社(www.dynamic-biosensors.com 外部リンク)の独自技術であるswitchSENSE®法を利用して測定しました。

【09】1回の免疫沈降に必要なNano-Trap量を教えてください。

親和性が非常に高いため、1回の反応あたり25 µL(Nano-Trap slurry量)で十分です。

使用例

■ GST-Trap® Agarose(アガロースビーズ標識GST抗体)(品番:sta-10/-20/-100/-200/-400)

Immunoprecipitation of GST with GST-Trap. Note effective pull-down of GST-fusion proteins: No GST-fusions left in non-bound (FT) lane in Western Blot. I: Input, FT: Flow-Through, B: Bound
図1
Immunoprecipitation of GST with GST-Trap. Note effective pull-down of GST-fusion proteins: No GST-fusions left in non-bound (FT) lane in Western Blot. I: Input, FT: Flow-Through, B: Bound
 

GST-Trap® Agarose(アガロースビーズ標識GST抗体)

■アガロースビーズ標識モノクローナル抗体(組換えVHH抗体)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti GST, GST-Trap, recombinant VHH (Alpaca) Agarose詳細データ PGI STA-10 10 RXN
¥40,800(キャンペーン中)
¥51,000(通常希望販売価格)
Anti GST, GST-Trap, recombinant VHH (Alpaca) Agarose詳細データ PGI STA-20 20 RXN
¥67,200(キャンペーン中)
¥84,000(通常希望販売価格)
Anti GST, GST-Trap, recombinant VHH (Alpaca) Agarose詳細データ PGI STA-100 100 RXN
[5 x 20 rxns]
¥304,800(キャンペーン中)
¥381,000(通常希望販売価格)
Anti GST, GST-Trap, recombinant VHH (Alpaca) Agarose詳細データ PGI STA-200 200 RXN
[10 x 20 rxns]
お問い合わせ
Anti GST, GST-Trap, recombinant VHH (Alpaca) Agarose詳細データ PGI STA-400 400 RXN
[20 x 20 rxns]
お問い合わせ

[関連]GST-Trap® Agarose(アガロースビーズ標識GST抗体)キット

■ 「推奨バッファー」も入ってお得な免疫沈降(IP)キットです。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
GST-Trap Agarose, kit (Alpaca) 詳細データ PGI STAK-20 20 RXN
¥84,800(キャンペーン中)
¥106,000(通常希望販売価格)

「アガロースビーズ標識GST抗体」と「バッファー類(Lysis buffer、RIPA buffer、Dilution buffer、Wash bufferを含む)」のセット商品です。

[関連]Binding Control Agarose(コントロールアガロース)

結合コントロール」または「プレクリア処理(Pre-clearing)」に利用できるアガロースビーズです。VHH抗体は結合していません。プレクリア処理に関しては、旧クロモテック社ブログ記事「免疫沈降(IP)で低バックグラウンドを実現するために 外部リンク」をご参照ください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Blocked agarose beads (binding control), Agarose詳細データ PGI BAB-20 20 RXN
¥12,000(キャンペーン中)
¥15,000(通常希望販売価格)

[関連]GST 抗体

[関連]Nano-Trap(ナノトラップ)一覧

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商品は「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないように、十分ご注意ください。

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