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記事ID : 42826
研究用

アルパカ由来重鎖抗体の抗原結合ドメイン(ナノボディ)を販売 VHH 抗体(未標識)

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旧ChromoTek (クロモテック、ドイツ)社は、Nanobody®(ナノボディ)としても知られる、アルパカ由来のVHH抗体(アルパカ抗体)を販売しています。未標識のVHH抗体は、NHSエステルとの反応を利用することで、VHH中のリジン残基のアミンを介して、任意の蛍光色素と結合させることがきます。

細胞研究で汎用される蛍光タンパク質(GFP、RFP、mNeonGreen、TurboGFP等)、タグタンパク質(GST、Halo、MBP、V5等)、および各種マーカー(Histonep、p53、PARP1、Vimentin等)に対する抗体を取り扱いしています。

高親和性&高特異性アルパカ組換えVHH未標識製品

背景

■ VHH抗体とは?

VHH抗体(Variable domain of Heavy chain of Heavy chain antibody)は、Nanobody® としても知られるラクダ科動物の「重鎖抗体(Heavy chain antibody、Heavy chain-only antibody)」に由来する抗原結合ドメイン(可変領域、Variable domain)です。一般的な抗体と比べて、10分の1程度とサイズが小さく、高い特異性と親和性を示すことで知られます。

図1. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図1. ラクダ科動物のユニークな重鎖抗体・VHH
図2. 従来の1/10ほどの分子量
図2. 従来の1/10ほどの分子量
 

■ VHH抗体の発見

単一抗原認識ドメインを持つ、軽鎖のない新しい抗体クラスは、1980年代後半に、ブリュッセル自由大学の科学者によって偶然発見されました。大学での実習中、生物学専攻学生Raymond HamersとCecile Castermanの2人が、たまたま実験室の冷凍庫にヒトコブラクダの凍結血清が数リットルあるのを発見し、この珍しい検体の抗体分離に意欲的に取り組んだことが始まりでした。その後、彼らは、免疫グロブリンの通常分布に加え、科学的に既知なものと一切一致しない小さな抗体群を発見しました。彼らは、その画分が単に「真」の抗体が劣化した抗体群であるとは考えず、さらに詳細に特性評価を始めました。そして遂に、単一抗原認識ドメインを持つ、軽鎖のない新しい抗体クラスを発見したのです(PMID:8502296 外部リンク)。これらの抗体は後に、典型的な実験動物ではないラマ、アルパカを含む様々なラクダ科の種でも発見されました。(この発見物語についての詳細は、マイケル・グロス著『鳥と蜂とカモノハシ』(本邦未訳:Michael Gross著『The birds, the Bees and the Platypuses』)をお読みください。)

■ VHH抗体の特長

このラクダ科の動物の抗体は、その構造(重鎖のみで構成され、軽鎖がない)に基づいて、重鎖抗体(HCAb:Heavy chain-only antibody)と命名されています。HCAbは、病理学的症例を除き、他の哺乳類には見られません。1995年、Greenbergらが、コモリザメで類似したHCAbを発見しましたが、進化論的分析により、ラクダ科の動物とサメのHCAbの進化は独立的であることが示されました(Greenbergら、1995年、PMID:7877689 外部リンク)。そして、2011年、Flajnikらは、これらの小さな単一ドメイン抗原結合断片は、比較的大きな従来型抗体と異なり、他の方法ではアクセス不可能なエピトープ(酵素の触媒中心など)の標的化を可能にすると記載しています(Flajnikら、2011年、PMID:21829328 外部リンク)。 重鎖抗体の断片抗原結合(Fab)部分は、軽鎖が存在しないため、単一ドメインに縮小しています。したがって、重鎖抗体(HCAb)は、単一ドメイン抗体(sdAb)クラスに属します。この単一ドメインは、VHHドメイン重鎖抗体の可変ドメイン)またはNanobody®(ナノボディ)と呼ばれています。VHHドメインは、完全な抗原結合部位を含み、最小(約15kDa、従来型抗体のわずか10分の1の大きさ)の機能的抗原結合断片です。

