単一細胞解像度における脂質ラフト構成要素の迅速なマルチプレックス解析

Sci. Signal. 22 Sep 2015:
Vol. 8, Issue 395, pp. rs11
DOI: 10.1126/scisignal.aac5584

Philipp Schatzlmaier,¹ Verena Supper,¹ Lisa Göschl,^2,3 Alexander Zwirzitz,¹ Paul Eckerstorfer,¹ Wilfried Ellmeier,² Johannes B. Huppa,^{1 *} Hannes Stockinger^{1 *}

¹ Institute for Hygiene and Applied Immunology, Center for Pathophysiology, Infectiology and Immunology, Medical University of Vienna, Lazarettgasse 19, A-1090 Vienna, Austria.
² Institute of Immunology, Center for Pathophysiology, Infectiology and Immunology, Medical University of Vienna, Lazarettgasse 19, A-1090 Vienna, Austria.
³ Division of Rheumatology, Department of Internal Medicine III, Medical University of Vienna, Währinger Gürtel 18-20, A-1090 Vienna, Austria.

* Corresponding author. E-mail: johannes.huppa@meduniwien.ac.at (J.B.H.); hannes.stockinger@meduniwien.ac.at (H.S.)

要約 脂質ラフトは、特徴的なクラスの高度に動的な細胞膜マイクロドメインであり、細胞のホメオスタシス、分化、およびシグナル伝達に不可欠である。しかし、希少な細胞、発生的に異質な細胞集団、あるいは脂質ラフトとの会合が弱い分子を使用する場合、脂質ラフトの定量的分析は困難である。われわれは、非イオン性界面活性剤を通すことによる遠心分離中の部分溶解で核に付随する脂質ラフトの構成要素に基づく迅速な生化学的手法を示す。われわれのプロトコールは、開始に必要な実験材料や労力が少なく、ラフトに存在するタンパク質の単一細胞解像度における多次元フローサイトメトリー定量を可能にした。それにより、複合的な細胞集団における少数の細胞から、細胞シグナル伝達、分化、遺伝子変異がもたらす動態に加えて、膜構成要素を決定することが可能になる。

Citation: P. Schatzlmaier, V. Supper, L. Göschl, A. Zwirzitz, P. Eckerstorfer, W. Ellmeier, J. B. Huppa, H. Stockinger, Rapid multiplex analysis of lipid raft components with singlecell resolution. Sci. Signal. 8, rs11 (2015).