高い浸透性！免疫細胞染色に最適、Nano-Label シリーズ Spot-Label®（蛍光標識Spotタグ抗体）

Spot-Label®（Spotラベル®）は、Spotタンパク質の免疫蛍光染色（IF：Immunofluorescence）実験に最適な蛍光色素標識済みのアルパカ由来Spotタグ抗体です。

蛍光色素には、アルパカ（Alpaca）を宿主動物（免疫動物）として作製された「抗Spot組換えモノクローナルVHH抗体」が結合しています。VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体（Heavy chain-only antibody）」由来の抗原結合ドメインであり、高い特異性と親和性を示します。VHH抗体は、一般的の抗体よりもサイズが小さく浸透性が高いため、細胞染色に最適です。

■ VHH抗体とは?

VHH抗体は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体（Heavy chain-only antibody）」由来の抗原結合ドメインです。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH

図. 従来の1/10ほどの分子量

■ NanoBooster®/NanoLabel®とは?

Nano-Booster（ナノブースター）およびNano-Label（ナノラベル）は、蛍光タンパク質や細胞内タンパク質を標識する蛍光プローブです。蛍光色素（Alexa Fluor®またはAtto色素）に共有結合したVHH抗体で構成されます。抗体サイズが小さいため、高浸透性かつ高解像なイメージングに寄与し、免疫蛍光染色（IF）を中心としたアプリケーションに利用できます。

• IF（免疫蛍光染色）/ ICC（免疫細胞化学）
• IHC（免疫組織化学）
• 超解像顕微鏡観察（SRM：Super-resolution microscopy）

図. Nano-Boosterの概要。
GFP/RFP融合タンパク質の蛍光シグナルは、細胞固定後に減少します。蛍光シグナルの増幅にGFP/RFP-Booster®を利用できます。

• NanoBooster®/NanoLabel®（ナノブースター&ナノラベル）

■ Proteintech Group（プロテインテック）とは?

Proteintech Group, Inc.（プロテインテック）社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン（www.ptglab.co.jp ）が担当しています。

• 全てオリジナル商品：自社ラボで製造、検証済み（購入後1年間の交換保証付き）
• 数多くの評判：国内・海外における累計104,300報以上の論文使用実績（2024年4月現在）
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プロテインテックは「日本で成長している抗体サプライヤー」

プロテインテックとChromoTek（クロモテック、ドイツ）は、引用数ランキング付の抗体検索サイトを運営する英国「CiteAb 」が主催の「2022 CiteAb Awards」において「Researchers' choice（研究者の選択）」部門と「Environmental Initiative of the Year（今年の環境イニシアチブ）」部門でそれぞれ受賞者として選出されました。優れた品質およびカスタマーサービス、環境への取り組みが高く評価されています。

また「Which suppliers should you watch in the Japanese antibody market?（日本の抗体市場で注目すべきサプライヤーは?）」のブログ記事で、近年発表された論文中の製品引用数を根拠にプロテインテックが「日本で成長している抗体サプライヤー」として「注目に値するシェアの拡大・急上昇」を見せていると言及されています。以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

抗体&免疫アッセイ サイトカイン・増殖因子 ChromoTek 試薬 

 

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■ Spot-Label® アプリケーション参考資料

• ［プロトコール］Spot-Label®（Alexa Fluor®488標識）
• ［プロトコール］Spot-Label®（Alexa Fluor®568標識）
• ［プロトコール］Spot-Label®（Alexa Fluor®647標識）
• ［プロトコール］Spot-Label®（ATTO488標識）
• ［プロトコール］Spot-Label®（ATTO594標識）

■ Spot-Label®（蛍光標識Spotタグ抗体）

図1
STED: IF of Spot-tagged Actin-Chromobody with Spot-Label Atto594 bivalent (1:1,000). Gated STED images were acquired with a Leica TCS SP8 STED 3X microscope with pulsed White Light Laser excitation at 590 nm and pulsed depletion with a 775 nm laser. Objective: 100x Oil STED White, NA: 1.4. Pixel size: 21 x 21 nm; z-Step size of z-Stacks: 0.16 µm. Images were deconvolved with Huygens Professional (SVI). STED images were recorded at the Core Facility Bioimaging at the Biomedical Center, LMU Munich.

図2
Widefield images of HeLa cells expressing Actin-Chromobody-EGFP-Spot-Tag immunostained with Spot-Label ATTO594, bivalent (1:5,000). Left: GFP channel, middle: channel for ATTO594, right: overlay, also with DAPI. Scale bar, 10 µm.

図3
Confocal images of HeLa cells expressing Tom70-EGFP-Spot-Tag immunostained with Spot-Label ATTO594 bivalent (1:1,000). Left: EGFP fluorescence, middle: ATTO594 signal, right: merge. Scale bar, 10 µm. The images were acquired with Leica TCS SP8 microscope, 100X oil objective, at the Core Facility Bioimaging at the Biomedical Center, LMU Munich, and deconvolved with Huygens Professional (SVI). Left: GFP fluorescence, middle: ATTO594 signal, right: merge. Scale bar, 10 µm.

図4
Left: HeLa cells transiently expressing Spot-Tag®-Lamin B1 were immunostained with Spot-Label® Alexa Fluor® 488 (ebAF488, 1:800). Right: Control staining of untransfected cells. Scale bar, 10 µm. Images were acquired with the Thermo Scientific CellInsight CX7, 20X objective

図5
Left: HeLa cells transiently expressing pSpot Spot-Tag®-Actin (ev-31) were immunostained with Spot-Label® Alexa Fluor® 568 (red, ebAF568, 1:800) and DAPI (blue). Right: Control staining with Spot-Label® Alexa Fluor® 568 (red, ebAF568, 1:800) and DAPI (blue) of untransfected HeLa cells showing no unspecific background. Scale bar, 10 µm. Images were acquired with the Thermo Scientific CellInsight CX7, 20X objective.

図6
Left: HeLa cells transiently expressing pSpot Spot-Tag®-Actin (ev-31) were immunostained with Spot-Label® Alexa Fluor® 647 (magenta, ebAF647, 1:800) and DAPI (blue). Right: Control staining, no background noise; HeLa cells without pSpot Spot-Tag®-Actin expression were immunostained with Spot-Label® Alexa Fluor® 647 (magenta, ebAF647, 1:800) and DAPI (blue). Scale bar, 10 µm. Images were acquired with the Thermo Scientific CellInsight CX7, 20X objective.

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