■ VHH抗体の利点

VHH抗体の利点は、細菌中で容易に選択、生産することができるため、事実上、一貫した品質で無制限の供給を確保することです。また、VHH抗体は、従来型の抗体とは対照的に並外れた安定性も備えており、温度、カオトロピック剤、界面活性剤、グリセロール、塩、還元、pHの極端な条件にも耐えることができます。ChromoTekは、自社製単一ドメイン抗体断片由来製品の機能と構造を徹底して特性評価し、個々のVHHの適用と化学的および熱安定性を判定しています。さらに、製造から5年以上経過した一部のVHH抗体を検証したところ、未だ機能性が損なわれておらず、活性もほとんどまたは全く失われていないことが分かりました。

■ Proteintech Group(プロテインテック)とは?

Proteintech Group, Inc.(プロテインテック)社は、2001年に設立された抗体製造メーカーです。現在までに、米国本社の他、英国、中国、ドイツ、フランス、シンガポール等で支社を展開し、各国で様々なマーカー抗体、タンパク質研究用試薬を供給しています。国内におけるテクニカルサポート等は、2016年より株式会社プロテインテック・ジャパン(www.ptglab.co.jp 外部リンク)が担当しています。

  • 全てオリジナル商品:自社ラボで製造、検証済み(購入後1年間の交換保証付き)
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プロテインテックは「日本で成長している抗体サプライヤー」

プロテインテックとChromoTek(クロモテック、ドイツ)は、引用数ランキング付の抗体検索サイトを運営する英国「CiteAb 外部リンク」が主催の「2022 CiteAb Awards」において「Researchers' choice(研究者の選択)外部リンク」部門と「Environmental Initiative of the Year(今年の環境イニシアチブ)外部リンク」部門でそれぞれ受賞者として選出されました。優れた品質およびカスタマーサービス、環境への取り組みが高く評価されています。

また「Which suppliers should you watch in the Japanese antibody market?(日本の抗体市場で注目すべきサプライヤーは?)外部リンク」のブログ記事で、近年発表された論文中の製品引用数を根拠にプロテインテックが「日本で成長している抗体サプライヤー」として「注目に値するシェアの拡大・急上昇」を見せていると言及されています。以下のリンクから、プロテインテックの主なカテゴリー製品をご覧いただけます。

 

よくある質問 FAQ

【01】VHH(ナノボディ)はモノクローナルですか?

はい、ナノボディは組換えモノクローナルです。

【02】各ナノボディの生物学的パラメーターを教えてください。

以下の表を参照してください。

■ 各ナノボディの生物学的パラメーター
VHH名 MW(kDa) Molar吸光係数
(M-1 cm-1
理論上のpI
GFP VHH 13.9 27,055 9.4
GST VHH 14.8 28,545 8.2
Halo VHH 14.8 23,045 9.4
Histon VHH 14.4 25,565 10.2
MBP VHH 14.1 27,055 10.0
Mdm4/Hdmx VHH 13.6 14,565 10.1
MK2 VHH 14.4 32,555 9.7
mNeonGreen VHH 14.3 21,680 8.0
Myc VHH 13.5 23,045 9.6
p53 C-term VHH 14.8 34,170 9.2
p53 N-term VHH 13.0 20,065 9.7
PARP1 VHH 14.4 17,670 9.2
RFP VHH 14.9 30,035 9.3
SNAP/CLIP-tag VHH 13.1 24,075 9.8
Spot VHH (bivalent) 30.3 46,340 5.3
TurboGFP VHH 13.6 18,575 9.5
V5 VHH 14.6 22,710 8.0
Vimentin VHH 26.7 48,150 10.0

【03】ナノボディにタグは融合されていますか?

はい、ナノボディのC末端には6*Hisタグが融合されています。

【04】GFP-VHHは、Protein AまたはProtein Gに結合しますか?

はい、Protein Aに結合します。Protein Gには結合しません。
(注:抗GFP以外のVHHについては個別にお問い合わせください。Protein Aに結合性を示さなかった、または試験を実施していない場合があります。)

【05】VHHの受託作製サービスは提供していますか?

あいにく、プロテインテック社(旧クロモテック社を含む)では日本国内における抗体の受託作製サービスを提供しておりません。

使用方法

■ 未標識VHH抗体アプリケーション参考資料

VHH 抗体(未標識)

■ 未標識モノクローナル抗体(組換えVHH)
(※ 本製品は「未標識」のVHH製品です。検出のためには蛍光色素標識キット等を使用して、直接標識を行う必要があります。)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti GFP, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI GT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti GST, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI ST-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti Halo, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI OT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti Histone, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI TT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti MBP, VHH recombinant binding protein (Alpaca) 詳細データ PGI MBT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti MK2, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI MT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti mNeonGreen, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI NT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti Myc, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI YT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti p53 C-term, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI PT2-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti p53 N-term, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI PT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti PARP1, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI XT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti RFP, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI RT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti SNAP/CLIP-tag, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI WT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti Spot, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI ETB-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥102,000
Anti TurboGFP, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI TBT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti V5, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI V5T-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥77,000
Anti Vimentin, recombinant VHH (Alpaca) 詳細データ PGI VT-250 250 UL
[1 mg/ml]
¥133,000

新型コロナウイルス研究に!SARS-CoV-2 Spike Protein VHH 抗体(未標識)

■ 未標識モノクローナル抗体(組換えVHH)
(※ 本製品は「未標識」のVHH製品です。バイオレイヤー干渉法(BLI)を用いたカイネティクス解析、スパイクタンパク質との相互作用解析、ACE2タンパク質とスパイクタンパク質の競合阻害アッセイ等にご利用いただけます。)

各クローンの樹立方法や特性は以下の参考文献「NeutrobodyPlex - SARS-CoV-2 ナノボディを使用した中和免疫応答のモニタリング(Wagner et al., 2021)」をご参照ください。

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1220詳細データ PGI SC-NM1220-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1220詳細データ PGI SC-NM1220-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1221詳細データ PGI SC-NM1221-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1221詳細データ PGI SC-NM1221-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1222詳細データ PGI SC-NM1222-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1222詳細データ PGI SC-NM1222-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1223詳細データ PGI SC-NM1223-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1223詳細データ PGI SC-NM1223-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1224詳細データ PGI SC-NM1224-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1224詳細データ PGI SC-NM1224-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1226詳細データ PGI SC-NM1226-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1226詳細データ PGI SC-NM1226-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1227詳細データ PGI SC-NM1227-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1227詳細データ PGI SC-NM1227-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1228詳細データ PGI SC-NM1228-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1228詳細データ PGI SC-NM1228-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1229詳細データ PGI SC-NM1229-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1229詳細データ PGI SC-NM1229-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1230詳細データ PGI SC-NM1230-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1230詳細データ PGI SC-NM1230-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1266詳細データ PGI SC-NM1266-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1266詳細データ PGI SC-NM1266-100 100 UG
¥128,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1267詳細データ PGI SC-NM1267-20 20 UG
¥43,000
Anti SARS-CoV-2 Spike, recombinant VHH,  (Alpaca) , NM1267詳細データ PGI SC-NM1267-100 100 UG
¥128,000

[関連]ビオチン標識VHH 抗体

■ ビオチン標識モノクローナル抗体(組換えVHH)

品名 メーカー 品番 包装 希望販売価格
Anti GFP, recombinant VHH (Alpaca) Biotin詳細データ PGI GTB-250 250 UL
¥101,000

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■ 蛍光タンパク質-VHHモノクローナル抗体発現用プラスミド

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